洛克氏液琼脂培养基的制作培养阿米巴原虫.docx

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1、洛克氏液琼脂培养基的制作(培养阿米巴原虫):1 .固体部分 牛肝浸育3.5 g,蛋白陈5.5 g,琼脂粉15 g,洛克氏液1000ml。2 .洛克氏液成分 氯化钠8g,氯化钾0.2 g,氯化钙0.2 g,氯化镁0.01g,磷酸氢二钠2 g ,磷酸二氢钾0.3 g ,蒸储水1000mlo3 .操作方法:接种前在每培养管内加入洛克氏液34ml,灭活小牛血清0.5ml,消毒米粉 少许,青链霉素各3()005000单位,最后加入虫种12滴即可。4 .所需物品及具体配制步骤1)准备蒸播水30005000ml; 2000ml和1000ml三角烧瓶各1个;2)取蒸馀水2000 ml,将1500 ml放入20

2、00 ml的三角烧瓶内,加入氯化钠16g、氯化钾 0.4g、磷酸氢二钠4g、磷酸二氢钾0.6g;将另500 ml蒸谭水分装在已备的2个250 ml的三 角烧瓶内;3)取称量瓶2个,1个放入氯化镁0.02g,另一个放入氯化镁0.4g:再取2个500 ml的 盐水瓶,2个或3个100 ml的三角烧瓶,待消毒。4)将以上物品放入高压消毒炉内,经15磅,20分钟高压灭菌后,取出待所有液体冷却 后,分别将称量瓶中的氯化镁和氯化钙溶解在以上2个250 ml的三角烧瓶内,先将溶解的 氯化镁溶液加入盛有1500ml水的三角烧瓶内,然后再将溶解的氯化钙溶液缓慢加入其中, 即配制成2000ml经过消毒灭菌的洛克氏液。5)配制固体部分取洛克氏液1000ml,加入牛肝浸膏3.5g,蛋白陈5.5g,琼脂粉15g (或琼脂18g),经 沸水浴使其完全溶化,趁热分装在己备的试管内,每管45 mL将分装好的试管经高压灭菌(15磅20分钟),取出后趁热放木条上制成斜面,冷却后 放入冰箱内储存备用。5.注意事项1)剩余的洛克氏液与培养基管放置在4冰箱保存;2)切记加氯化钙时,必须缓慢加入或滴入,最好在25以卜操作。

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