微生物学--水产- 总结.ppt

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1、1.1微生物微生物微生物通常是指那些存在于自然界中的一微生物通常是指那些存在于自然界中的一群个体微小、结构简单、必须借助显微镜群个体微小、结构简单、必须借助显微镜放大数百倍甚至数万倍才能观察清楚的一放大数百倍甚至数万倍才能观察清楚的一类微小生物的总称。类微小生物的总称。1.2微生物分三大类微生物分三大类1非细胞型微生物:病毒、类病毒、朊病毒。非细胞型微生物:病毒、类病毒、朊病毒。(个体极小,能通过细胞滤器,无典型细胞结构,只能在(个体极小,能通过细胞滤器,无典型细胞结构,只能在敏感宿主的活细胞内生长繁殖)敏感宿主的活细胞内生长繁殖)2原核细胞型微生物:细菌、放线菌、霉形原核细胞型微生物:细菌、

2、放线菌、霉形体、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、体、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、蓝细菌等。蓝细菌等。(细胞形态和结构明显,但细胞核无核膜或核仁,细胞器不很完善)(细胞形态和结构明显,但细胞核无核膜或核仁,细胞器不很完善)3真核细胞型微生物:真菌、原生生物。真核细胞型微生物:真菌、原生生物。1.3 微生物的五大共性微生物的五大共性体积小,面积大体积小,面积大吸收多,转化快吸收多,转化快生长旺,繁殖快生长旺,繁殖快适应强,易变异适应强,易变异分布广,种类多分布广,种类多1.4 微生物的主要作用微生物的主要作用有益作用有益作用1.推动自然界物质循推动自然界物质循环和能量流动环和能量流动2.净

3、化环境,维持生净化环境,维持生态平衡态平衡3维护人和动物健康维护人和动物健康4.制造加工食品和工制造加工食品和工农业产品农业产品5.用于生物科学研究用于生物科学研究和生物工程和生物工程有害作用有害作用1.某些微生物能引起某些微生物能引起人和动、植物的疾病人和动、植物的疾病 2.毁坏工农业产品、毁坏工农业产品、农副产品和生活用品农副产品和生活用品1.5水产微生物学与水产养殖业的关水产微生物学与水产养殖业的关系系水产微生物学是微生物学应水产微生物学是微生物学应用于水产养殖业后逐渐发展用于水产养殖业后逐渐发展而成的一个分支学科而成的一个分支学科其主要任务是在研究微生物其主要任务是在研究微生物学的一般

4、理论和技术的基础学的一般理论和技术的基础上,上,研究微生物与水产养殖研究微生物与水产养殖环境、水产动物饲料、水产环境、水产动物饲料、水产动物疾病、水产品保鲜、贮动物疾病、水产品保鲜、贮藏的关系,充分发挥微生物藏的关系,充分发挥微生物在改善养殖环境、提高抗病在改善养殖环境、提高抗病力和健康水平、防治水产动力和健康水平、防治水产动物疾病以及防止水产品腐败物疾病以及防止水产品腐败变质中的作用,保障水产业变质中的作用,保障水产业的持续发展。的持续发展。基础学科、应用学科基础学科、应用学科水产微生物学水产微生物学的特点的特点研究时间短研究时间短研究范围广研究范围广研究难度较大研究难度较大水产动物病原微水

5、产动物病原微生物的致病力有生物的致病力有较强的条件依赖较强的条件依赖性性水产动物的免疫水产动物的免疫学研究基础薄弱学研究基础薄弱Microbiology in Aquaculture 细菌细菌(bacterium)是属于原核生物界是属于原核生物界(prokaryotae)的一种的一种形体微小形体微小、结构简单结构简单、具有、具有细胞细胞壁壁和和原始核质原始核质、无、无核仁核仁和和核膜核膜,除,除核糖体核糖体外无其他细外无其他细胞器的单细胞型微生物。胞器的单细胞型微生物。2.1 细菌 广义广义的细菌泛指各类原核细胞型微生物,包括细菌、的细菌泛指各类原核细胞型微生物,包括细菌、立克次体、衣原体、霉

6、形体、螺旋体及放线菌等。立克次体、衣原体、霉形体、螺旋体及放线菌等。狭义狭义则专指其中数量最大、种类最多、具有典型代表性的则专指其中数量最大、种类最多、具有典型代表性的细菌。细菌。2.2细菌的大小与形态细菌的大小与形态观察工具光学显微镜光学显微镜测量单位一般以一般以mm为测量单位为测量单位 球菌据形态不同分三大类 杆菌 螺形菌细菌的大小2.3 细菌的群体形态细菌的群体形态菌落菌落:某个细菌某个细菌在适合生长的固体培养基表在适合生长的固体培养基表面或内部面或内部,在适宜的条件下,经过一定时间培在适宜的条件下,经过一定时间培养,多数为养,多数为1824h,可生长繁殖大量的菌体,可生长繁殖大量的菌体

7、,形成一个肉眼可见的、有一定形态的独立群形成一个肉眼可见的、有一定形态的独立群体,称为菌落,又称克隆。体,称为菌落,又称克隆。可用于细菌的分离、纯化、计数和鉴定。可用于细菌的分离、纯化、计数和鉴定。菌苔菌苔:各各“菌落菌落”相互连接形成一片。相互连接形成一片。2.4细菌的基本结构细菌的基本结构细胞壁细胞壁细胞膜细胞膜细胞质细胞质核质核质细菌的特殊结构细菌的特殊结构糖被(荚膜)糖被(荚膜)S层层鞭毛鞭毛菌毛菌毛芽孢芽孢2.4.1.1细胞壁的功能细胞壁的功能维持菌体固有的形态维持菌体固有的形态保护细菌抵抗不利环境保护细菌抵抗不利环境参与菌体内外的物质交换参与菌体内外的物质交换菌体表面带有多种抗原分

