食品中农残检测.pptx

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1、食品中有害物食品中有害物质的的测定定第1页/共39页主要内容主要内容农农 药药1兽兽 药药2毒毒 素素3第2页/共39页第一节食品中农药残留及其检测农药是农业生产中使用的各种药剂统称,种类很多。我国农药生产现状及发展趋势:目前全世界实际生产和使用的农药的品种为500多种,其中大量使用的有100种,主要是化学合成生产的。第3页/共39页农药包括:杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植物生长调节剂。我国已由农药进口国变成农药出口国。我国现有主要农药合成企业近400家,已建成700千吨以上原药生产装置,可常年生产250多种原药、农药中产量居世界第二位(美国第一),农药产量呈逐年增长的趋势。第4页/共39页 新品

2、种与新工艺不断出现。常用的有:有机氯农药和有机磷农药两类。杀虫剂有胺丙畏、苯胺硫磷等。杀菌剂有腐霉利、乙霉威等。除草剂有丙草胺、麦草畏等。生长调节剂有烯效唑、多效唑、油菜素内酯等。生物农药发展迅速。第5页/共39页1、产品结构不合理,个别品种老化 杀虫剂 杀菌剂 除草剂我国 68.5%10.4%18.3%发达国 40%20%40%农药加工剂型增多,主要有乳油、粉剂、粉粒剂、悬浮剂、水剂、片剂、烟剂等。原料及中间体已经满足国内需求。存在问题:第6页/共39页2、农药加工落后,助剂研究滞后 我国原药与制剂比例较低,目前为1:9但发达国家为1:10-30。3、生产规模小,工艺技术落后,产品质量差 我

3、国农药产量约占全球的25%但销售额不足8%4、生物农药还应大力发展。第7页/共39页 农药在防治农作物病虫害、控制人类传染病、提高农畜产品的产量和质量以及确保人体健康等方面,都起着重要的作用。但是,大量广泛用农药也会造成对食物的污染。农药残留是指农药施用后,残存在生物体、农副产品和环境中的微量农药原体、有毒代谢产物、降解物和杂质的总称。残留的数量叫残留量。第8页/共39页农药进入人体的方式土壤、水土壤、水、空气、空气家禽、畜植物、饲料植物、饲料水生动、植物水生动、植物肉、蛋、乳肉、蛋、乳人人第9页/共39页食品中普遍存在农药残留,残留量随食品种类及农药的种类不同而有很大差异,由于农药的毒性都很

4、大,有的还可在人体内蓄积,对人体造成危害。食品中残留农药过高会导致癌症和帕金森症。1994 年,我国农药中毒人数已超过10万人,大部分是由于农药残留而引起。第10页/共39页容易吸收农药的蔬菜番茄、茄子、圆辣椒、卷心菜、白菜及大多数根菜类、薯类。对农药吸收率较低的叶菜类、果类等。第11页/共39页为提高食品的卫生质量,保证食品的安全性,保障消费者身体健康,许多国家都对食品中农药允许残留量作了规定。我国和WHO制订了有机氯农药六六六、滴滴涕在食品中的允许残留量标准;有机磷农药在食品中允许残留量标准;第12页/共39页小资料:我国将全面禁用5种高毒农药包括:甲胺磷、久效磷、甲基对硫磷、对硫磷、磷胺

5、。这5种农药目前年总产量达10万吨;占我国农药生产总量的2025%。禁用方案分3阶段:第一阶段第一阶段(2004年年1月月1日日12月月31日日):撤消撤消5种高毒农药产品生产、销售、使用的有种高毒农药产品生产、销售、使用的有关证书,开始部分禁用,使用比例下降关证书,开始部分禁用,使用比例下降15。第13页/共39页第二阶段第二阶段(2005年年1月月1日日2006年年12月月31日日):禁止禁止5种高毒农药原药生产企业外的其他企业种高毒农药原药生产企业外的其他企业生产或加工此类产品,并将其使用范围局限于棉生产或加工此类产品,并将其使用范围局限于棉花、小麦、玉米、水稻花、小麦、玉米、水稻4种作

6、物。种作物。第三阶段第三阶段(2007年年1月月1日日):中国全面禁止中国全面禁止5种高毒农药的使用。种高毒农药的使用。第14页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法实际上,最容易引起农药食物中毒的当属有机磷类杀虫剂。我国专家江希流曾对为数众多的农药品种进行过分级排队,从中筛选出了十种强污染的农药,其中有七种为有机磷类,即敌百虫、敌敌畏、乐果、氧化乐果、对硫磷、甲基对硫磷、甲胺磷,其他三种为杀虫双、杀虫眯和除草醚。氨基甲酸酯类农药毒作用机理与有机磷农药相似,主要是抑制胆碱酯酶活性.二、有机磷农药残留的测定第15页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法二、检测原理利用有机磷和氨基甲酸酯类农药对动物体内乙

7、酰胆碱酯酶(AChE)具有抑制作用的原理,在乙酰胆碱酯酶及其底物(乙酰胆碱)的共存体系中加入农产品样品提取液(样品中含有水),如果样品中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药,酶的活性就不被抑制,乙酰胆碱就会被酶水解,水解产物与加入的显色剂反应就会产生颜色;反之,如果试样提取液中含有一定量的有机磷或氨基甲酸酯类农药,酶的活性就被抑制,试样中加入的底物就不能被酶水解,从而不显色。第16页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法水解水解加酶加酶显色剂显色剂未水解未水解显色剂显色剂不显色不显色显色显色无农药无农药有农药有农药第17页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法三、酶的基质和显色反应类型1.酶的基质酶抑制剂显色

