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1、 福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院实验四实验四酵母菌、霉菌、放线菌酵母菌、霉菌、放线菌个体形态观察个体形态观察 福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院一 实验目的l学习并掌握观察酵母菌、霉菌和放线菌形学习并掌握观察酵母菌、霉菌和放线菌形态的基本方法，了解常见菌种的的基本形态的基本方法，了解常见菌种的的基本形态特征；态特征；l学会插片法对微生物的个体形态进行观察。学会插片法对微生物的个体形态进行观察。福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院二 实验原理 微生物菌落即微生物聚集在一起的群体结构。在自然界中，我们肉眼所见到的微生物都是以菌落状态存在，不同种类的微生物
2、有其特定的群体结构。因此，根据群体结构（菌落特征），我们可以初步把它们“分门别类”作粗略鉴定。本实验通过对细菌、放线菌、酵母菌，霉菌等四大类微生物菌落特征的观察，学习以菌落特征来区分四大类微生物的基本方法。福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院三 实验材料第二周从土壤中通过稀释平板分离得到的微生物；标准菌株（酵母菌、霉菌、放线菌）；载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯及火柴、尖头镊子、石炭酸复红染色液、显微镜等。福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院四 实验步骤（一）菌落特征的观察 用肉眼观察生长在琼脂平板上的各种霉菌菌落，并根据下列要求对每种霉菌的菌落特征加以描述。1.1.菌落
3、的大小：菌落的大小：局限生长或蔓延生长，菌落的直径和高度。2.2.菌落的颜色：菌落的颜色：正面和背面的颜色，培养基的颜色变化。3.3.菌落的形态：菌落的形态：棉絮状、网状、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院真真菌菌的的菌菌落落n细菌的菌落细菌的菌落 福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院n真菌的菌落特征可作为分类依据之一：真菌的菌落特征可作为分类依据之一：福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院 福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院四大类微生物菌落比较表四大类微生物菌落比较表培养基培养基细菌细菌放线菌放线菌酵母菌
4、酵母菌霉菌霉菌牛肉膏牛肉膏高氏一号高氏一号马铃薯马铃薯马铃薯马铃薯菌落形状 小点状，多为圆形，个别呈根状，辐射状圆形辐射状多为原形大小一般较小较小比细菌大而厚大颜色多样（乳白、灰白、灰、红、荧光等）正反面颜色相同多样（灰白、白红、粉红、蓝、紫、橙等）正反面颜色不同多为乳白色多样（白，灰蓝、绿黑、粉红等）正反面一般颜色不同表面状态光滑或粗糙，湿润或干燥，较粘初期似细菌菌落，晚期为粉状干燥表面湿润粘稠绒毛状，粉状，棉絮状，蜘蛛网状，菌丝疏松生长速度一般较快慢较快快与基质结合程度不牢牢固，不易挑取不牢较牢生长范围有限有限有限多为无限气味往往有臭味有泥腥味常有酒香味往往有霉味 福建农林大学生命科学学院
5、福建农林大学生命科学学院（二）个体形态特征的观察（二）个体形态特征的观察插片法插片法接种和分离工具接种和分离工具1接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院（二）个体形态特征的观察（二）个体形态特征的观察插片法插片法（以放线菌为例）（以放线菌为例）接种：挑取菌种在培养基平板上密集划线接种或取0.2ml菌液涂布平板；插片：无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45角插入平板琼脂接种线上；培养：将平板倒置，于28培养3-5天；镜检：用镊子小心取出盖玻片，用纸擦去背面培养物，有菌面朝上放在载玻片上，通过显微镜直接用
6、低倍镜和高倍镜镜检观察（在盖玻片菌体附着部位低价0.1%吕氏碱性美蓝染色后观察效果更好）。福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院五 注意事项在插片法操作过程中，注意在移动有附着有菌体的盖玻片时勿碰动菌丝体，必须菌面朝上，以免破坏菌丝体形态；用接种环将菌体与染液混合时不要剧烈涂抹，以免破坏细胞；滴加染液要适中，否则用盖玻片覆盖时，染液过多会溢出，过少会产生大量气泡；盖玻片要缓慢倾斜覆盖，以免产生气泡。在直接制片观察中，用镊子取菌和用解剖针分散菌丝时要细心，尽量减少菌丝断裂及形态被破坏。福建农林大学生命科学学院福建农林大学生命科学学院六 思考题1、描述自己分离到的微生物的菌落特征及个体形态特征？2、总结利用插片法进行个体形态观察的操作要点？