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1、微生物标本送检要求微生物标本送检要求Page 2细菌学检验标本送检基本原则细菌学检验标本送检基本原则n1.及时采集微生物标本做病原学检查n2.在抗菌药物使用前采集标本n3.采样时严格无菌操作n4.采样后立即送检n5.送检标本应注明来源和检验目的Page 3为什么阳性率低为什么阳性率低n标本合格？标本合格？n送检是否及时？送检是否及时？n苛养菌？（军团菌）苛养菌？（军团菌）n厌氧菌？（肺脓肿）厌氧菌？（肺脓肿）nL型号细菌型号细菌n分支杆菌分支杆菌n非典型病原体非典型病原体n抗菌药物的使用抗菌药物的使用Page 4一、分泌物一、分泌物n1.开放性病灶：如眼结膜脓性分泌物、扁桃体、外耳道、手术后切
2、口、导管治疗感染、瘘管内脓液、生殖道分泌物等均属于开放性病灶。应先用无菌生理盐水冲洗表面污染菌，去除旧的分泌物，用灭菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的组织送检。n2.闭锁性脓肿：如淋巴脓肿、肺脓肿、肝脓肿、腹腔脓肿、盆腔脓肿等。采用穿刺或引流的方法采样，应在用药前采集，注意脓液的气味、性状、颜色，注意厌氧菌存在的可能。Page 5二、呼吸道痰标本的正确采集二、呼吸道痰标本的正确采集n时间：清晨n方法：漱口三遍，深咳（取得下呼吸道标本，而不是唾液及鼻咽部的分泌物）n容器：无菌n量：1ml（分支杆菌培养和染色5ml）n其他方法：雾化吸痰，支纤镜，支气管毛刷；n小儿用压舌板刺激咳嗽并用拭
3、子采取。Page 6痰标本合格性判断痰标本合格性判断n1.痰标本外观呈口水样或泡沫样，多为不合格标本。n2.痰标本直接涂片革兰染色镜检，低倍镜观察白细胞和上皮细胞的数目来判断分级 白细胞数（个/LP）上皮细胞数（个/LP）标本是否合格A级 25 10 合格，可做培养 B级 25 10-25 尚且合格，可做培养C级 10 25 不合格，重取标本Page 7三、尿液采集三、尿液采集n1.采集时间：早晨第一次尿n2.采集中段尿：用肥皂水清洗女性的外阴或男性的外生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗。n3.留置导尿管的患者：更换新管时或导尿管穿刺。n4.做厌氧菌培养时应膀胱穿刺采集尿。n5.量：5-10ml
4、Page 8四、血液及无菌体液四、血液及无菌体液 血液等无菌体液培养的价值远胜过痰、分泌物等开放性部位标本对临床的指导意义！Page 9以下一种或几种特征时，考虑采集血标本（采血指征）以下一种或几种特征时，考虑采集血标本（采血指征）n不明原因发热38或体温过低 36n白细胞升高，粒细胞减少n畏寒，寒颤n皮肤黏膜出血n昏迷n多器官功能衰竭n血压降低n肝脾肿大n关节疼痛n突发的急性呼吸体温和生命体征的改变n严重的局部感染（脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、腹部术后感染等）nC反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、1,3-D葡聚糖（G试验）升高Page 10采集血标本的最佳时间采集血标本的最佳时间
5、n只要怀疑患者有菌血症、真菌血症，在考虑使用抗菌药物前，应立即采集血标本。n尽可能在抗菌药物使用前n尽可能在寒颤和发热初起时n如已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采集血培养Page 11采血程序（一）培养瓶的消毒采血程序（一）培养瓶的消毒n采集血标本前先做好手卫生；n弃掉瓶顶塑料，切勿打开金属封口环或胶塞；n75%酒精消毒橡胶塞，60秒，无菌棉签清除残余液体。Page 12采血程序（二）皮肤消毒与采血采血程序（二）皮肤消毒与采血n皮肤消毒：严格三步法消毒；n推荐用20ml注射器静脉穿刺采血，不要换针头直接注入培养瓶；n血样注入培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防止血液凝固。Page 13血标本
6、的采集和运送血标本的采集和运送正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！Page 14血标本的运送血标本的运送n血培养瓶在采血接种后必须马上送检n含血样的培养瓶不要冷藏，也不要放置于温箱！Page 15特别注意特别注意n1.若怀疑标本中有对环境敏感的微生物，如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等应保温并立刻送检。n脑脊液、血液、生殖道、眼、内耳分泌物标本决不可冷藏。Page 16采血注意事项采血注意事项如果没有佩戴无菌手套，不允许按压消毒后的静脉！Page 17采血注意事项采血注意事项当抽血量少于推荐的培养血量时，应优先接种需氧瓶，再接种厌氧瓶！原因：大多数菌血症是
7、由需氧菌和兼性厌氧菌共同引起。Page 18血培养阳性结果解释（是血培养阳性结果解释（是BSI？）？）不太可能棒状杆菌属非-炭疽杆菌痤疮丙酸杆菌 不肯定 凝固酶阴性葡萄球菌临床因素 微生物学危险因素 阳性比例人工装置 报阳时间临床证据 细菌特征 很可能 金葡菌 肺炎链球菌 肠杆菌科细菌 铜绿假单胞菌 白色念珠菌Page 19为什么要用厌氧瓶为什么要用厌氧瓶n 组别 阳性率n需氧瓶厌氧瓶均报阳 55%n仅需氧瓶报阳 26%n仅厌氧瓶报阳 19%Page 20血培养中分离出凝固酶阴性葡萄球菌：感染或污染？血培养中分离出凝固酶阴性葡萄球菌：感染或污染？n有以下情况之一且伴有败血症临床表现者，考虑为感染可能性大：n两次或两次以上血培养均为凝固酶阴性葡萄球菌；n其他部位也分离出凝固酶阴性葡萄球菌；n有中心静脉置管或动静脉造瘘管或其他人工植入物；n静脉吸毒者考虑有感染性心内膜炎时。Page 21阳性率高的提高要求阳性率高的提高要求n恰当的要求n恰当的标本n恰当的采样n恰当的目的（普通，快速，厌氧，高渗，结核，涂片革兰与抗酸？）n恰当的送检n恰当的检验Page 22准确结果的获得需要意识改变准确结果的获得需要意识改变送检文化！文化：根植于内心的修养，以约束未前提的自由，为别人着想的善良，无需提醒的自觉。Page 23 重视微生物检验!重视多学科的协作！