8、子,可诱发机体菌体表面带有多种抗原分子,可诱发机体的免疫应答。的免疫应答。2.4.1.2革兰染色法:革兰染色法:两类细菌细胞壁的共同组分为肽聚糖,但各有其特殊组分。革兰染色法:革兰染色法:涂片 风干 固定 结晶紫 碘液 95%乙醇 复红1min1min脱色革兰阳性菌革兰阳性菌革兰阴性菌革兰阴性菌革兰氏染色革兰氏染色2.4.1.3细菌细胞壁的结构细菌细胞壁的结构革兰氏阳性菌细胞壁革兰氏阳性菌细胞壁肽聚糖肽聚糖磷壁酸磷壁酸 磷壁酸的主要生理功能磷壁酸的主要生理功能 提高膜结合酶的能力提高膜结合酶的能力 贮藏磷元素贮藏磷元素 保证革兰氏阳性致病菌与保证革兰氏阳性致病菌与其寄主间的粘连,避免被其寄主间

9、的粘连,避免被白细胞吞噬以及抗补体的白细胞吞噬以及抗补体的作用作用 赋予革兰氏阳细菌以特异赋予革兰氏阳细菌以特异的表面抗原的表面抗原 可作为噬菌体的特异性吸可作为噬菌体的特异性吸附受体附受体 能调节细胞内自溶素的活能调节细胞内自溶素的活力,以防止细胞因自溶而力,以防止细胞因自溶而死亡。死亡。革兰氏阴性菌细胞壁革兰氏阴性菌细胞壁外膜外膜(外壁层):外壁层):位于肽聚糖层的外位于肽聚糖层的外部。部。脂多糖脂多糖 脂蛋白脂蛋白 脂质双层脂质双层内壁层(周质间隙):内壁层(周质间隙):紧紧贴胞膜贴胞膜,仅由仅由12层肽层肽聚糖分子构成。聚糖分子构成。脂多糖的功能脂多糖的功能(1)能够吸附钙离子、)能够

10、吸附钙离子、镁离子等阳离子;镁离子等阳离子;(2)为噬菌体提供特异)为噬菌体提供特异的吸附受体的吸附受体 2.4.1.4细胞壁的化学组成细胞壁的化学组成 革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较革兰氏阳性革兰氏阳性革兰氏阴性革兰氏阴性厚度厚度厚厚 15-80nm薄薄 10-15nm肽聚糖肽聚糖多多 40%-95%少少 10%-20%脂类脂类少少 1%-4%多多 11%-22%磷壁酸磷壁酸有有无无外膜外膜无无有有脂蛋白脂蛋白无无有有脂多糖脂多糖无无有有2.4.1.5细菌细胞壁缺陷型(细菌细菌细胞壁缺陷型(细菌L型)型)细菌细胞壁缺陷型或细菌细胞壁缺

11、陷型或L型:型:细胞壁受损后仍能生长和分裂细胞壁受损后仍能生长和分裂的细菌。在一般环境中不能耐受菌体内的高渗透压而将会的细菌。在一般环境中不能耐受菌体内的高渗透压而将会涨破死亡。在高渗环境下,仍可存活。涨破死亡。在高渗环境下,仍可存活。革兰阳性菌细胞壁缺失后,原生质仅被一层细胞膜包住革兰阳性菌细胞壁缺失后,原生质仅被一层细胞膜包住原生质体原生质体。革兰阴性菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护革兰阴性菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护原生质球原生质球。2.4.1.5细菌细胞壁缺陷型(细菌细菌细胞壁缺陷型(细菌L型)型)形态和染色性形态和染色性 细菌细菌L L型呈高度多型呈高度多形性,大小不一。形性,大小不一。

12、着色不匀,无论其着色不匀,无论其原为革兰阳性或阴原为革兰阳性或阴性菌,形成性菌,形成L L型大型大多染成革兰阴性。多染成革兰阴性。培养特性和菌落形态培养特性和菌落形态细菌细菌L型生长缓慢,营养要型生长缓慢,营养要求高,必须用高渗的培养基。求高,必须用高渗的培养基。细菌细菌L型在高渗的培养基上型在高渗的培养基上生长后形成三种类型的菌落。生长后形成三种类型的菌落。油煎蛋样菌落(典型油煎蛋样菌落(典型L型菌落)型菌落)颗粒型菌落颗粒型菌落 丝状菌落丝状菌落2.4.2细胞膜细胞膜细菌细胞膜的结构与真核细胞者基本细菌细胞膜的结构与真核细胞者基本相同,由磷脂和多种蛋白质组成,但相同,由磷脂和多种蛋白质组成

