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1、9版伯杰鉴定细菌手册分为24个属，108个种现增加到31个属,常见的15个属1.占临床分离菌总数50%2.占G-杆菌总数80%3.占败血症50%4.占尿路感染70一.分布第1页/共55页二二.临床意义临床意义l有些菌属对人类有明显的致病作用1、鼠疫耶耳森菌-引起烈性传染病2、埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶耳森菌属可导致腹泻、食物中毒.伤寒l多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌第2页/共55页与人类感染有关的肠杆菌科细菌有31个菌属，其中临床标本中常见的菌属有15种克雷伯菌属爱德华菌属邻单胞菌属变形杆菌属普罗威登斯菌属沙门菌属耶尔森菌属志贺菌属沙雷菌属肠杆菌属埃希菌属哈夫尼亚菌属枸橼酸杆菌属
2、摩根菌属多源菌属第3页/共55页三.微生物特性-杆菌，多数有鞭毛、菌毛2.发酵葡萄糖，兼性厌氧3.氧化酶阴性4.4.还原硝酸盐为亚硝酸盐5.5.触酶（）6.6.营养条件不高，第4页/共55页涂片：涂片：G-b氧化酶试验氧化酶试验非发酵菌、弧菌非发酵菌、弧菌+肠杆菌科细菌、不动、嗜麦芽菌肠杆菌科细菌、不动、嗜麦芽菌双糖试验双糖试验FO不动、嗜麦芽不动、嗜麦芽肠杆菌科细菌肠杆菌科细菌苯丙，苯丙，葡盐葡盐,枸枸,硝硝,赖赖,鸟鸟,氨对氨对,山山,肌肌,侧侧,吲哚吲哚 硝酸盐还原硝酸盐还原+嗜麦芽嗜麦芽不动不动四、鉴定流程图第5页/共55页种属鉴定种属鉴定科的特征科的特征硝酸盐还原硝酸盐还原葡萄糖发酵
3、葡萄糖发酵氧化酶氧化酶 触酶触酶属间鉴定特征属间鉴定特征种间鉴定特征种间鉴定特征血清学分型血清学分型报告细菌种名报告细菌种名报告细菌血清型报告细菌血清型概概述述第6页/共55页五、肠杆菌科的初步分群五、肠杆菌科的初步分群 可用苯丙氨酸和葡萄糖酸盐试验将肠杆菌科分为四大组第7页/共55页菌菌 属属 名名 苯丙氨酸 葡萄糖酸盐变形杆菌属 +普鲁维登斯菌属 +摩根氏菌属 +克雷伯菌属 +肠杆菌属 +沙雷菌属 +哈夫尼亚菌 +埃希菌属 志贺菌属 沙门菌属 枸橼酸杆菌属 爱德华菌属 耶尔森菌属 第8页/共55页六六.苯丙氨酸阳性组的各属鉴别苯丙氨酸阳性组的各属鉴别试 验 变形杆菌属 普鲁维登菌属 摩根氏
4、菌属 塔特姆属H2S +-枸橼酸盐 +/-+-靛基质 +/-+-第9页/共55页1.变形杆菌属内各种的鉴别试 验 普通变形杆菌 奇异变形杆菌 潘氏变形杆菌 产粘液变形杆菌靛基质 +-鸟基酸 -+-木糖 +-第10页/共55页2.普鲁维登菌属各种的鉴别试验 产碱 斯图 雷极 普鲁维登斯菌 普鲁维登斯菌 普鲁维登斯菌侧金盏花醇 +-+甘露醇 +-第11页/共55页生化反应雷氏斯氏产碱拉氏海氏吲哚产生+-肌醇+-V海藻糖-+-戊五醇+-+-+第12页/共55页3.摩根菌属种的鉴定试验 摩根摩根菌 摩根菌(生物1群)赖氨酸 -+动力+-第13页/共55页+_+苯丙氨酸+H2S枸橼酸盐靛基质鸟氨酸靛基质
