1株多重耐药的金黄色葡萄球菌的分离与鉴定.pdf

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1、爪余务禽禹呔S20年第3期-6-捅要:2009年4月*广东省一养殖场的肉塢发生一起病例,枯床症状表现为a珥,胸肢部、翅内側等处芻毛妩落,皮肤紫红色或破潰,皮下浸涧出血。通过临床症扶、痛违变化观察和实&室殄*fTM诊为金黄色葡萄珠菌感染。叶该分离葡株做药敏试验T发現其对药姓强动物试猃表明+该分ft箱对雊鸡具有高度致病性。关键词:鸡全黄色葡35球菌病砷药技葡萄球菌病是由金黄色葡萄球菌或其他葡萄球菌引起的多种畜禽共患的一种急性败101性传染病.一般认为金黄色葡萄球南是主要的致病荫。鸡金黄色葡萄球菌病是一种多发、易发的禽病.尤其现在的禽类养殖多采用集约化方式,接触、摩擦、蹬睬及消毐不彻底都易引发_%金

2、黄色葡萄球苗引起的严重感染的发病率在全球范围内迅速增加,由于该菌对抗菌约物的交叉耐药十分严重,绐临床治疔造成了极大的困难.应受到广泛的关注2(X芊4月.广东省某鸡场发生一起以胸腹郎、翅内侧等处羽毛脱落.皮肤呈紫红色、破It为主要临床特证的疾病.病鸡枏神沉郁,食欲滅退灰白色或黄绿色水样7痢。该养户一批鸡苗于日龄开始I出现零阜死亡,之后死亡率高达9%。采集病鸡肝脏及心血病料.经细菌分离鉴|定,确诊为金黄色葡萄球茵感染=该病发病急t潜伏期短,】-3大即发病死亡对t该荫株做了20种药物的药敏试验.发现K耐药性很强。1材 料 与 方 法SL-1病琛变化及病料采集发病鸡剖检吋见皮下充血,胸故部有散在出血斑

3、;脾、肝脏肿大.有灰教色坏死辻;心包发黄,内有混浊的渗出液:大肠后段发炎,肠腔内充满深红色血块。无曲挽作采毋病鸡肝脏及心血病料。:L2主要试剂1.2,1培养基及生化试剂:籽通营养琼脂培养基、绵羊血和=铕铁琼脂培养基.imm,乳糖i盂芽街、蔗糖和甘錤醉细菌生化微话鉴定管,均为杭州天和微生物试剂有限公司产品。J1.2.2药敏纸片:林可霉家、氣苺索、利福乎、强力筲索t舒苜深、头孢噻肟、头I孢他定、万(V蚕素、头孢拉定.卡那霉累】米卡里1英西林1阿奇霉素、贫T西林、g恩诺沙M、新琯素、m哌酸、S方新诺明1环丙沙M和甲氧苄胺嘧啶,均为杭州天和微尘钧试剂有限公P-产品&三1,3实验动物10U龄健谢维鸡由广

4、东贫农业科学院缶牧研究所提供。.4细賭分离培养取病料X閑操作划线接种于抒通琼脂平板.M温箱37T培 养 镜 检:纯 化G划线接种千鲜血琼脂平板h,37T培养24h+规察结果。L5细 閑 形 态 观 察无菡拽作挑取单菌落进行涂片,革兰氏染色镜检。1.6生化试验将细菌分离物纯化后增阐培养,进行生化特性试验.生化项R及试验方法按文献叫I药 敏 试 验坩纸片琼脂扩散法,将细菌涂布到符通琼脂板,将贴药敏片的平板置37T:温箱中培养Sh,取川观察结果,_歌抑菌圈直椏D抗菡药物药敏试验采用改良的K-B法,参考上海医学化验所介绍方法1 . 8动 物 实 验定注,为共同苐一作者。ingfes2湖南农业大学动物科

