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1、妇科腹腔镜手术患者采用七氟烷麻醉的疗效分析,麻醉学论文七氟醚于1968年由Regan合成,1986年完成3期临床试验,1990年首先由日本的药监部门批准临床使用。近年来,被很多著名麻醉学专家誉为吸入麻醉的里程碑式药物。研究表示清楚,七氟醚可抑制结肠癌细胞和喉癌细胞的生长,以及肺癌细胞的黏附。但七氟醚对人乳腺癌细胞株黏附能力的影响尚未见报道。 CD44是一种细胞外表跨膜糖蛋白,属于黏附分子,其分布特别广泛,功能主要介入细胞间及细胞与基质间的特异性粘连经过,且在恶性肿瘤的发生、发展中起着特别重要的作用。当前,CD44作为多种已经知道肿瘤干细胞的标记物,包括乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌、结直肠癌、肝细胞
2、癌。 CD44介入了这些肿瘤的发生、发展、复发和转移的经过。本研究拟评价七氟醚对人乳腺癌细胞株MCF-7黏附能力、CD44表示出的影响。 1、材料与方式方法 1.1主要试剂与仪器 人乳腺癌细胞株MCF-7(南华大学研究所),1640培养基、10%胎牛血清(Hyclone公司,美国),麻醉气体监测仪(DatexAS/3公司,芬兰),AestivaR/5型麻醉机(DatexOhmeda公司,芬兰)。 1.2方式方法 1.2.1细胞培养。MCF-7细胞用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基于37、5%CO2、饱和湿度培养箱中培养。 1.2.2实验分组与处理。取对数生长期的人乳腺癌MCF-7细胞,
3、采用随机数字表法,将其随机分为4组:不经任何处理的Control组、1.7%七氟醚作用的Treat1组、3.4%七氟醚作用的Treat2组和5.1%七氟醚作用的Treat3组。 1.2.3细胞黏附实验。分别处理好细胞将100 L细胞悬液参加96孔板中,继续培养1h。每孔参加200 L磷酸盐缓冲液(PBS)振摇5min,洗2遍。弃PBS后参加噻唑蓝(MTT),用酶标仪于波长490nm测定吸光度值,并计算黏附率=(各实验孔黏附细胞吸光度值/对照孔黏附细胞吸光度值-1) 100%。 1.2.4CD44mRNA表示出的测定。采用qRT-PCR法测定CD44mRNA的表示出qRT-PCR反响:反响体系为
4、20 L,包括稀释后的RT产物2 L、2 qRT-PCR缓冲液10 L、5 mol/LmiR-155特异性PCR引物0.4 L、5U/ L耐热DNA聚合酶0.2 L、灭菌双蒸水7.4 L。反响条件:先953min活化Tag酶;然后9512s、6235s共40个循环。 1.3统计学处理 采用SPSS16.0软件进行分析,组内比拟采用重复测量设计的方差分析,组间比拟采用单因素方差分析,以P 0.05为差异有统计学意义。 2、结果 2.1 4组人乳腺癌细胞株MCF-7细胞黏附能力的比拟与处理前比拟,Treat1组、Treat2组和Treat3组处理2、4和6h细胞黏附率降低(P 0.05);与处理2
5、h比拟,Treat2组和Treat3组处理4和6h细胞黏附能力降低(P 0.05);与处理4h比拟,Treat2组和Treat3组处理6h细胞黏附能力降低(P 0.05);与Control组比拟,Treat1组、Treat2组和Treat3组处理2、4和6h细胞黏附能力降低(P 0.05);与Treat1组比,Treat2组和Treat3组处理2、4和6h细胞黏附能力降低(P 0.05);与Treat2组比,Treat3组处理2、4和6h细胞黏附能力降低(P 0.05),见表1。 2.2 4组人乳腺癌细胞株MCF-7细胞CD44mRNA表示出改变与处理前比拟,Treat1组、Treat2组和T