5、侧金盏花醇甘露醇普通变形杆菌奇异变形杆菌潘氏变形杆菌产碱普鲁维登斯菌雷极普鲁维登斯菌斯图普鲁维登斯菌摩 根 菌塔特姆菌.苯丙氨酸阳性组菌属鉴别索引图4-第14页/共55页七七.葡萄糖酸盐阳性组各属鉴别葡萄糖酸盐阳性组各属鉴别第15页/共55页u原克雷伯菌属（klebsiella）有5个种，2个亚种肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌解鸟氨酸克雷伯菌分分类类克克雷雷伯伯菌菌属属臭鼻亚种臭鼻亚种鼻硬结亚种鼻硬结亚种第16页/共55页培养特征培养特征血琼脂上菌落较大，呈血琼脂上菌落较大，呈黏液状，以接种环挑取黏液状，以接种环挑取时易拉成丝时易拉成丝在肠道培养基上呈发酵在肠道培养基上呈发酵乳糖小菌落乳糖小菌落在液
6、体培养基内生长混在液体培养基内生长混浊、浓厚、可见菌膜，浊、浓厚、可见菌膜，管底有粘性沉淀物管底有粘性沉淀物 K.pneumoniae 菌落（血平板）菌落（血平板）克克雷雷伯伯菌菌属属第17页/共55页1.克雷伯菌属各种的鉴别第18页/共55页沙雷菌属沙雷菌属（普通营养平板）（普通营养平板）第19页/共55页2.沙雷菌属各种的鉴别第20页/共55页分类：现有分类：现有13个种个种2个生物型个生物型u原有原有7个种个种2个生物型个生物型产气肠杆菌产气肠杆菌(E.aerogenes)阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌(E.cloacae)杰高维肠杆菌杰高维肠杆菌坂崎肠杆菌坂崎肠杆菌泰洛肠杆菌泰洛肠杆菌中间肠杆菌
7、中间肠杆菌聚团肠杆菌聚团肠杆菌河生肠杆菌生物群河生肠杆菌生物群1河生肠杆菌生物群河生肠杆菌生物群2u后增加后增加7个菌个菌阿氏肠杆菌阿氏肠杆菌何氏肠杆菌何氏肠杆菌溶解肠杆菌溶解肠杆菌超压肠杆菌超压肠杆菌克沃尼肠杆菌克沃尼肠杆菌考伯肠杆菌考伯肠杆菌帕瑞勒肠杆菌帕瑞勒肠杆菌 肠肠杆杆菌菌属属第21页/共55页3.肠杆菌属各种的鉴别本菌属的细菌生化反应不典型，常用的商品化鉴定系统本菌属的细菌生化反应不典型，常用的商品化鉴定系统很难达到很难达到90以上的鉴定正确率以上的鉴定正确率第22页/共55页4.哈夫尼亚菌属鉴定葡萄糖酸盐 枸橼酸盐 棉子 糖 +第23页/共55页5.葡萄糖酸盐阳性菌属鉴别双岐索引
8、图+-+葡萄糖酸盐+侧金盏花醇赖氨酸鸟氨酸赖氨酸鸟氨酸靛基质枸橼酸盐山梨醇丙二酸盐阴沟肠杆菌产酸克雷伯菌山梨醇肺炎克雷伯菌产气肠杆菌红色沙雷菌多源肠杆菌鼻硬结克雷伯菌臭鼻克雷伯菌哈夫尼亚菌山梨醇格高菲肠杆菌阿拉伯糖贩崎肠杆菌阴沟肠杆菌粘质沙雷菌液化沙雷菌第24页/共55页八八.苯丙氨酸葡萄糖酸盐阴性组的各属鉴苯丙氨酸葡萄糖酸盐阴性组的各属鉴别别第25页/共55页枸枸橼橼酸酸杆杆菌菌属属分分 类类枸橼酸杆菌属（枸橼酸杆菌属（Citrobacter）包括）包括11个种个种弗劳地枸橼酸杆菌弗劳地枸橼酸杆菌(C.freundii)差异枸橼酸杆菌（差异枸橼酸杆菌（C.diversus）库斯枸橼酸杆菌库斯
9、枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌(C.amalonaticus)（C.koseri）布拉吉枸橼酸杆菌布拉吉枸橼酸杆菌 （C.braakii）雷登枸橼酸杆菌雷登枸橼酸杆菌 （C.rodentium）塞拉克枸橼酸杆菌塞拉克枸橼酸杆菌 （C.sedlakii）魏克曼枸橼酸杆菌魏克曼枸橼酸杆菌 （C.werkmanii）扬哥枸橼酸杆菌扬哥枸橼酸杆菌 （C.youngae）吉乐枸橼酸杆菌吉乐枸橼酸杆菌 （C.gillenii）穆利枸橼酸杆菌穆利枸橼酸杆菌 （C.murliniae）法玛丽枸橼酸杆菌法玛丽枸橼酸杆菌 （C.farmeri）第26页/共55页1.枸橼酸杆菌属各种的鉴别注意：
