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1、病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程第三章第三章 食用菌的遗传与育种食用菌的遗传与育种病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程 食用菌遗传和变异的规律及分子机制食用菌遗传和变异的规律及分子机制 食用菌的生活史食用菌的生活史 食用菌的交配类型和繁殖模式食用菌的交配类型和繁殖模式食用菌遗传学食用菌遗传学 有性生殖中基因的遗传分析有性生殖中基因的遗传分析 细胞质遗传细胞质遗传 杂种优势的原理及应用杂种优势的原理及应用食用菌育种食用菌育种 食用菌育种的原理、技
2、术路线和方法食用菌育种的原理、技术路线和方法病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程第一节第一节 食用菌的繁殖方式食用菌的繁殖方式第二节第二节 食用菌的生活史食用菌的生活史第三节第三节 食用菌的育种技术食用菌的育种技术病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程第一节食用菌的繁殖方式第一节食用菌的繁殖方式 多多数数食食用用菌菌完完整整生生活活史史包包括括 无无性性 及及 有有性性两两个个阶阶段段，主主要要进进行行从从担担孢孢子子萌萌发发再再到到新新一一代代担担
3、孢孢子子产产生生的的有有性性生生殖殖过过程程，其其间间要要经经过过质质配配、核核配配及及减数分裂减数分裂三大步骤。三大步骤。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程一、无性繁殖一、无性繁殖无性繁殖：不通过有性生殖细胞的结合，而由亲无性繁殖：不通过有性生殖细胞的结合，而由亲代直接产生新个体的生殖方式叫无性繁殖，食用代直接产生新个体的生殖方式叫无性繁殖，食用菌的无性繁殖主要有以下几种形式：菌的无性繁殖主要有以下几种形式：1.1.以菌丝断裂的方式繁殖；以菌丝断裂的方式繁殖；2.2.以产生无性孢子的方式繁殖：如香菇产生节以产生无性孢
4、子的方式繁殖：如香菇产生节孢子，双孢蘑菇产生次生孢子，草菇产生厚垣孢孢子，双孢蘑菇产生次生孢子，草菇产生厚垣孢子，黑木耳产生钩状分生孢子等；子，黑木耳产生钩状分生孢子等；3.3.以出芽方式繁殖。以出芽方式繁殖。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程特点：特点：无性孢子在不良条件下有较强抗性，无性孢子在不良条件下有较强抗性，在适宜条件下可再萌发为原来的一级菌丝在适宜条件下可再萌发为原来的一级菌丝或二极菌丝，继续进行有性生活过程。或二极菌丝，继续进行有性生活过程。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且
5、在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程二、有性繁殖二、有性繁殖 通通过过有有性性生生殖殖细细胞胞的的结结合合，产产生生新新个个体体的的繁繁殖殖方式，叫有性繁殖。方式，叫有性繁殖。孢子核基因的不同就决定了其所萌发成的单核菌孢子核基因的不同就决定了其所萌发成的单核菌丝的不同性别。有性繁殖根据进行质配的单核菌丝的不同性别。有性繁殖根据进行质配的单核菌丝的性别，又可以分为以下两种形式。丝的性别，又可以分为以下两种形式。（一）同宗结合（一）同宗结合（二）异宗结合（二）异宗结合病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程 同同宗宗结
6、结合合：即即质质配配发发生生在在同同一一个个孢孢子子萌萌发发的的两两条条单单核核菌菌丝丝之之间间，不不需需与与异异性性结结合合，又又称称自自交交亲亲和和，这这种种自自交交可可育育的的繁繁殖殖方方式式称称为为同同宗宗结结合合。可可分分为为初初级级同同宗宗结结合和次级同宗结合。合和次级同宗结合。其担孢子的基因性完全一致。其担孢子的基因性完全一致。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程初初级级同同宗宗结结合合：担担孢孢子子只含有减减数数分分裂裂后后产产生生的的4 4个个核核中中的的一一个个，单单核核担担孢孢子子萌萌发发形形成成的
7、的单单核核菌菌丝丝细细胞胞间间不不须须经经过过异异体体菌菌丝丝的的融融合合，就就可可自自己己发发生生双双核核化化，并并完完成成核核配配和和减减数数分分裂裂的的有有性性生生活活史史的的全部过程。草菇即属于这一类型。全部过程。草菇即属于这一类型。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程次级同宗结合：次级同宗结合：每个担子只产生每个担子只产生2个担孢子，个担孢子，每个担孢子内含有减数分裂后形成的每个担孢子内含有减数分裂后形成的4个核中具个核中具有不同交配型基因的有不同交配型基因的2个核，双核担孢子个核，双核担孢子 萌发后萌发后形成
8、可孕的多核的异核菌丝体，这种菌丝体不与形成可孕的多核的异核菌丝体，这种菌丝体不与其他菌丝交配就可自行完成有性生活史。双孢蘑其他菌丝交配就可自行完成有性生活史。双孢蘑菇即属于这一类型菇即属于这一类型病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程 异异宗宗结结合合：大大多多食食用用菌菌的的担担孢孢子子或或单单核核菌菌丝丝有有 “雌雌”、“雄雄”性性之之分分（常常用用“”、“”表表示示）。其其性性别别是是由由遗遗传传因因子子控控制制的的，只只有有异异性性的的单单核核菌菌丝丝，才才能能质质配配成成双双核核菌菌丝丝，而而同同性性别别的的菌菌
