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1、实验六培养基的制备及常用器皿的准备第1页，共17页，编辑于2022年，星期五1、学会培养基的制备和常用器皿的准备方法。、学会培养基的制备和常用器皿的准备方法。2、学会高压蒸汽灭菌及干热灭菌方法。、学会高压蒸汽灭菌及干热灭菌方法。一、实验目的及要求一、实验目的及要求第2页，共17页，编辑于2022年，星期五二、实二、实 验验 原理原理 n培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。n培养基的种类很多，使用的原料也各有差异。但从营养角培养基的种类很多，使用的原料也各有差异。但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所需的度分析，培养基中一般含有微生物所需的
2、C源、源、N源、无源、无机盐、生长因子以及水机盐、生长因子以及水等。另外，培养基中一般含有适等。另外，培养基中一般含有适宜的宜的pH值值，一定的，一定的氧化还原电位及合适的渗透压氧化还原电位及合适的渗透压。n任何一种培养基制成后应及时的灭菌，以备培养菌使用，任何一种培养基制成后应及时的灭菌，以备培养菌使用，一般培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌。一般培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌。第3页，共17页，编辑于2022年，星期五三、实三、实 验验 器器 材材1、培养基：营养琼脂培养基、改良查氏培养基。、培养基：营养琼脂培养基、改良查氏培养基。2、器器皿皿：移移液液管管、培培养养皿皿、试试管管、三三角角瓶瓶、搪搪
3、瓷瓷缸缸、量筒等。量筒等。3、仪器：高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱。、仪器：高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱。4、其他：报纸、纱布、棉花、棉线绳。、其他：报纸、纱布、棉花、棉线绳。第4页，共17页，编辑于2022年，星期五实验所需物品实验所需物品w综合性实验每排综合性实验每排5 5人一组人一组，每组每组请备齐下列物品：请备齐下列物品：1 1、洗干净的培养皿、洗干净的培养皿1010个。个。2 2、洗干净的试管、洗干净的试管1010个。个。3 3、洗干净的、洗干净的无塞三角瓶无塞三角瓶2 2个个，具塞三角瓶具塞三角瓶2 2个个。4 4、培养皿桶、培养皿桶1 1个。个。5 5、1-2ml1-2ml刻度
4、吸管刻度吸管3 3支。支。6 6、洗耳球、洗耳球1 1个、玻璃棒个、玻璃棒1 1支。支。7 7、搪瓷量杯、搪瓷量杯1 1个。个。8 8、量筒、量筒1 1个。个。w纱布、棉花、棉绳、培养基、天平等在最后一排实验台纱布、棉花、棉绳、培养基、天平等在最后一排实验台第5页，共17页，编辑于2022年，星期五四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤1、营、营养琼脂培养基的配制养琼脂培养基的配制称量称量1.0克可溶性淀粉克可溶性淀粉。加少量水加热溶化，然后。加少量水加热溶化，然后加入加入4.5克营养琼脂克营养琼脂，加水至加水至100毫升毫升，煮沸煮沸后倒入后倒入无塞三角瓶无塞三角瓶中，中，加棉塞报纸包扎后用高
5、压蒸汽灭菌加棉塞报纸包扎后用高压蒸汽灭菌器灭菌。器灭菌。第6页，共17页，编辑于2022年，星期五四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤2、改良查氏培养基改良查氏培养基NaNO3 2gK2HPO4 1gKCl 0.5gMgSO4 0.5gFeSO4 0.01gNaCl 60g蔗糖蔗糖 30g琼脂琼脂 20g水水 1000ml煮沸后倒入煮沸后倒入无塞三角瓶无塞三角瓶中，加棉塞灭菌。中，加棉塞灭菌。建议每班集中配建议每班集中配1000ml1000ml，然，然后均分到各组。后均分到各组。第7页，共17页，编辑于2022年，星期五第8页，共17页，编辑于2022年，星期五四、实验方法和步骤四、实验方法和
6、步骤2、无菌水的制备（稀释用）、无菌水的制备（稀释用）取取9ml蒸蒸馏馏水水于于试试管管（18180mm）中中，塞塞棉棉塞塞，报纸包扎后湿热灭菌。报纸包扎后湿热灭菌。取取90ml蒸馏水于具塞三角瓶中。蒸馏水于具塞三角瓶中。第9页，共17页，编辑于2022年，星期五 手提小型高压蒸汽灭菌手提小型高压蒸汽灭菌 第10页，共17页，编辑于2022年，星期五 立式高压蒸汽灭菌立式高压蒸汽灭菌 第11页，共17页，编辑于2022年，星期五四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤第12页，共17页，编辑于2022年，星期五四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤4、常用器皿准备（干热灭菌）、常用器皿准备（干热灭菌）a.刻度吸管的包装刻度吸管的包装 b.培养皿的包装培养皿的包装 第13页，共17页，编辑于2022年，星期五 第14页，共17页，编辑于2022年，星期五 第15页，共17页，编辑于2022年，星期五 电热鼓风干燥箱（干热灭菌用）电热鼓风干燥箱（干热灭菌用）第16页，共17页，编辑于2022年，星期五1、高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌和和干干热热灭灭菌菌各各适适用用于于哪哪些些物物品？品？2、两两种种灭灭菌菌技技术术应应注注意意哪哪些些关关键键操操作作？3、培养皿等干热灭菌前包扎的目的？、培养皿等干热灭菌前包扎的目的？五、五、作作 业业 题题第17页，共17页，编辑于2022年，星期五