10、很多鉴定系统的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类资料注意：很多鉴定系统的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类资料第27页/共55页2.爱德华菌属各种的鉴别第28页/共55页3.埃希菌属种的鉴别第29页/共55页 致泻性分为5类：肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)肠致病性大肠埃希菌(EPEC)肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)肠出血型大肠埃希菌(EHEC)肠凝聚型大肠埃希菌(EAggEC)埃埃希希菌菌属属临床意义临床意义(Clinical Significance)以肠道外感染多见，主要有泌尿系统感染以肠道外感染多见，主要有泌尿系统感染 中的致病菌株能引起各种类型的腹泻，根据其不中的致病菌株能
11、引起各种类型的腹泻，根据其不同的血清型别、毒力和临床症状同的血清型别、毒力和临床症状第30页/共55页鉴定要点鉴定要点u不活跃大肠埃希菌与志贺菌易混淆，需相互鉴别埃埃希希菌菌属属大肠埃希菌大肠埃希菌 在中国兰平板上为蓝色菌落在中国兰平板上为蓝色菌落大肠埃希菌大肠埃希菌 在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落大肠埃希菌大肠埃希菌 在麦康凯和在麦康凯和SS平板上为红色菌落平板上为红色菌落第31页/共55页培养特征培养特征u兼性厌氧菌兼性厌氧菌u营养要求不高营养要求不高u菌落呈中等大小、无菌落呈中等大小、无色、半透明、光滑色、半透明、光滑u在在SS平板上，因产生平板上，因产生H2S
12、可形成黑色中心可形成黑色中心的菌落的菌落伤寒沙门菌菌落形态（伤寒沙门菌菌落形态（SS平板）平板）四四沙沙门门菌菌属属第32页/共55页u常用血清：O多价血清（含AF群）O、H、Vi抗原因子血清方法：从临床标本中分离到菌株经纯培养后，符合沙门菌属生物学特性，则 采 用 A-F多 价 血 清 初 步 确 定 是 否 为Salmonella 1.如阳性，即用O因子血清分群；再用第一相H因子血清定型，也可用第二相辅助定型 2.如阴性：应考虑是否有Vi抗原?血清学分型血清学分型加加热热或或传传代代去除去除Vi抗原抗原凝集：做凝集：做O多价和单价凝集多价和单价凝集不凝集：可能为不凝集：可能为AF以外以外沙
13、沙门门菌菌属属第33页/共55页第34页/共55页如是双相菌，进一步用复合血清1、2、5检查第2相抗原。第35页/共55页u兼性厌氧菌u营养要求不高u普通平板：中等大小、半透明、光滑u鉴别培养基：乳糖不发酵的菌落培养特性培养特性菌落形态（麦康凯平板）菌落形态（麦康凯平板）志志贺贺菌菌属属第36页/共55页种属鉴定种属鉴定u菌属特征u发酵葡萄糖产酸不产气u赖氨酸（）uH2S（）u尿素（）u动力（）志志贺贺菌菌属属第37页/共55页5.志贺菌属的鉴定先用志贺多价血清与菌种凝集，如多价血清凝集为志贺菌，多价里不包含鲍氏C16-20再进一步用因子血清凝集而定群。第38页/共55页6、苯丙氨酸、葡萄糖酸