13、,但不含胆固醇。不含胆固醇。细菌细胞膜的功能与真核细胞者类似,细菌细胞膜的功能与真核细胞者类似,主要有物质转运、生物合成和呼吸等主要有物质转运、生物合成和呼吸等作用。作用。2.4.3间体、核体间体、核体 间体:间体:是部分细胞是部分细胞膜内陷、折叠、卷曲膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物,多见形成的囊状物,多见于革兰阳性菌。其功于革兰阳性菌。其功能类似于真核细胞的能类似于真核细胞的线粒体。线粒体。核体核体细菌不具有成形的核,细菌不具有成形的核,无核膜、核仁,遗传无核膜、核仁,遗传物质称为核质或拟核。物质称为核质或拟核。功能是功能是负载遗传信息。负载遗传信息。核质由单一密闭环状核质由单一密闭环状DN

14、A分子反复回旋卷分子反复回旋卷曲盘绕组成松散网状曲盘绕组成松散网状结构。结构。2.4.4细胞质细胞质细胞质:细胞质:细菌细胞膜细菌细胞膜内包裹的、除核体以内包裹的、除核体以外的所有物质,是一外的所有物质,是一种无色、透明、均质种无色、透明、均质的胶体,基本成分为的胶体,基本成分为水、蛋白质、脂类、水、蛋白质、脂类、多糖、核糖核酸及无多糖、核糖核酸及无机盐类等,是细菌进机盐类等,是细菌进行营养物质代谢及合行营养物质代谢及合成核酸和蛋白质的场成核酸和蛋白质的场所。含有各种酶系统、所。含有各种酶系统、核糖体、质粒、包含核糖体、质粒、包含物等。物等。核糖体核糖体核糖体核糖体 :是分散在细胞质是分散在细

15、胞质中的颗粒状结构,由核糖体中的颗粒状结构,由核糖体核酸(占核酸(占2/3)和蛋白质)和蛋白质(占(占1/3)组成。)组成。沉降系数:沉降系数:70s,由,由50s大亚基和大亚基和 30s 小亚基构成。小亚基构成。功能:功能:是细胞合成蛋白质的机构。是细胞合成蛋白质的机构。2.质粒粒:细菌染色体外的共细菌染色体外的共价闭合环状双链价闭合环状双链DNA分子。分子。控制细菌某些特定的遗传特控制细菌某些特定的遗传特性。性。3.3.内含物内含物内含物内含物:贮存营养物质和贮存营养物质和其他物质的颗粒样结构,有其他物质的颗粒样结构,有脂肪滴、糖原、异染颗粒等。脂肪滴、糖原、异染颗粒等。2.4.5荚膜的功

16、能荚膜的功能抗吞噬作用:抗吞噬作用:荚膜具有抵抗宿主吞噬细胞的作用,荚膜具有抵抗宿主吞噬细胞的作用,因而荚膜是病原菌的重要毒力因子因而荚膜是病原菌的重要毒力因子。抗有害物质的损伤作用:抗有害物质的损伤作用:荚膜处于细胞的最外层,荚膜处于细胞的最外层,有保护菌体避免和减少受有害物质的损伤作用。有保护菌体避免和减少受有害物质的损伤作用。营养物质的贮存场所与废物排出之地营养物质的贮存场所与废物排出之地2.4.6S 层的功能层的功能1.分子筛和离子通道分子筛和离子通道2.屏障作用,保护细屏障作用,保护细菌菌3.黏附宿主细胞黏附宿主细胞4.重要的表面抗原重要的表面抗原鞭毛的功能鞭毛的功能鞭毛是运动器官。

17、鞭毛是运动器官。鞭毛有抗原性。鞭毛有抗原性。与致病性有关。与致病性有关。2.4.7菌毛菌毛与细菌的运动无关。菌毛蛋白具有抗原性。与细菌的运动无关。菌毛蛋白具有抗原性。菌毛在光镜下看不到,必须用电镜观察。菌毛在光镜下看不到,必须用电镜观察。普通菌毛普通菌毛是细菌的粘附是细菌的粘附结构,能与宿结构,能与宿主细胞表面的主细胞表面的特异性受体结特异性受体结合。与细菌的合。与细菌的致病性密切相致病性密切相关。关。性菌毛性菌毛仅见于少数革兰阴性菌。仅见于少数革兰阴性菌。数量少,数量少,1-4根。根。比普通菌毛长而粗,中空呈管状。比普通菌毛长而粗,中空呈管状。性菌毛由致育因子(性菌毛由致育因子(F)编码,故

18、又称)编码,故又称F菌毛。菌毛。F+菌内的质粒或菌内的质粒或DNA可通过性菌毛可通过性菌毛进入进入F-菌体菌体内内,性菌毛是某些噬菌体吸附于菌细性菌毛是某些噬菌体吸附于菌细胞的受体。胞的受体。2.4.8芽胞芽胞某些细菌在一定的环境条某些细菌在一定的环境条件下,能在菌体内部形成件下,能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体,一个圆形或卵圆形小体,是细菌的休眠形式。芽胞是细菌的休眠形式。芽胞形成后细菌即失去繁殖能形成后细菌即失去繁殖能力。力。产生芽胞的都是革兰阳性产生芽胞的都是革兰阳性菌。菌。芽孢的特点芽孢的特点芽孢的特点芽孢的特点(1)对高温、对高温、干燥、辐射、干燥、辐射、化学药物有强大的抵抗力。

