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1、发热伴血小板减少综合征患者的流行病学调查研究,传染病学论文发热伴血小板减少综合征 Severe fever withthrombocytopenia syndrome,SFTS 是一种新出现的出血热，其首个病例出如今中国河南省农村地区。 SFTS 是由发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒 SFTSV 感染所致，该病毒是一种新型的布尼亚病毒科白蛉病毒属病毒。自 2018 年初次报道以来，中国已有 11 个省份发现大约 2500 例病例，平均病死率为 7. 3%.SFTS 主要以发热和呼吸道或消化道异常感觉和状态急性起病，随后出现血小板和白细胞数进行性下降1.2020 年 10 月，湖南省疾病预防控制
2、中心 CDC 从省人民医院送检的一份发热伴出血症候群病例的血清标本中检出 SFTSV 核酸阳性，综合病例临床表现和实验室检查结果，该病例确诊为SFTS 病例，为湖南省首例病例。为了解该例病例发病经过和感染来源及其生活寓居地人和动物的SFTSV 感染状况，对病例和其生活、生产活动的环境开展了具体的流行病学调查，现将调查结果分析报告如下。 1 材料与方式方法 1. 1 诊断标准 根据卫生部制定的(发热伴血小板减少综合征防治指南 2018 版 (指南 中 发热伴血小板减少综合征诊疗方案 的标准。 1. 2 流行病学个案调查 根据(指南中 发热伴血小板减少综合征流行病学调查方案 要求，采用方案中的流行
3、病学个案表开展调查，通过反复访谈病例家属、邻居、诊治医生等相关知情人员、查阅病历资料等方式具体了解病例发病前活动情况、发病经过及临床特征。 1. 3 病例搜索 访谈病例寓居的月星村 3、4 组及病例摘板栗地所在的道塘村村民近 1 年来有无发热伴出血异常感觉和状态； 同时到病例所在地镇卫生院通过查阅近 1 年门诊日志、住院病例、血常规检查结果、访谈医生等方式查找能否有发热伴血小板减少病例。 1. 4 血清流行病学调查 根据知情同意原则，采取方便抽样方式方法对月星村 3、4 组及病例摘板栗地所在的道塘村村民、和村民饲养的牛羊采集血清标本，开展抗 SFTSV IgM、IgG 检测，共计采集人血清 7
4、7份，羊血清 21 份，牛血清 3 份。 1. 5 媒介生物调查 现场查看病例寓居、活动环境状况，通过 布旗法 捕捉游离蜱，用镊子直接夹取牛羊身上的寄生蜱，将蜱放置在试管中，送实验室开展 SFTSV 核酸检测。 1. 6 实验室检测方式方法 1. 6. 1 血清 IgM、IgG 检测 采用酶联免疫吸附实验 ELISA 方式方法，检测试剂为无锡鑫连鑫生物医药科技有限公司生产的 SFTSV 抗体检测试剂盒 IgM 抗体检测试剂盒生产批号：20201015,有效期：2021 年4 月14日； IgG 抗体检测试剂盒生产批号：20201014,有效期：2021 年 4 月 14 日 .所有人、动物血清
5、使用一样的试剂盒进行 IgG、IgM 检测。详细操作步骤为： 对应 96孔板分别参加阴、阳性对照和待检样品，100 l/孔，37 孵育 30 min,洗板 4 次，参加 HRP 标记重组布尼亚病毒蛋白工作液100 l/孔，37 孵育30 min,洗板4 次，参加显色液，37 避光孵育 10 min,参加终止液50 l / 孔，450 nm 波长下测量各孔 A 值。结果判定标准： 以阴性对照平均 A 值 2. 1 为 cutoff 值，待检样品A 值 cutoff 为阳性。 1. 6. 2 核酸检测方式方法 采用反转录 - 聚合酶链反响 RT-PCR 方式方法，检测试剂为中山大学达安基因股份有限
6、公司生产的 SFTSV 核酸检测试剂盒 生产批号：2020004,有效期：2021 年6 月3 日 .详细操作步骤为： 蜱虫标本冰上碾磨后，12 000 离心10 min,取上清 140 l 应 用 QIAamp viral RNA Mini kit QIAGENE,Germany 进行核酸提取。核酸扩增应用SFTSV 核酸检测试剂盒进行实时荧光定量反转录 -聚合酶链反响 Real Time Fluorescent QuantitativeReverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,rRT-PCR 扩增。 详细体系配制与反响参数设置参照试剂盒
7、讲明书进行。结果判定： 在阴性、阳性及内部质控成立的条件下，样品扩增曲线在 FAM、VIC 检测通道均呈对数增长，且 Ct 值 35 判定为阳性。 2 结果 2. 1 病例基本情况 罗 ,女，59 岁，农民，户籍新化县 YJ 镇月星村，现住新化县 SS 乡乡旁。该病例常年在家务农，家中未养牛、羊，仅养几只鸡。患者在家与老伴、11 岁的孙子一起生活。 2. 2 发病及就诊情况 病例在 10 月 1 日前一直在家务农。10 月 1-5 日至贵州省松桃县女儿家游览玩耍。期间，4 日去凤凰旅游时自感全身乏力、酸痛，自服安乃近未见好转； 5 日疼痛加重，家属陪同其前往松桃县人民医院诊治，医生予患者抗感冒
8、退热治疗，详细药物不详，仍未见好转； 6 日开场出现发热 38 ,遂在自驾车返回湖南途中入怀化市第二人民医院住院诊治，入院完善相关检查，考虑为 上呼吸道感染？ 肺炎？ ,予以退热、补液等对症治疗，患者疼痛有所缓解，但仍有发热，后回新化； 10日下午 6 时病例发热加重，体温 39 ，最高时到达40 ,送入新化县人民医院治疗，相关检查示： 白细胞 2. 5 109/ L,血小板 24 109/ L,经医院抗感染等对症处理后无好转； 11 日转入省人民医院急诊科并收治入院，体温 39. 5，白细胞 3. 56 109/ L,血小板 34 109/ L,诊断为： 严重脓毒症、重症中毒性心肌炎、中毒性
9、肝炎、凝血功能障碍、消化道出血，给予抗感染、抗病毒等治疗，病情无明显改善。湖南省人民医院为国家十二五 艾滋病与病毒性肝炎等重大传染病防治 科技重大专项 传染病监测技术平台 项目 五大症候群 监测哨点医院，病例异常感觉和状态符合 发热伴出血症候群 ,遂于 10 月 14 日采集病例血清送湖南省 CDC 检测，15 日省 CDC 实验室检测结果显示肾综合征出血热 IgM、IgG 抗体阴性，16日检测结果显示 SFTSV 新型布尼亚病毒 核酸阳性，IgM 抗体阳性，IgG 抗体未检测，根据(指南确诊为 SFTS.16 日晚患者意识模糊，病情危重，转入ICU 隔离治疗。经湖南省人民医院积极救治，患者病情逐步好转，于 12 月中旬痊愈出院。病例病程经过见图 1.