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1、免疫学临床应用免疫学临床应用探讨疾病的发病机制探讨疾病的发病机制用于疾病的用于疾病的诊断和防治诊断和防治第1页/共34页第一节第一节 免疫学防治免疫学防治一、免疫预防一、免疫预防自然免疫：指机体感染病原体后建立的特异自然免疫：指机体感染病原体后建立的特异 性免疫。性免疫。人工免疫：指人为地使机体获得免疫人工免疫：指人为地使机体获得免疫人工自动（主动）免疫人工自动（主动）免疫人工被动免疫人工被动免疫过继免疫过继免疫第2页/共34页人工自动免疫人工自动免疫人工被动免疫人工被动免疫输入物质输入物质输入物质输入物质抗原（疫苗、类毒抗原（疫苗、类毒抗原（疫苗、类毒抗原（疫苗、类毒素、瘤苗等）素、瘤苗等）
2、素、瘤苗等）素、瘤苗等）抗体、细胞因子抗体、细胞因子抗体、细胞因子抗体、细胞因子等等等等免疫力出现时间免疫力出现时间免疫力出现时间免疫力出现时间较长，约较长，约较长，约较长，约1414周周周周立即发挥作用立即发挥作用立即发挥作用立即发挥作用免疫力维持时间免疫力维持时间免疫力维持时间免疫力维持时间数月数月数月数月 数年数年数年数年2323周周周周主要用途主要用途主要用途主要用途预防传染性疾病预防传染性疾病预防传染性疾病预防传染性疾病治疗肿瘤治疗肿瘤治疗肿瘤治疗肿瘤治疗或紧急预防治疗或紧急预防治疗或紧急预防治疗或紧急预防第3页/共34页 （一）人工自动免疫（一）人工自动免疫 常用制剂常用制剂疫苗疫
3、苗(Ag)(Ag)1 1、死疫苗（灭活疫苗）：死疫苗（灭活疫苗）：是选用是选用免疫原性强的病原体，经理化方法免疫原性强的病原体，经理化方法使其失去活力制备而成的疫苗。使其失去活力制备而成的疫苗。例如：伤寒菌疫苗、狂犬病疫苗均例如：伤寒菌疫苗、狂犬病疫苗均为灭活疫苗。为灭活疫苗。第4页/共34页 2 2、减毒活疫苗：减毒活疫苗：是用减毒或无毒力是用减毒或无毒力的活病原体制成的疫苗。的活病原体制成的疫苗。例如：脊髓灰质炎疫苗、卡介苗、例如：脊髓灰质炎疫苗、卡介苗、麻疹疫苗是常用的减毒活疫苗。麻疹疫苗是常用的减毒活疫苗。第5页/共34页死疫苗死疫苗活疫苗活疫苗接种特点接种特点接种特点接种特点死，强毒
4、株死，强毒株死，强毒株死，强毒株活，无毒或弱毒株活，无毒或弱毒株活，无毒或弱毒株活，无毒或弱毒株接种剂量接种剂量接种剂量接种剂量较大较大较大较大较小较小较小较小接种次数接种次数接种次数接种次数二次或多次二次或多次二次或多次二次或多次一般只需一次一般只需一次一般只需一次一般只需一次免疫效果免疫效果免疫效果免疫效果较差较差较差较差可靠可靠可靠可靠免疫力维持免疫力维持免疫力维持免疫力维持时间时间时间时间数月数月数月数月11年年年年长达长达长达长达3535年以上年以上年以上年以上疫苗保存疫苗保存疫苗保存疫苗保存易于保存易于保存易于保存易于保存不易保存不易保存不易保存不易保存不良反应不良反应不良反应不良
5、反应较大较大较大较大较小较小较小较小第6页/共34页 3 3、类毒素类毒素：细菌外毒素经甲醛处细菌外毒素经甲醛处理后，失去毒性而保留其免疫原性即理后，失去毒性而保留其免疫原性即为类毒素。为类毒素。例如：破伤风类毒素、白喉类毒素等例如：破伤风类毒素、白喉类毒素等。第7页/共34页 4 4、新型疫苗：新型疫苗：亚单位疫苗、合成疫苗、结合疫苗、基因工程亚单位疫苗、合成疫苗、结合疫苗、基因工程疫苗疫苗第8页/共34页 是给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂，使机体获得免疫力。立即生效，但维持的时间短，约23周。常用制剂有：抗毒素 人免疫球蛋白制剂 细胞因子制剂 （二（二)人工被动免疫人工被
6、动免疫第9页/共34页 自然被动免疫自然被动免疫:母亲通过胎盘将母亲通过胎盘将IgG、通过初乳将通过初乳将sIgA传传给婴儿。给婴儿。第10页/共34页1.1.免疫缺陷免疫缺陷 ：先天或后天：先天或后天B B细胞缺陷导致细胞缺陷导致的抗体合成障碍或合并其他免疫缺陷。的抗体合成障碍或合并其他免疫缺陷。2.2.易感人群易感人群接触或可能接触某种疾病，而接触或可能接触某种疾病，而时间时间不允许主动免疫产生足够的保护作用。不允许主动免疫产生足够的保护作用。3.3.疾病疾病已经存在已经存在，抗体起改善和帮助抑制，抗体起改善和帮助抑制毒素作用，如破伤风。毒素作用，如破伤风。下列情况需应用被动免疫：第11页