19、化学药物有强大的抵抗力。(2)含水量低、壁厚而致密,含水量低、壁厚而致密,通透性差通透性差,不易着色,折光不易着色,折光性强。性强。(3)芽胞内新陈代谢几乎停芽胞内新陈代谢几乎停止,处于休眠状态,但保止,处于休眠状态,但保持潜在萌发力。持潜在萌发力。(4)不是繁殖器官,一个芽不是繁殖器官,一个芽孢萌发只产生一个营养状孢萌发只产生一个营养状态的细胞。态的细胞。2.4.8.1芽胞与芽胞与繁殖体繁殖体一个细菌只形成一个芽胞,一个芽胞发芽一个细菌只形成一个芽胞,一个芽胞发芽也只生成一个菌体,细菌数量并未增加,也只生成一个菌体,细菌数量并未增加,因而芽胞不是细菌的繁殖方式。与芽胞相因而芽胞不是细菌的繁殖

20、方式。与芽胞相比,未形成芽胞而具有繁殖能力的菌体可比,未形成芽胞而具有繁殖能力的菌体可称为称为繁殖体。繁殖体。2.5细菌的营养类型细菌的营养类型光能自养型光能自养型化能自养型化能自养型光能异养型光能异养型化能异养型化能异养型 腐生菌腐生菌 寄生菌寄生菌 兼性寄生菌兼性寄生菌细菌的营养物质细菌的营养物质碳素化合物碳素化合物氮素化合物氮素化合物矿质元素矿质元素生长因子生长因子水水2.6细菌的生长繁殖细菌的生长繁殖个体生长个体生长 个体繁殖个体繁殖 群体生长群体生长群体生长群体生长 个体生长个体生长+个体繁殖个体繁殖个体生长繁殖个体生长繁殖简单的二分裂方式进行无性繁殖简单的二分裂方式进行无性繁殖细菌

21、分裂数量倍增所需的时间成为细菌分裂数量倍增所需的时间成为代时。代时。由于微生物的个体极小,所以常用群体生由于微生物的个体极小,所以常用群体生长来反映个体生长的状况长来反映个体生长的状况细菌群体生长规律细菌群体生长规律细菌生长曲线细菌生长曲线 细菌接种到均匀的液体细菌接种到均匀的液体培养基后,在不补充营养培养基后,在不补充营养物质或移去培养物,保持物质或移去培养物,保持整个培养液体积不变条件整个培养液体积不变条件下,以时间为横坐标,以下,以时间为横坐标,以菌数为纵坐标,根据不同菌数为纵坐标,根据不同培养时间里细菌数量的变培养时间里细菌数量的变化,可以作出一条反映细化,可以作出一条反映细菌在整个培

22、养期间菌数变菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线,这种曲线化规律的曲线,这种曲线称为生长曲线称为生长曲线(growth cuwe)。迟缓期迟缓期其它名称:延滞期、停滞期、调整期、适应期其它名称:延滞期、停滞期、调整期、适应期现象:活菌数没增加,曲线平行于横轴。现象:活菌数没增加,曲线平行于横轴。特点:特点:生长速率常数生长速率常数=0细胞形态变大或增长细胞形态变大或增长细胞内细胞内RNA特别是特别是rRNA含量增高,原生质嗜碱性增强含量增高,原生质嗜碱性增强合成代谢活跃(核糖体、酶类、合成代谢活跃(核糖体、酶类、ATP合成加快),易产合成加快),易产生诱导酶生诱导酶对外界不良条件敏感,(如氯化钠

23、浓度、温度、抗生对外界不良条件敏感,(如氯化钠浓度、温度、抗生素等化学药物)素等化学药物)原因:适应新环境条件,合成新酶,积累必要中原因:适应新环境条件,合成新酶,积累必要中间产物间产物对数期对数期其他名称:指数期其他名称:指数期 现象:细胞数目以几何级增加,其对数与现象:细胞数目以几何级增加,其对数与时间呈直线关系时间呈直线关系 特点:特点:生长速率常数最大,即代时最短生长速率常数最大,即代时最短细胞进行平衡生长,细胞进行平衡生长,菌体大小、形态、生理特菌体大小、形态、生理特征等比较一致征等比较一致代谢最旺盛代谢最旺盛细胞对理化因素较敏感细胞对理化因素较敏感稳定期稳定期又称:恒定期或最高生长

24、期又称:恒定期或最高生长期特点:特点:新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等,新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等,微生物的微生物的生生长速率处于动态平衡,培养物中的细胞数目达到最高值。长速率处于动态平衡,培养物中的细胞数目达到最高值。细胞分裂速度下降,开始积累内含物,产芽孢的细菌开始细胞分裂速度下降,开始积累内含物,产芽孢的细菌开始产芽孢。产芽孢。此时期的微生物开始此时期的微生物开始合成次生代谢产物合成次生代谢产物,对于发酵生产来,对于发酵生产来说,一般在稳定期的后期产物积累达到高峰,是最佳的收说,一般在稳定期的后期产物积累达到高峰,是最佳的收获时期。获时期。原因:营养物尤其是生长限制因子

25、的耗尽;原因:营养物尤其是生长限制因子的耗尽;营养物的比例营养物的比例失调,如碳氮比不合适失调,如碳氮比不合适;有害代谢废物的积累(酸、醇、有害代谢废物的积累(酸、醇、毒素等);物化条件(毒素等);物化条件(pH、氧化还原势等)不合适等、氧化还原势等)不合适等.衰亡期衰亡期特点:特点:细胞死亡数增加,死亡数大大超过新增殖的细胞细胞死亡数增加,死亡数大大超过新增殖的细胞数,群体中的活菌数目急剧下降,出现数,群体中的活菌数目急剧下降,出现“负生长负生长”。细胞内颗粒更明显,细胞出现多形态、畸形或衰细胞内颗粒更明显,细胞出现多形态、畸形或衰退形,芽孢开始释放。退形,芽孢开始释放。因菌体本身产生的酶及