6、reat3组处理2、4和6h细胞CD44的mRNA表示出下调(P 0.05);与处理2h比拟,Treat2组和Treat3组处理4和6h细胞CD44的mR-NA表示出下调(P 0.05);与处理4h比拟,Treat2组和Treat3组处理6h细胞CD44的mRNA表示出下调(P 0.05);与Control组比拟,Treat1组、Treat2组和Treat3组处理2、4和6h细胞CD44的mRNA表示出下调(P 0.05);与Treat1组比,Treat2组和Treat3组处理2、4和6h细胞CD44的mR-NA表示出下调(P 0.05);与Treat2组比,Treat3组处理2、4和6h细胞
7、CD44的mRNA表示出下调(P 0.05),见表2。 3、讨论 乳腺癌是女性第一大恶性肿瘤,据美国癌症协会(ACS)2018年数据统计,2008年世界女性乳腺癌新发病例1383500例,占女性全部恶性肿瘤的23%,死亡458400例,华而不实,大约一半的乳腺癌新发病例和60%的死亡例数发生在发展中国家。在中国,乳腺癌的发病高峰年龄则出如今4550岁,这意味着在中国,乳腺癌已经严重危害了广大处于事业和家庭巅峰时期的女性的生命和生活,成为威胁女性健康的 首要杀手 。其对人类健康的严重危害已引起了世界卫生组织和医疗界人士的高度重视。 越来越多的研究者从癌细胞中挑选出表示出一个或多个外表蛋白标记物(
8、CD44、CD24和ALDH1)的细胞,这些外表标志有CD44+/CD24-/Low/ALDH1+的细胞亚群仅占癌细胞总数的0.2%0.8%,其致瘤能力较其他的癌细胞强100倍,100个这类细胞即可在小鼠乳腺中构成与人类乳腺癌一样的肿瘤并具有干细胞特性,因而,具有这类特异性标记的细胞被以为是肿瘤干细胞,即肿瘤 种子 。这些肿瘤干细胞与肿瘤的发生、发展、复发转移、放化疗抵抗等密切相关。本研究七氟醚浓度为临床常用浓度,七氟醚能够安全而有效地用于成人,儿童和老年人的诱导。其诱导迅速快,不良反响少,心血管稳定性好。与氟烷相比,七氟醚吸入诱导的心血管不良反响少;与异丙酚等静脉麻醉药相比,诱导时间,心血管
9、稳定性和不良反响类似,能够作为临床用药的另一选择。除此之外,七氟醚吸入诱导还能够用于困难插管患者的麻醉处理和对没有建立静脉通道的患者。本研究结果表示清楚,与处理前比拟,处理2、4和6h时,不同浓度七氟醚组细胞黏附率依次降低;与对照组比拟,经1.7%、3.4%和5.1%的七氟醚处理后细胞黏附率依次降低,提示七氟醚可降低人乳腺癌细胞株MCF-7的黏附能力,且呈浓度和时间依靠性。本研究结果表示清楚,与处理前比拟,处理2、4和6h时,不同浓度七氟醚组CD44表示出依次下调;与对照组比拟,经1.7%、3.4%和5.1%的七氟醚处理后CD44表示出依次下调。细胞黏附分子CD44是一种跨膜糖蛋白,其存在一个高度保守的氨基酸末端,与透明质酸结合构造区域之间具有氨基酸序列的高度同源性,CD44具有广泛的组织分布,但当前的研究表示清楚CD44异常表示出与肿瘤的黏附及转移相关,CD44表示出越高,肿瘤细胞的黏附能力越强。因而,该研究提示七氟醚降低人乳腺癌细胞株MCF-7的黏附能力可能与其抑制CD44的表示出有关。 综上所述,七氟醚可降低人乳腺癌MCF-7的黏附能力,且呈浓度和时间依靠性,其机制可能与下调CD44的表示出有关。