5、学技术学院长沙4103河南省内黄县畜牧局河南安阳45630H李薛怡1费小雅111晓莉4方热军M李芳张逮民4郭莉莉d陈济ST徐成刚(1华南农#太学铒医学院广州5522瓜食J&食戒呔fl2011年第3期7-取10U龄健康鸡10只,分别给5只鸡腋下注病死鸡胸部皮肤及表层肌肉漬烂,有干酷样黄色港射临床分离株24h肉扬培养物0_2mU其余5只右出物。剖检B了见脾、肝班胂大,有灰黄色坏死灶;心翅皮下注射a2mL灭菌肉汤作为对照。采取膈离饲肌有出血点,心包发黄.有混浊的渗出液。死雏病料养,并观察结果T发病或死亡者再作病原菌分离。2结果2A细谢分离培#无歯操作接种病料于符通琼脂培养基和血平板上,37乞培养24

6、h。在苷通培养基上可见灰白色有的破溃,皮下沒润出血。从病鸡病料中分离到1株形、湿润1表而隆起、边缘整齐、直径12mm的不细菌,根据培养特性观察、染色镜检和生化试验结透明光滑_落,随培养时问的延长,逐渐变成金黄果可将该菌株判定为金黄色葡萄球菌对该菌做了色。在鲜血琼脂平板上形成湿润1光滑、隆起、边缘20种抗菌药的药敏试验.该菌对】4种抗菌药耐药,整齐、直径I2mm的楚落.菌落周围有溶血环。挑对3种抗歯药敏感,对3种杭菌药中敏。结果表明该取可疑繭落镜检并进行细菌纯化。22细菌形态现察经革兰氏染色策检.可见到革兰氏阳性球菌,中广泛存在.在卫生条件较差的饲养场更易发生该菌的感染。鸡葡茄球菌病表现多种临床

7、症状,包括鸡卵黄囊感染、皮下脓肿、跛脚、败血症、关节炎.脊生化鉴定显示,该阐株能分解葡萄糖、乳糖、麦椎炎1坏疽性皮炎以及细菌性心内膜炎、肝的肉芽m,甘雄睜和蔗糖.产酸不产气,在二糖铁培养基肿等.给养鸡业造成较大经济损失。葡萄球苗极易产上斜面和底S均产酸,不产生H3,不产气;血浆凝生耐药性,随着抗菌药物的大贵使用+不断出现新固酶试验和过氣化氢酶试验皆为阳性。生化鉴定表的闲药尚株,细尚的耐药率也不断卜.升:,耐药葡萄球菌所致感染是临床治疗練手问题.发病后的治疗要先做药敏实验,选择最敏感药物。鲁考文m1】史晓涛.陈立功+翟文栋+等.皮炎型鸡葡萄球繭病的珍断九养禽与禽病防治,:i002:3i实验m攻赛

8、后伞部发病.24-36h后3只鸡死2李月翠.5年中金黄色葡萄球菌的药敏及分离丰亡.死亡卓为60发病鸡精神要顿.皮肤发绀Jt节变迁分析【几中华医院感染学杂志,2007,17(1):83.肿胀处皮下水肿+呈灰货色或红黄色、胶冻样;部分3傅先强T刘占哲.养鸡场禽病检验手册北京:接种培养后,分离到金黄色葡萄球菡。对照组雏鸡全部健康存活。3分析与讨论本实验中,病鸡剖检病变特征为皮肤呈絷红色,菌酎药性极强.应引起广泛注意。金黄色葡萄球尚属子条件致病菌.在自然环境呈均匀一致、单个、成双或不规则葡萄串状排列c2.3细阐鉴定明该为金黄色葡萄球歯。2.4药敏U验试验方法及结果判说均遵循兵国临床实验室标准化研究所(