7、/共34页（三）计划免疫（三）计划免疫 定义：定义：定义：定义：指根据特点传染病的疫情监测和人群免疫状况分析，按照规定的免疫程指根据特点传染病的疫情监测和人群免疫状况分析，按照规定的免疫程指根据特点传染病的疫情监测和人群免疫状况分析，按照规定的免疫程指根据特点传染病的疫情监测和人群免疫状况分析，按照规定的免疫程序有计划的进行人群免疫接种，以提高人群免疫水平，达到控制以致消灭相应序有计划的进行人群免疫接种，以提高人群免疫水平，达到控制以致消灭相应序有计划的进行人群免疫接种，以提高人群免疫水平，达到控制以致消灭相应序有计划的进行人群免疫接种，以提高人群免疫水平，达到控制以致消灭相应传染病的措施。传
8、染病的措施。传染病的措施。传染病的措施。程序：程序：程序：程序：包括儿童基础免疫、成人和特殊职业、特殊地区人群的免疫。包括儿童基础免疫、成人和特殊职业、特殊地区人群的免疫。包括儿童基础免疫、成人和特殊职业、特殊地区人群的免疫。包括儿童基础免疫、成人和特殊职业、特殊地区人群的免疫。第12页/共34页 二、二、免免 疫疫 治治 疗疗 机体的免疫功能低下或者免疫功能亢进，会导致 免疫缺陷、肿瘤或自身免疫性疾病的发生。免疫治疗是指针对机体低下或亢进的免疫状态，人为地增强或抑制机体的免疫功能达到治疗疾病的治疗方法。用于免疫治疗的制剂有抗体、细胞因子及其拮抗剂、免疫细胞、免疫增强剂和免疫抑制剂。第13页/
9、共34页 （一）采用肿瘤疫苗和疫苗进行的免疫治疗肿瘤疫苗肿瘤疫苗：指给机体输入具有抗原性的瘤苗、刺激机体免疫系统产生抗肿瘤免疫效应，用于治疗肿瘤。疫疫 苗苗：即用于人工诱导机体产生免疫应答或免疫耐受的抗原物质。通过诱导免疫应答可以用于治疗感染、肿瘤等，通过诱导免疫耐受用于治疗自身免疫病和超敏反应性疾病。第14页/共34页 （二）采用抗体进行的免疫治疗 治疗性抗体包括免疫血清、单克隆抗体和基因工治疗性抗体包括免疫血清、单克隆抗体和基因工程抗体：程抗体：抗毒素血清抗毒素血清抗毒素血清抗毒素血清：是将外毒素给马进行多次免疫后取是将外毒素给马进行多次免疫后取得的免疫血清，血清中含有能中和该外毒素的大量
10、抗得的免疫血清，血清中含有能中和该外毒素的大量抗体，叫作抗毒素。抗毒素血清主要用于治疗和紧急预体，叫作抗毒素。抗毒素血清主要用于治疗和紧急预防外毒素所致的疾病。常用的有白喉抗毒素，破伤风防外毒素所致的疾病。常用的有白喉抗毒素，破伤风抗毒素等。但由于抗毒素等。但由于 马血清是异种蛋白，使用过程中有马血清是异种蛋白，使用过程中有可能发生血清病或血清过敏性体克。可能发生血清病或血清过敏性体克。第15页/共34页 单克隆抗体单克隆抗体（McAb）McAb是由一克隆B细胞-骨髓瘤杂交瘤细胞产生的抗单一表位的，类与型均一的高度特异性抗体。由于其性质纯、效价高、特异性强，主要用于检测各种抗原分子和微量物质。
11、或连结抗肿瘤药物、放射性核素用于肿瘤的定位治疗和诊断。但目前所用McAb多为鼠源性的，用于人体后，机体会产生抗鼠源McAb的抗体，减弱其疗效。第16页/共34页 基因工程抗体基因工程抗体 是利用DNA重组技术或蛋白质工程技术，在基因水平上对Ig进行重组或修饰后，导入受体细胞表达产生的抗体。这类型抗体具有更佳的生物学活性，且去除了鼠源性等不良因素。基因工程抗体主要包括嵌合抗体、人源化抗体、完全人源抗体、单链抗体、双价抗体、双特异性抗体。第17页/共34页 （三）采用细胞因子 细胞因子补充和添加疗法细胞因子补充和添加疗法：常应用重组细胞因子作为生物应答调变剂治疗肿瘤、感染、造血障碍等疾病。细胞因子
12、阻断和拮抗疗法细胞因子阻断和拮抗疗法：主要用于治疗自身免疫性疾病、移植排斥、感染性体克等。细胞因子基因疗法细胞因子基因疗法：将细胞因子或其受体基因导入体内，使其在体内持续表达并发挥治疗效应。目前多项基因疗法用于治疗恶性肿瘤、感染、自身免疫性疾病。第18页/共34页 （四）采用免疫细胞进行的免疫治疗 骨髓移植骨髓移植：包括自体骨髓移植、异种骨髓移植和脐血干细胞移植。主要用于治疗免疫缺陷病、再生障碍性贫血及白血病等。免疫效应细胞免疫效应细胞：取肿瘤患者自体免疫效应细胞（包括CTL、NK细胞、巨噬细胞、LAK、TIL等）经体外激活、增殖后回输给患者，主要用于治晚期肿瘤。第19页/共34页 （五）采用
