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1、革兰氏染色法革兰氏染色法一，实验目的1。 学习并掌握革兰氏染色法.2了解革兰氏染色原理.3. 巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。二，实验器材1。 菌种大肠杆菌16h 牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物，金黄色葡萄球菌16h 牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。2. 溶液和试剂革兰氏染液,草酸铵结晶紫染液,卢戈氏(Lugol）碘液，95%乙醇，番红复染液等。3. 仪器和其他用品酒精灯，载玻片，显微镜，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸,接种环，试管架,镊子，载玻片夹子，滤纸，滴管和无菌生理盐水等。三，操作步骤1。 制片取活跃生长期菌种按常规方法涂片(不易过厚）,干燥和固定.2. 初染滴加草酸铵结晶紫染液覆盖涂
2、菌部位,染色12min 后倾去染液，水洗至流出水无色。3. 媒染先用卢戈氏碘液冲去残留水迹，再用碘液覆盖1min，倾去碘液，水洗至流出水无色.4. 脱色将玻片上残留水用吸水纸吸取，在白色背景下用滴管流加95%乙醇脱色（一般2030s），当流出液无色时立即用水洗去乙醇。5. 复染将玻片上残留水用吸水纸吸取,用番红复染液染色2min,水洗，吸去残水晾干。6. 镜检油镜观察.7. 混合涂片染色在载玻片同一区域用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片，其他步骤同上。四，实验结果大肠杆菌的形态是杆状的，经革兰氏染色菌体颜色变成红色，说明大肠杆菌是革兰氏阴性（G）细菌.金黄色葡萄球菌的形态是球状的,经革兰氏染色菌体颜色变成蓝色，说明金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性（G)细菌。五，结论1。 革兰氏染色法可将细菌分成革兰氏阳性（G）和革兰氏阴性(G）两种类型，这是由这两种细菌细胞壁结构和组成的差异所决定的。2. 经革兰氏染色后,根据菌体颜色可以判断是革兰氏阳性或革兰氏阴性。细菌被染成蓝色的是革兰氏阳性（G），被染成红色的是革兰氏阴性(G）.3。 经过革兰氏染色可以知道大肠杆菌是革兰氏阴性杆状细菌,金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性球状细菌。