26、代谢产物的作用,使菌体因菌体本身产生的酶及代谢产物的作用,使菌体死亡、自溶等,发生自溶的菌生长曲线表现为向死亡、自溶等,发生自溶的菌生长曲线表现为向下跌落的趋势。下跌落的趋势。产生原因:产生原因:生长条件的进一步恶化,使细胞内的分解代谢大生长条件的进一步恶化,使细胞内的分解代谢大大超过合成代谢,继而导致菌体的死亡大超过合成代谢,继而导致菌体的死亡按培养基成分分按培养基成分分按培养基的用途分按培养基的用途分按物理性状分按物理性状分2.7培养基的类培养基的类型型培养基类型培养基类型合成培养基合成培养基天然培养基天然培养基基本培养基基本培养基富集培养基富集培养基鉴别培养基鉴别培养基固体培养基固体培养

27、基液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基2.8细菌在培养基中的生长情况2.8.1在液体培养基中的生长情况2.8.2在固体培养基中的生长情况2.8.3在半固体培养基中的生长情况2.9细菌鉴定的步骤1、获得该菌种的纯种培养物2 查找权威性的鉴定手册3 应用合适的鉴定方法确定细菌的分类地位经典分类法分子分类法免疫学法半自动和自动检测系统2.10细菌的致病性与传染1.1.非病原菌非病原菌非病原菌非病原菌:对人类、动物、植物对人类、动物、植物对人类、动物、植物对人类、动物、植物无害无害无害无害,甚至甚至甚至甚至有益有益有益有益的细菌。的细菌。的细菌。的细菌。绝大多数!绝大多数!绝大多数!绝大多数!

28、2.2.病原菌病原菌病原菌病原菌:凡能导致机体发病的细菌称为致病菌或凡能导致机体发病的细菌称为致病菌或凡能导致机体发病的细菌称为致病菌或凡能导致机体发病的细菌称为致病菌或病原菌。病原菌。病原菌。病原菌。3.3.条件性病原菌:条件性病原菌:条件性病原菌:条件性病原菌:有一些细菌通常情况下不致病,有一些细菌通常情况下不致病,有一些细菌通常情况下不致病,有一些细菌通常情况下不致病,是共栖菌,在一定条件下是共栖菌,在一定条件下是共栖菌,在一定条件下是共栖菌,在一定条件下(如机体抵抗力下降如机体抵抗力下降如机体抵抗力下降如机体抵抗力下降)可可可可致病。如:大肠杆菌。致病。如:大肠杆菌。致病。如:大肠杆菌

29、。致病。如:大肠杆菌。4.4.腐生性病原菌腐生性病原菌腐生性病原菌腐生性病原菌:有一些细菌本身不致病,但其代有一些细菌本身不致病,但其代有一些细菌本身不致病,但其代有一些细菌本身不致病,但其代谢产物具有毒性,进入机体后呈现毒谢产物具有毒性,进入机体后呈现毒谢产物具有毒性,进入机体后呈现毒谢产物具有毒性,进入机体后呈现毒 害作用如:害作用如:害作用如:害作用如:肉毒梭菌。肉毒梭菌。肉毒梭菌。肉毒梭菌。2.10.1致病性与毒力致病性与毒力1.细菌致病性是指一定种类的细菌,在一定细菌致病性是指一定种类的细菌,在一定条件下,对一定宿主致病的能力。又叫致条件下,对一定宿主致病的能力。又叫致病力或病原性。

30、不同病原菌对宿主有一定病力或病原性。不同病原菌对宿主有一定的嗜性,如多杀性巴氏杆菌只对动物致病。的嗜性,如多杀性巴氏杆菌只对动物致病。致病性致病性是微生物是微生物“种种”的特性的特性,即一种微生即一种微生物只能引起一定的传染病。物只能引起一定的传染病。由种属遗传性由种属遗传性决定。决定。2.10.12.毒力毒力:病原菌致病能力的强弱程度称为毒病原菌致病能力的强弱程度称为毒力。毒力是菌株个体的特征,同一种病原力。毒力是菌株个体的特征,同一种病原菌,因菌株的不同,其毒力大小也不相同。菌,因菌株的不同,其毒力大小也不相同。不同菌株,根据毒力大小可分为强毒株、不同菌株,根据毒力大小可分为强毒株、弱毒株

31、和无毒株。一般菌株毒力愈强致病弱毒株和无毒株。一般菌株毒力愈强致病性愈强。性愈强。3.菌株或毒株(菌株或毒株(Strain):指从同一种类):指从同一种类动物不同的个体或不同地区的同一种动物动物不同的个体或不同地区的同一种动物体内分离到的同一种病原微生物。体内分离到的同一种病原微生物。2.10.2需要说明需要说明1.绝大部分病原微生物都是寄生性微生物它绝大部分病原微生物都是寄生性微生物它们是从生活的机体们是从生活的机体(即寄主即寄主)获得营养,在获得营养,在宿主体内生长繁殖,并以特有的毒害作用宿主体内生长繁殖,并以特有的毒害作用侵害宿主。侵害宿主。2.大多数病原微生物又并不是绝对的寄生性大多数

