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1、P PB BS S 缓缓冲冲液液配配制制文件排版存档编号：UYTR-OUPT28-KBNTL98-UYNN208P PB BS S缓缓冲冲液液配配制制磷酸盐缓冲液（磷酸盐缓冲液（PBSPBS）配制方法）配制方法称取 8g NaCl、KCl、Na2HPO4 和 KH2PO4,溶于 800ml 蒸馏水中，用 HCl 调节溶液的 pH 值至，最后加蒸馏水定容至 1L 即可。在 15lbf/in2(1034105Pa)高压下蒸气灭菌（至少 20 分钟），保存存于室温或 4冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非 Na 离子或 K 离子的浓度，Na 离子和 K 离子只
2、是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入 100 u/ml 青霉素和链霉素之后再调 PH、定容、灭菌消毒。NaCl；KCl；Na2HPO4；KH2PO4；加蒸馏水 至 1000ml，调节 pH 到（用 Na2HPO4 或 KH2PO4 调节）。用于免疫反应时可加入%叠氮钠（100ml PBS）;当试剂中含有辣根过氧化物酶时，严禁使用叠氮钠，可改用%柳硫汞。PBS 缓冲液配方PH H2O 1000 1000 1000 1000 NaClNa2HPO4NaH2PO4根据经验来看，新鲜配置的 PBS 搅匀后其 PH 值约在之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数
3、发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH 值会明显改变（我亲自测过偏酸）。所以做实验的同学可要注意了，PH 值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的 PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。PBS 缓冲液称取 NaCl 8g，KCl，Na2HPO4?12H2O,KH2PO4，溶于 900ml 双蒸水中，用盐酸调pH 值至，加水定容至 1L，常温保存备用。PBST 缓冲液取 300l Tween-20 加入 PBS 100ml 中，混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀
4、释，那么，在刚配好浓缩液时，PH 在左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法。十倍稀释以后，PH 自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次的 PBS 配方详细1.NaCl 137mmol/L，KCl L，Na2HPO4 L，KH2PO4 L2.向烧杯中加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将 pH 值调节至，然后加入去离子水将溶液定容至 1 L。4.高温高压灭菌后，室温保存。注意：上述 PBS Buffer 中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充 1 mM CaCl2 和mM MgCl2。L PBS(磷酸缓冲液 Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：甲液：L Na2HPO4 溶液：称取磷酸氢二钠,加蒸 馏水至 1000ml;乙液：L KH2P04 溶液:称取磷酸二氢钾,加蒸馏水至 1000m1。将甲乙液分装在棕色瓶内，于 4冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需 pH 的缓冲液,见下表:pH甲液 ml乙液 mI你要配制 pH=的 PBS，可用甲、乙液各 50ml 混合即可。