13、免疫增强剂进行的免疫治疗免疫因子免疫因子：有转移因子和免疫核糖核酸化学合成药物化学合成药物：这类药物有左旋咪唑和西咪替丁微生物制剂微生物制剂：有卡介苗和短小棒状杆菌中药制剂中药制剂：如香菇、灵芝、黄芪、人参、刺五加 等 上述免疫增强剂能非特异增强机体免疫功能。第20页/共34页 （五）采用免疫抑制剂进行的免疫治疗化学合成药物化学合成药物：如激素和某些抗肿瘤药物真菌代谢产物真菌代谢产物：如环孢素、FK-506等传统中药传统中药：如雷公藤多甙 免疫抑制剂主要用于抗器官移植排斥反应及自身免疫性疾病。第21页/共34页第二节第二节 免疫学诊断免疫学诊断利用免疫学原理建立的免疫学检测技术，主要利用免疫学
14、原理建立的免疫学检测技术，主要利用免疫学原理建立的免疫学检测技术，主要利用免疫学原理建立的免疫学检测技术，主要应用于对多种免疫性疾病应用于对多种免疫性疾病应用于对多种免疫性疾病应用于对多种免疫性疾病（感染性疾病、免疫（感染性疾病、免疫（感染性疾病、免疫（感染性疾病、免疫缺陷病、超敏反应、自身免疫病、免疫增殖病、缺陷病、超敏反应、自身免疫病、免疫增殖病、缺陷病、超敏反应、自身免疫病、免疫增殖病、缺陷病、超敏反应、自身免疫病、免疫增殖病、移植排斥反应和肿瘤等）移植排斥反应和肿瘤等）移植排斥反应和肿瘤等）移植排斥反应和肿瘤等）的的的的诊断、疗效评估、诊断、疗效评估、诊断、疗效评估、诊断、疗效评估、发
15、病机制探讨、以及对抗原性物质或免疫细胞发病机制探讨、以及对抗原性物质或免疫细胞发病机制探讨、以及对抗原性物质或免疫细胞发病机制探讨、以及对抗原性物质或免疫细胞的定性、定量检测等。的定性、定量检测等。的定性、定量检测等。的定性、定量检测等。第22页/共34页一、抗原-抗体反应的特点 特异性：特异性：抗原的表位与抗体的可变区抗原的表位与抗体的可变区 构型互补。构型互补。可逆性：可逆性：非共价键结合，可解离。非共价键结合，可解离。可见性：可见性：比例条件适当时肉眼可见。比例条件适当时肉眼可见。第23页/共34页二、抗原-抗体反应受多种因素影响1 1、电解质电解质：抗原抗原-抗体反应通常应用抗体反应通
16、常应用0.85%0.85%的氯化钠作为稀释液，以供给适应浓的氯化钠作为稀释液，以供给适应浓度的电解质。度的电解质。2 2、温度温度：3737水浴或孵育箱中进行。水浴或孵育箱中进行。3 3、酸碱度酸碱度：PH68PH68。第24页/共34页三、抗原抗体的检测方法 凝集反应凝集反应凝集反应凝集反应 沉淀反应沉淀反应沉淀反应沉淀反应 补体溶血反应和补体结合反应补体溶血反应和补体结合反应补体溶血反应和补体结合反应补体溶血反应和补体结合反应 中和反应中和反应中和反应中和反应 用标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应用标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应用标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应用标记抗体或抗原进行的抗原抗
17、体反应第25页/共34页（一）凝集反应 细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集现象，称为凝聚反应。形成凝集现象，称为凝聚反应。形成凝集现象，称为凝聚反应。形成凝集现象，称为凝聚反应。1 1 1 1、直接凝集直接凝集直接凝集直接凝集：将细菌或红细胞与相应的抗体直：将细菌或红细胞与相应的抗体直：将细菌或红细胞与相应的抗体直：将细菌或红细胞与相应的抗体直接反应，出现细菌凝集或红细胞凝集现象。接反应，出现细菌凝集或红细胞凝集现象。接反应，出现细菌凝集或红细胞凝集现象。接反应