32、病原微生物又并不是绝对的寄生性微生物,真正严格的寄生性微生物是病毒、微生物,真正严格的寄生性微生物是病毒、立克次氏体等。立克次氏体等。2.10.3病原的致病机理病原的致病机理病原的致病机理是一个多因素的过程。这一病原的致病机理是一个多因素的过程。这一过程依赖于过程依赖于 宿主的免疫状态宿主的免疫状态 毒力毒力 病原菌病原菌 感染的途径感染的途径 感染的数量感染的数量2.10.4.1柯赫法则柯赫法则柯赫法则柯赫法则 是确定某种细菌是否具有致病性的主要依是确定某种细菌是否具有致病性的主要依据,其要点:据,其要点:第一,特殊的病原菌应在同一疾病中可查见,在健康第一,特殊的病原菌应在同一疾病中可查见,

33、在健康者不存在;者不存在;第二,此病原菌能被分离培养而得到纯种;第二,此病原菌能被分离培养而得到纯种;第三,此纯培养物接种易感动物,能导致同样病症;第三,此纯培养物接种易感动物,能导致同样病症;第四,从感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培第四,从感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。养。该法则也适用于其他病原微生物,如病毒等。该法则也适用于其他病原微生物,如病毒等。法则评价法则评价 柯赫法则在确定细菌致病性方面具有重要意义,特别是鉴定一柯赫法则在确定细菌致病性方面具有重要意义,特别是鉴定一种新的病原体时非常重要。但是,它也具有一定的局限性。种新的病原体时非常重要。但是,它也具有一定的局限

34、性。2.10.4.2基因水平的柯赫法则基因水平的柯赫法则第一,应在致病菌株中能检出某些特定基因或其第一,应在致病菌株中能检出某些特定基因或其产物,而无毒力菌株中没有。产物,而无毒力菌株中没有。第二,有毒力菌株的某个基因被损坏,则其毒力第二,有毒力菌株的某个基因被损坏,则其毒力应减弱或消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内,应减弱或消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内,后者成为有毒力菌株。后者成为有毒力菌株。第三,将细菌接种动物时,这个基因应在感染的第三,将细菌接种动物时,这个基因应在感染的过程中表达。过程中表达。第四,在接种动物检测到这个基因产物的抗体,第四,在接种动物检测到这个基因产物的抗体,或产

35、生免疫保护。或产生免疫保护。该法则也适用于其他微生物,如病毒。该法则也适用于其他微生物,如病毒。2.10.5构成病原菌毒力的因素构成病原菌毒力的因素构成细菌毒力的物质为毒力因子,主要有构成细菌毒力的物质为毒力因子,主要有侵袭力和毒素。侵袭力的大小、毒素的性侵袭力和毒素。侵袭力的大小、毒素的性质和数量,决定着病原菌毒力的强弱。质和数量,决定着病原菌毒力的强弱。(一)侵袭力(一)侵袭力(Invasiveness)是指病原性是指病原性细菌突破机体的防卫屏障,在体内生长、细菌突破机体的防卫屏障,在体内生长、繁殖、扩散的能力。繁殖、扩散的能力。侵袭力对机体无直接毒害作用侵袭力对机体无直接毒害作用包括:侵

36、袭性酶和菌体表面结构包括:侵袭性酶和菌体表面结构 2.10.5.1病原菌侵袭动物机体的方式病原菌侵袭动物机体的方式主要有以下几个方面主要有以下几个方面1 1细菌的附着力细菌的附着力细菌的附着力细菌的附着力 细菌的附着力主要细菌的附着力主要细菌的附着力主要细菌的附着力主要 依靠粘附素发挥作用。依靠粘附素发挥作用。依靠粘附素发挥作用。依靠粘附素发挥作用。(菌毛菌毛菌毛菌毛,外膜蛋白等外膜蛋白等外膜蛋白等外膜蛋白等)2 2抗吞噬和定居抗吞噬和定居抗吞噬和定居抗吞噬和定居 这两点主要与菌体表面结构有关这两点主要与菌体表面结构有关这两点主要与菌体表面结构有关这两点主要与菌体表面结构有关;3 3促进扩散和

37、转移促进扩散和转移促进扩散和转移促进扩散和转移 有些细菌侵入机体后,在体有些细菌侵入机体后,在体有些细菌侵入机体后,在体有些细菌侵入机体后,在体内生长繁殖,破坏组织结构,并扩散转移。内生长繁殖,破坏组织结构,并扩散转移。内生长繁殖,破坏组织结构,并扩散转移。内生长繁殖,破坏组织结构,并扩散转移。该点主要与侵袭性酶有关该点主要与侵袭性酶有关该点主要与侵袭性酶有关该点主要与侵袭性酶有关;2.10.5.2侵袭性酶侵袭性酶侵袭性酶侵袭性酶属胞外酶属胞外酶属胞外酶属胞外酶,本身无毒本身无毒本身无毒本身无毒性作用性作用性作用性作用,但可但可但可但可破坏机体内的一些组破坏机体内的一些组破坏机体内的一些组破坏

38、机体内的一些组织结构织结构织结构织结构,从而从而从而从而在感染过程中协助病在感染过程中协助病在感染过程中协助病在感染过程中协助病原菌在侵入原菌在侵入原菌在侵入原菌在侵入机体后抗吞噬或扩散。机体后抗吞噬或扩散。机体后抗吞噬或扩散。机体后抗吞噬或扩散。菌体表面结构菌体表面结构菌毛等粘附因子菌毛等粘附因子菌毛等粘附因子菌毛等粘附因子 细细细细菌的附着力菌的附着力菌的附着力菌的附着力GG菌:菌毛,受体是菌:菌毛,受体是糖蛋白。糖蛋白。G+G+菌:菌体表面的突菌:菌体表面的突菌:菌体表面的突菌:菌体表面的突出物。出物。出物。出物。如如如如A A型链球菌的膜磷型链球菌的膜磷型链球菌的膜磷型链球菌的膜磷壁酸

