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1、课题课题1 1 大大肠肠杆菌的培养与分离杆菌的培养与分离北京市怀柔区第一中学曹文竹第一部分第一部分 微生物的利用微生物的利用课题背景课题背景如何保持培养物纯净呢？资料：19世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。经过一番研究，法国科学家巴斯德发现，导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。由此人们认识到保持培养物纯净的重要性。无菌技术：1.消毒与杀菌 消毒：消除表面或内部的部分微生物 杀菌：杀死内外所有微生物，包括芽孢和孢子2.常用方法巴氏消毒法：牛奶化学药剂：双手、水源灼烧灭菌：接种环等（金属）干热灭菌：160-170 1-2h
2、（玻璃器皿、金属）高压蒸汽灭菌：121 100KPa 15-30min（培养基）紫外线消毒法：30min（空气中的微生物）酒精灯火焰附近操作；超净工作台上操作。回忆有关细胞的元素组成、分子组成的知识，想一想微生物应该生活在什么环境中呢？培养基组成培养基组成葡萄糖葡萄糖 10g10g蛋白质蛋白质 5g5gNaCl NaCl 15g15gH H2 2O O 定溶定溶1000 1000 mLmL主要营养物质主要营养物质 碳源碳源 氮源氮源 无机盐无机盐氢元素、氧元素氢元素、氧元素 维生素维生素 0.1ml 0.1ml 与与生长有关生长有关大肠杆菌的分离纯化新课探讨新课探讨阅读教材P16-17，回答问
3、题：（1）你能归纳培养基的配制流程吗？（2）配置培养基是应该注意什么？结晶紫中性红胆盐琼脂配制培养基的过程配制培养基的过程：计算计算 称量称量 溶化（溶解）溶化（溶解）灭菌灭菌倒平板倒平板注意：注意：注意：注意：1.培养基冷却至50左右倒平板2.倒平板时应在酒精灯附近操作培养基的分类：1.物理性质 液体培养基：菌种培养或工业生产 半固体培养基：观察微生物运动 固体培养基：微生物的分离、鉴定、计数 2.组成成分 合成培养基：分离、鉴定微生物 天然培养基：生产3.用途：选择培养基：缺某种物质或多加某种物质 鉴别培养基：加指示剂或化学药品月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）配置培养基：溶化（溶解）分装倒平板：倒平板：接种：接种针灼烧灭菌 平板划线大肠杆菌的纯化方法：稀释涂布平板法 平板划线法大肠杆菌的分离纯化学生活动学生活动1.平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌要求：（1）每四人一组，每组均需完成两种方法；（2）组内成员可任选一种分离方法。2.培养 将培养皿倒置放在培养箱内，于36培养24h。结晶紫中性红胆盐琼脂课题1 大肠杆菌的培养与分离作业布置作业布置思考：1.为什么培养皿在培养箱内要倒置呢？2.菌落是种群吗？作业：1.对比实验，说出自己操作过程中的不足；2.简述实验操作注意事项；3.通过实验注意事项完善实验设计。北京市怀柔区第一中学曹文竹