18、，出现细菌凝集或红细胞凝集现象。2 2 2 2、间接凝集间接凝集间接凝集间接凝集：将可溶性抗原包被在红细胞或乳：将可溶性抗原包被在红细胞或乳：将可溶性抗原包被在红细胞或乳：将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶颗粒表面，与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。胶颗粒表面，与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。胶颗粒表面，与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。胶颗粒表面，与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。第26页/共34页血 球 凝 集第27页/共34页（二）沉淀反应（二）沉淀反应血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等可溶性可溶
19、性可溶性可溶性抗原抗原抗原抗原与相应抗体结合后出现沉淀物，这一类反与相应抗体结合后出现沉淀物，这一类反与相应抗体结合后出现沉淀物，这一类反与相应抗体结合后出现沉淀物，这一类反应称为沉淀反应。应称为沉淀反应。应称为沉淀反应。应称为沉淀反应。沉淀反应可在液体中进行，如絮状沉淀。沉淀反应可在液体中进行，如絮状沉淀。沉淀反应可在液体中进行，如絮状沉淀。沉淀反应可在液体中进行，如絮状沉淀。大多沉淀反应是用半固体琼脂凝胶为介质，进大多沉淀反应是用半固体琼脂凝胶为介质，进大多沉淀反应是用半固体琼脂凝胶为介质，进大多沉淀反应是用半固体琼脂凝胶为介质，进行琼脂扩散故也称免疫扩散。行琼脂扩散故也称免疫扩散。行琼脂
20、扩散故也称免疫扩散。行琼脂扩散故也称免疫扩散。第28页/共34页双向免疫扩散双向免疫扩散 定义定义定义定义:是将抗原与抗体分别是将抗原与抗体分别是将抗原与抗体分别是将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中，二加入琼脂凝胶的小孔中，二加入琼脂凝胶的小孔中，二加入琼脂凝胶的小孔中，二者自由向周围扩散并相遇，者自由向周围扩散并相遇，者自由向周围扩散并相遇，者自由向周围扩散并相遇，在比例合适处形成沉淀线。在比例合适处形成沉淀线。在比例合适处形成沉淀线。在比例合适处形成沉淀线。应用：应用：应用：应用：抗原或抗体的定性抗原或抗体的定性抗原或抗体的定性抗原或抗体的定性 、组成和两种抗原相关性分、组成和两种抗原相
21、关性分、组成和两种抗原相关性分、组成和两种抗原相关性分析的检测。析的检测。析的检测。析的检测。第29页/共34页（三）免疫标记技术-酶免疫测定 是用酶（常用的有辣根过氧化物酶，是用酶（常用的有辣根过氧化物酶，HRP)HRP)标记的抗体进行的抗原抗体反应。标记的抗体进行的抗原抗体反应。EIAEIA将抗原抗体反应的特异性与酶催化作用的高效性相结合，通过酶作用于底物后将抗原抗体反应的特异性与酶催化作用的高效性相结合，通过酶作用于底物后显色来判定结果。常用的方法有酶联免疫吸附试验和酶免疫组化法，前者测定可显色来判定结果。常用的方法有酶联免疫吸附试验和酶免疫组化法，前者测定可溶 性 抗 原 或 抗 体，
22、溶 性 抗 原 或 抗 体，后 者 测 定 组 织 中 或 细 胞 表 面 的 抗 原。后 者 测 定 组 织 中 或 细 胞 表 面 的 抗 原。第30页/共34页 ELISA 检测抗体第31页/共34页 （四）免疫细胞及其功能测定（四）免疫细胞及其功能测定（一）免疫细胞（一）免疫细胞（一）免疫细胞（一）免疫细胞数量检测数量检测数量检测数量检测E E E E花环试验花环试验花环试验花环试验（二）免疫细胞（二）免疫细胞（二）免疫细胞（二）免疫细胞功能检测功能检测功能检测功能检测淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞 转化试验转化试验转化试验转化试验第32页/共34页课 堂 小 结掌握掌握:人工自动、被动免疫的制剂人工自动、被动免疫的制剂掌握掌握:人工自动、被动免疫的区别人工自动、被动免疫的区别熟悉熟悉:过继免疫过继免疫了解了解:计划免疫计划免疫 第33页/共34页感谢您的观看！第34页/共34页