39、壁酸壁酸壁酸,受体是类蛋白和受体是类蛋白和受体是类蛋白和受体是类蛋白和糖蛋白糖蛋白糖蛋白糖蛋白2.10.5.3荚膜和微荚膜荚膜和微荚膜-抗吞噬抗吞噬和定居和定居有抗吞噬、抗体液中杀菌物质的作用,使病有抗吞噬、抗体液中杀菌物质的作用,使病原菌能留在宿主体内迅速繁殖,产生病变。原菌能留在宿主体内迅速繁殖,产生病变。所以有荚膜的细菌的毒力比该种细菌失去荚所以有荚膜的细菌的毒力比该种细菌失去荚膜时的毒力明显增强。膜时的毒力明显增强。此外此外,还有一些其他结构与此有关还有一些其他结构与此有关,如大肠杆如大肠杆菌的菌的K抗原和沙门菌的抗原和沙门菌的Vi抗原抗原,不仅抗吞噬不仅抗吞噬,且具抗抗体且具抗抗体,

40、抗补体。抗补体。2.10.6毒素毒素毒素是细菌在生命活动过程中产生的、对毒素是细菌在生命活动过程中产生的、对动物机体具有毒性作用的特殊物质动物机体具有毒性作用的特殊物质,可大大可大大增强微生物的毒害作用增强微生物的毒害作用,这种毒性物质就叫这种毒性物质就叫做毒素。做毒素。内毒素内毒素毒素毒素 外毒素外毒素2.10.6.1外毒素外毒素是微生物在生命活动过程中产生并释放或分泌到周围环境中是微生物在生命活动过程中产生并释放或分泌到周围环境中的毒素。的毒素。蛋白质,因而具有蛋白质的理化特性,易被热,酸,碱重蛋白质,因而具有蛋白质的理化特性,易被热,酸,碱重金属等破坏;金属等破坏;毒性很强,产生的症状有

41、高度特异性毒性很强,产生的症状有高度特异性,具选择性毒害;具选择性毒害;良好的抗原性;可刺激机体产生较高的特异性抗体,即良好的抗原性;可刺激机体产生较高的特异性抗体,即抗抗毒素毒素;破抗;破抗 主要是某些主要是某些G G菌及部分菌及部分G G产生。产生。类毒素:外毒素经类毒素:外毒素经0.40.4的甲醛的甲醛3733737 7天处理后,可以天处理后,可以脱毒,但仍保持其抗原性,称之为脱毒,但仍保持其抗原性,称之为类毒素类毒素。外毒素的毒性具有高度的特异性外毒素的毒性具有高度的特异性抗毒素和类毒素可预防和治疗外毒素中毒症;抗毒素和类毒素可预防和治疗外毒素中毒症;2.10.6.2内毒素内毒素特指一

42、类由革兰氏阴性菌在正常代谢过程中产生,在细菌特指一类由革兰氏阴性菌在正常代谢过程中产生,在细菌生活状态下不释放或不分泌到外界环境中去,只有菌体细生活状态下不释放或不分泌到外界环境中去,只有菌体细胞自溶、死亡崩解,或人工方法胞自溶、死亡崩解,或人工方法(超声波处理、反复冻融、超声波处理、反复冻融、研磨等研磨等)破坏其细胞的完整性时,才释放出来的毒素。破坏其细胞的完整性时,才释放出来的毒素。是是一一种种“多多糖糖-磷磷脂脂-蛋蛋白白质质“的的复复合合物物,主主要要成成分分为为脂脂多糖多糖(LPS),主要毒性成分为类脂,主要毒性成分为类脂A;对热具有相当的抵抗力;对热具有相当的抵抗力;毒毒性性比比外

43、外毒毒素素弱弱,产产生生的的症症状状没没有有特特异异性性;一一般般小小白白鼠致死量约为鼠致死量约为200400 g。抗原性弱,只能刺激机体产生微量的抗毒素;抗原性弱,只能刺激机体产生微量的抗毒素;G G菌及衣原体、立克次体、螺旋体等产生菌及衣原体、立克次体、螺旋体等产生 经甲醛处理后也能降低毒性,但不能称为类毒素。经甲醛处理后也能降低毒性,但不能称为类毒素。内内毒毒素素无无特特异异性性的的致致病病作作用用,动动物物机机体体各各种种内内毒毒素素中中毒毒反应基本相同反应基本相同2.10.6.3内毒素与外毒素的区别要点内毒素与外毒素的区别要点要要 点点内内 毒毒 素素外外 毒毒 素素来来 源源G菌菌

44、G+及及G菌菌存在部位存在部位胞壁成分,裂解后释放胞壁成分,裂解后释放胞浆内合成分泌至胞外,胞浆内合成分泌至胞外,细菌溶溃后释放细菌溶溃后释放化学性质化学性质脂多糖脂多糖 蛋白质蛋白质稳稳 定定 性性160,2-4小时破坏小时破坏60-80,30分钟破坏分钟破坏毒性作用毒性作用较弱较弱各菌的毒性效应大致相同各菌的毒性效应大致相同引起发热,白细胞增多,引起发热,白细胞增多,微循环障碍休克,微循环障碍休克,DIC等等较强较强对组织器官有选择性毒害效应引对组织器官有选择性毒害效应引起特殊临表现起特殊临表现抗抗 原原 性性弱,能使机体产生保护性抗体弱,能使机体产生保护性抗体尚未制成类内毒素尚未制成类内