9、Cd)推荐的标准行+结果见表】。2.5动物冋归实验表1金黄色葡萄球苗药敏试验结果抗歯药物抑菌阐直径(mm)敏感件抗葙药物抑菌ffl良径(mm)敏感性_和了米乍星_阿莫西林阿奇苺素氨苄西林恩诺沙星新霉索氟哌酸复方新访明环丙沙星甲氧苄眩嘧啶利福f林讨母素氣霉素强力霉素舒普深头孢嘀肟头孢他定万古葙家头孢拉定卡那霉柰R23MS00RR0R0R0RJ2R1619HS0RR00K0R1712R170R0注:R-砷药:S-敏感:I-中敏。暮禽与食扃坊违2 0】年第3期-8-恩平基孢丈业有限公司旗下的风山馮场是恩平市唯一的供港活禽出U注册场D现饲养的“基龙风山鸡”肉鸡,是由海南优质鹏种栢心选育时成,1-30灭

10、龄的育雏阶段是在fir雊笼内饲养,31天龄之后转人放养区地ifi饲养至130天出栏上市。该场在2008年进人秋季之后的10月发生小肠球也病.造成0.3免03%的死亡,101气时肓脉球虫病病例极为少见.仗用換胺二甲基嘧啶效果理想;但到了2009年8月份,几乎每批鸡都发生苜肠球虫病./并丑造成0.7%左右的死亡.川磺胺类药物控制,效果+理想。球虫病的发生逐 年 严 药 物 控 制 效 果 有 越 來趙恙的踣势。因此,考虑尝试用疫苗免疫的办法来预防球虫病。m是,免疫鸡群要建立坚强的抗球虫免疫力,除了首免人T_接种球虫疫苗外+述要利州疫苗虫抹在鸡体内经过5天左右发育形成的后代印囊+随粪便排出体外后再通

11、过鸡的啄食习性食人而获得“二免有些球虫种类丼至需H才能锈导鸡只产生坚强抗球虫免疫力。因此.使用球虫疫苗鸡群所晛饲料,蛰确保不添加任何具有抗球虫活性的药物这些药物包括专用抗球虫药(如3杜霉岽、盐苺索、地克珠利和尼卡巴嗪等)、四环莱类药(如强力霉素、金葙岽和土裨索等h磺胺类药(如磺桉二甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶和磺胺增效剂TMP等)、有机呻制剂(如洛克沙胂、阿散酸等)、氣霉索类(如蜋苯圯考等)。当然.在接神球虫疫苗的鸡群未建立坚强免疫力之前(即免疫后21天前)也不能在饮水中哄V.述几类药物。2球虫疫苗的保存与R制应用虫病而造成的死亡拫失,以死亡率0.7嘬、死亡鸡6元/只i十算T每只鸡的均摊成本为00

12、4元.含计04元/只;而球也疫苗在使成丰上低于使用抗球虫药。如果再考虑球虫病发生后引起的脉道损伤.使用杭球虫药产生药饬残留等造成的困扰.选择使用球虫疫苗预防球虫病还是很有优势的。可惜的是,用免疫技术顼防球虫病这种绿色环保的方法还未能被广大养殖企业所接受,究其原因.多数是对球虫免疫技术的认识和萃握不够充分,免疫失畋时有发生。1年多来,笔者在雏鸡笼养中大鸡放养条件下对球虫疫m的使用技术进行了探索.获得良奸效果.现将相 关 使 用 技 术 总 结 如 供 同 行参 考*1球虫疫苗的选择可 感 染 典 的 球 虫 有7个 种+但在不同地区不同养殖公司由于其饲养鸡的品种及饲养期氏短的不 所 受 威 胁 的 球 虫 种 类 会 有所不间.而鸡球虫不同种类间没有或很少交乂免疫保护v据报道,广东地区黄羽肉鸡受感染威胁的球虫一般为柔瞰艾美耳球虫h#害艾美耳球虫、H沏艾美耳球虫和堆沏艾美耳球虫4个种。因此,所用疫苗应包含上述4种球ik的6JWCCLS.DiskDivisionSuppkmentaJTahJcs.4J姚火春锊民微生物学实验指导(笫二版)M.北V|00-S10(H2Jam.aiT2007,京t中国农业出皈H+2002,5751I.海尻学化验所编,抗生索药物敏感试验.19W.中国农业大学出版社.1992,172-173,责任编辑.丁焕中

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