14、盐阴性组菌属鉴别、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐阴性组菌属鉴别双歧索引图双歧索引图+苯 丙 氨 酸、葡 萄 糖 酸 盐 -甘露醇ONPG枸橼酸盐动 力H2S侧金盏花醇赖氨酸沙门菌属志贺菌属迟缓爱德华菌甲基红异型枸橼酸杆菌鸟氨酸葡萄糖产气耶尔森菌属丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌费劳地枸橼酸杆菌大肠埃希菌大肠埃希菌（不活泼株）保科爱德华菌鲶鱼爱德华菌第39页/共55页肠杆菌鉴定选用多少生化反应管为好苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、赖氨酸、鸟苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、赖氨酸、鸟氨酸、氨基酸对照、枸橼酸盐、硝酸氨酸、氨基酸对照、枸橼酸盐、硝酸盐、侧金盏花醇、山梨醇、甘露醇、盐、侧金盏花醇、山梨醇、甘露醇、ONPGONPG、靛基质、双
15、糖（、靛基质、双糖（H H2 2S S）第40页/共55页九.API鉴定系统(20E)菌液制成麦氏浊度,加入20E板条,第41页/共55页1.变形杆菌菌落呈迁延性生长十、肠杆菌科某些菌株的特殊性质第42页/共55页2.克雷伯菌自身菌落可拉出丝来第43页/共55页3.多源聚团菌在M-H平板上产生黄色第44页/共55页4.沙雷菌M-H 平板上产生铁锈红色第45页/共55页第46页/共55页6.能产生H2S的菌株变形杆菌 爱德华菌 伤寒沙门菌 费劳地枸橼酸杆菌大肠杆菌第47页/共55页大肠杆菌的特点对多种糖对多种糖产酸产气产酸产气,吲哚吲哚、甲基红、甲基红、VP VP、枸橼酸盐、枸橼酸盐(IMVC)
16、+-(IMVC)+-五种致病性大肠杆菌要用特异性五种致病性大肠杆菌要用特异性血清凝集加以鉴别血清凝集加以鉴别第48页/共55页十一.沙门菌属的特点所有动物可分离到沙门菌,有2000多血清可引起人类胃肠炎、败血症、伤寒第49页/共55页沙门菌属的特点肥达反应第50页/共55页十二.志贺菌属的特点急性菌痢-发烧,腹痛,脓血便,痢疾志贺菌引起的菌痢死亡率高达20%慢性菌痢-反复发作二个月第51页/共55页志贺菌属与大肠埃希菌区别:动力阴性,赖氨酸阴性,分解葡萄糖不分解乳糖志贺菌属与伤寒沙门菌区别:动力阴性H2S阴性,能于志贺菌因子血清凝集志贺菌属的特点第52页/共55页u常用血清：O多价血清（含AF群）O、H、Vi抗原因子血清方法：从临床标本中分离到菌株经纯培养后，符合沙门菌属生物学特性，则 采 用 A-F多 价 血 清 初 步 确 定 是 否 为Salmonella 1.如阳性，即用O因子血清分群；再用第一相H因子血清定型，也可用第二相辅助定型 2.如阴性：应考虑是否有Vi抗原?血清学分型血清学分型加加热热或或传传代代去除去除Vi抗原抗原凝集：做凝集：做O多价和单价凝集多价和单价凝集不凝集：可能为不凝集：可能为AF以外以外沙沙门门菌菌属属第53页/共55页第54页/共55页感谢您的观看！第55页/共55页