45、毒素强,能使机体产生抗毒素强,能使机体产生抗毒素可脱毒成为类毒素可脱毒成为类毒素检测方法检测方法鲎血试验及热原试验鲎血试验及热原试验皮内试验、中和试验皮内试验、中和试验及动物试验及动物试验2.10.6.4细菌毒力的控制细菌毒力的控制 微生物的毒力微生物的毒力微生物的毒力微生物的毒力-病病病病原微生物所特有的原微生物所特有的原微生物所特有的原微生物所特有的一种生物学性状。一种生物学性状。一种生物学性状。一种生物学性状。自然条件,不同菌自然条件,不同菌自然条件,不同菌自然条件,不同菌株,不同毒株株,不同毒株株,不同毒株株,不同毒株 不同条件,同一菌不同条件,同一菌不同条件,同一菌不同条件,同一菌株

46、,同一毒株株,同一毒株株,同一毒株株,同一毒株 流行初期毒力强,流行初期毒力强,流行初期毒力强,流行初期毒力强,后期弱,经培养后后期弱,经培养后后期弱,经培养后后期弱,经培养后毒力弱、感染后增毒力弱、感染后增毒力弱、感染后增毒力弱、感染后增强。强。强。强。增强细菌毒力的方法:增强细菌毒力的方法:增强细菌毒力的方法:增强细菌毒力的方法:1.1.通过易感动物通过易感动物通过易感动物通过易感动物 2.2.与其他细菌通过协同作用与其他细菌通过协同作用与其他细菌通过协同作用与其他细菌通过协同作用 减弱细菌毒力的方法(主要是提供减弱细菌毒力的方法(主要是提供减弱细菌毒力的方法(主要是提供减弱细菌毒力的方法

47、(主要是提供给细菌不很适宜的生活条件,使其给细菌不很适宜的生活条件,使其给细菌不很适宜的生活条件,使其给细菌不很适宜的生活条件,使其逐渐减弱对原寄主的毒力。)逐渐减弱对原寄主的毒力。)逐渐减弱对原寄主的毒力。)逐渐减弱对原寄主的毒力。)1 1长期在人工培养基上继代培养:长期在人工培养基上继代培养:长期在人工培养基上继代培养:长期在人工培养基上继代培养:2 2高于最适温度下培养高于最适温度下培养高于最适温度下培养高于最适温度下培养 3.3.在含有特殊化学物质的培养基中进行培养在含有特殊化学物质的培养基中进行培养在含有特殊化学物质的培养基中进行培养在含有特殊化学物质的培养基中进行培养 4.4.通过

48、不易感动物通过不易感动物通过不易感动物通过不易感动物 5.5.在特殊气体条件下培养在特殊气体条件下培养在特殊气体条件下培养在特殊气体条件下培养 6.6.通过基因工程的方法通过基因工程的方法通过基因工程的方法通过基因工程的方法 固定细菌毒力的方法(低温真空干固定细菌毒力的方法(低温真空干固定细菌毒力的方法(低温真空干固定细菌毒力的方法(低温真空干燥法)燥法)燥法)燥法)2.10.6.5毒力的测定毒力的测定通常用来表示微生物毒力大小的单位有:通常用来表示微生物毒力大小的单位有:最小致死量(最小致死量(MLD):能使特定的动物在感染后一定时限):能使特定的动物在感染后一定时限内发生死亡的最小活微生物

49、量或毒素量。内发生死亡的最小活微生物量或毒素量。半数致死量(半数致死量(LD50):能使实验动物在感染后一定时限内):能使实验动物在感染后一定时限内发生半数死亡的活微生物量或毒素量。发生半数死亡的活微生物量或毒素量。最小感染量(最小感染量(MID):指病原微生物对试验对象):指病原微生物对试验对象(如实验动如实验动物物,鸡胚鸡胚,细胞培养等细胞培养等)发生传染的最小剂量。发生传染的最小剂量。半数感染量(半数感染量(ID50):指病原微生物能对半数试验对象):指病原微生物能对半数试验对象发生传染的剂量发生传染的剂量 2.10.7细菌感染步骤1 定植定植2 干扰或逃避宿主的防御机制干扰或逃避宿主的

50、防御机制 抗吞噬作用抗吞噬作用 抗体液免疫抗体液免疫3 内化作用内化作用4 在体内增值在体内增值5 在体内扩撒在体内扩撒 2.11.1传染与发病传染与发病1.传染:是指一定种类的微生物在特定的条件下传染:是指一定种类的微生物在特定的条件下,侵入机体侵入机体,在一定部位生长繁殖在一定部位生长繁殖,并与宿主防御功并与宿主防御功能相互作用引起不同程度的病理过程。能相互作用引起不同程度的病理过程。2.发病:病原微生物感染之后发病:病原微生物感染之后,对宿主造成明显的对宿主造成明显的损害损害,在临床上有明显症状。是感染的一种表现形在临床上有明显症状。是感染的一种表现形式。式。2.11.2传染与感染传染传

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