8、反应可使用的基质(底物)和显色剂很多。各种乙酰胆碱(ACh)、乙酰萘酯以及其他羧酸酯、乙酸羟基吲哚及其衍生物 考虑:灵敏度,适用性,酶源、基质、显色剂获得难易第18页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法 1.肉眼观察法酶片法、试纸法、速测卡法基于反应体系反应前后明显的颜色变化来观察、判断农药毒性高低的一种定性测量方法。一般选用靛酚乙酸酯(红色)为底物。美国于1985年曾报道了一种称为农药检测器的酶片,可在田间快速检测有机磷和氨基甲酸酯类农药,其灵敏度在0.110mg/kg范围。四、检测方法第19页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法速测卡法华南农大植保系和深圳天福贸易有限公司推出的“农药速测卡”广

9、州进出口食品检验研究中心与广州天河绿洲生物化学研究中心联合研制生产的“农药检测卡”第20页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法速测卡以滤纸作载体,白纸片上载有乙酰胆碱酯酶和基质,红纸片载有显色剂。当空白样品加于白纸片上,在酶作用下,乙酰胆碱与水发生水解,水解产物与显色剂反应产生颜色。当含有有机磷和氨基甲酸醋类农药的样品加于白纸片上时,抑制了乙酰胆碱酯酶的活性,使这种酶不能被水解,从而无显色反应。第21页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法白色药片变成蓝色,说明农药残留无或在检出限下;白色药片不变蓝,说明含有超出检出限的农药。第22页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法第23页/共39页农兽药残留检测

10、-酶抑制法农药速测卡对几种常用农药的最低检测限(单位mg/kg)如下:甲胺磷1.7马拉硫磷2.0水胺硫磷3.1对硫磷1.7久效磷2.5乙酰甲胺磷3.5敌敌畏0.3乐果1.3敌百虫0.3呋喃丹0.5西维因2.5好年冬1.0第24页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法(1)整体测定法选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1平方厘米左右见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入10ml纯净水或0.1mol/LpH7.5的磷酸缓冲液水与菜叶的比例以(1:l)(l:2)为宜,震摇50次,静置2min以上。取一片速测卡,用白色药片蘸取提取液,放置10min以上进行预反应,有条件时在37恒温装置中放置10min。

11、预反应后的药片表面必须保持湿润。将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。每批测定应设一个纯净水或缓冲液的空白对照卡。第25页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法(2)表面测定法擦去蔬菜表面泥土,滴23滴缓冲溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。取一片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上放置10min以上进行预反应,有条件时在37恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。每批测定应设一个洗脱液的空白对照卡。第26页/共39页农兽药残留检测-

12、酶抑制法速测卡使用经验:由于菜叶含有大量的叶绿素,若菜叶剪得太碎,叶绿素颜色会对阴性反应的蓝色观察有影响,对农药速测卡的初次使用者易产生错误的判断。可疑阳性试样是根据显色反应的蓝色比空白浅,比阳性深而判定的。蓝色变浅程度存在差异,且有部分叶绿素的影响。第27页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法农药速测卡使用的最佳pH值是7.5,若样液的pH值偏离太大,会产生错误的结果。应用农药速测卡时,反应的温度和时间对显色有影响,必须同时进行空白对照。第28页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法试纸法(速测卡法)操作简单、成本低,但对于深颜色样品的检测,实验误差较大,而植物酶片用于植物样品检测时也存在基体干扰

13、问题,操作者人为因素较大,灵敏度较低,只能勉强算是一种定性方法。第29页/共39页2.定量测定(1)原理样品中有机磷类农药经乙腈提取,提取溶液经净化、浓缩后,用双塔自动进样器同时注入气相色谱的两个进样口,样品中组分经不同极性的两根毛细管柱分离,火焰光度检测器(FPD)检测。当含有机磷样品于检测器中的富氢火焰上燃烧时,以HPO碎片的形式,放射出波长为526mn的特征光,这种光通过滤片选择后,由光电倍增管接收,转换成电信号,经微电流放大器放大后,由记录仪记录下色谱峰。通过比较样品的峰高和标准品的峰高,计算出样品中有机磷农药的残留量农兽药残留检测-酶抑制法第30页/共39页(2)仪器和试剂仪器。旋涡

14、混合器、匀浆机、氮吹仪、气相色谱仪试剂。方法所用试剂,凡未指明规格者,均为分析纯;水为蒸馏水。乙腈。丙酮,重蒸。氯化钠,140烘烤4h。滤膜,0.2m。铝箔。农药标准品。农兽药残留检测-酶抑制法第31页/共39页(3)操作步骤1.农药标准溶液配制单一农药标准溶液:准确称取一定量某农药标准品,用丙酮稀释,逐一配制成26种农药1000mg/L的单一农药标准储备液,贮存在18以下冰箱中。使用时根据各农药在对应检测器上的响应值,吸取适量的标准储备液,用丙酮稀释配制成所需的标准工作液。农兽药残留检测-酶抑制法第32页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法2.试样试样制备制备3.提取提取4.净化净化第33页/共39页(4)测定 色谱条件(5)计算农兽药残留检测-酶抑制法第34页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法第35页/共39页提取称取20.00g经粉碎过20目筛的粮食试样于250mL具塞锥形瓶中,准确加入50mL苯,浸泡过夜,次日振荡提取1h,提取液过滤。农兽药残留检测-酶抑制法第36页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法第37页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法第38页/共39页农兽药残留检测-酶抑制法感谢您的观看!第39页/共39页

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