9、丝丝永永不不亲亲和和，也也不不产产生生有有性性孢孢于于，这这种种现象称异宗结合，也称自交不育。现象称异宗结合，也称自交不育。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程二极性二极性9090的菌类属异宗结合，有两种类型：的菌类属异宗结合，有两种类型：二极性和四极性。二极性和四极性。：是是由由一一对对遗遗传传因因子子 （AaAa）所所控控制制的的，这这类类食食用用菌菌所所产产生生的的担担孢孢子子以以及及其其萌萌发发的的初初生生菌菌丝丝，不不是是A A型型，就就是是a a型型，四四个个担担孢孢子子分分属属二二种种类类型型，即即二二个个
10、是是A A，二二个个是是a a，两两两两相相等等，称称为为二二极极性性。只只有有组组成成AaAa时时，才才能能出出现现正正常常的的锁锁状状联联合合，形形成成双双核核菌菌丝丝体体，最最后后发发育育成成子子实实体体。如如果果各各担担孢孢子子萌萌发发的的单单核核菌菌丝丝，让让其其自自己己配配对对，可可育育率率有有5050（表表1 1），黑黑木木耳耳、渭渭菇菇等等属属于于二二极极性菌类。性菌类。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程表表1 1 二极性组合的可育情况二极性组合的可育情况 孢子性别 A A a a A A a a “十
11、十”表示两者可育表示两者可育,“”表示两者不表示两者不可育，可育，可育率有可育率有50。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程四四极极性性:大大部部分分食食用用菌菌的的性性别别是是由由二二对对独独立立分分离离的的遗遗传传因因子子（AaAa和和 BbBb）所所控控制制的的。四四个个担担孢孢子子的的性性基基因因，分分别别是是ABAB、AbAb、aBaB、abab四四种种类类型型，近近似似四四种种性性别别，称称为为四四极极性性。属属于于四四极极性性初初生生菌菌丝丝，只只有有AaBbAaBb的的组组合合才才是是可可育育的的，可可育
12、育率率2525（表表2 2），香香菇菇、朴朴菇菇、平平菇、银耳、毛木耳等即属四极性菌类菇、银耳、毛木耳等即属四极性菌类病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程表表2 2 四极性组合的可育情况四极性组合的可育情况 孢子性别 AB Ab aB ab AB 00Ab 00aB 0000ab 000000十表示两者可育十表示两者可育 表示两者不可育表示两者不可育病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程无论是同宗结合或异宗结合，都是细胞质的结无论是同宗结合或异宗结合
13、，都是细胞质的结合，细胞核并不结合，只是紧靠地排列成对。合，细胞核并不结合，只是紧靠地排列成对。这些偶对细胞核继续不断地分裂，形成大量的这些偶对细胞核继续不断地分裂，形成大量的新细胞，使菌丝体迅速地生长发育。新细胞，使菌丝体迅速地生长发育。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程第二节第二节 食用菌的生活史食用菌的生活史一、生活史的概念一、生活史的概念所谓生活史，是指生物一生所经历的生长发育和繁所谓生活史，是指生物一生所经历的生长发育和繁殖阶段的生活周期殖阶段的生活周期(全过程全过程)。食用菌的生活史是指从孢子萌发，经历菌丝
14、体、子食用菌的生活史是指从孢子萌发，经历菌丝体、子实体阶段，以及又由子实体产生孢子的循环过程。实体阶段，以及又由子实体产生孢子的循环过程。多数食用菌的生活史是：多数食用菌的生活史是：担孢子担孢子 担孢子萌发担孢子萌发 初生菌丝（单核菌丝）初生菌丝（单核菌丝）两条可亲和的初生菌丝融合两条可亲和的初生菌丝融合 次生菌丝（双核菌次生菌丝（双核菌丝）丝）子实体原基子实体原基 子实体子实体 担孢子担孢子病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程二、食用菌中伞菌类的典型生活史二、食用菌中伞菌类的典型生活史 食用菌中多数伞菌类的典型生活史由
15、以下几个阶段食用菌中多数伞菌类的典型生活史由以下几个阶段组成：组成：u担孢子萌发，生活史开始：担孢子萌发，生活史开始：u单核菌丝（初生菌丝）开始发育。单核菌丝（初生菌丝）开始发育。u两条可亲和的单核菌丝两条可亲和的单核菌丝通过融合进行质配，形成双核菌通过融合进行质配，形成双核菌丝体。丝体。多数食用菌的双核菌丝具有锁状联合。双核菌丝多数食用菌的双核菌丝具有锁状联合。双核菌丝能够独立地、无限地繁殖，有些种的双核菌丝能产生粉能够独立地、无限地繁殖，有些种的双核菌丝能产生粉孢子、厚垣孢子等无性孢子。孢子、厚垣孢子等无性孢子。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长
16、繁殖，引起不同程度的病理生理过程u在适宜的环境条件下，双核菌丝发育成结实性菌丝在适宜的环境条件下，双核菌丝发育成结实性菌丝(三三生菌丝生菌丝)并组织化，产生子实体。如冬虫夏草、茯苓等。并组织化，产生子实体。如冬虫夏草、茯苓等。u子实体菌褶表面或菌管内壁的双核菌丝的顶端细胞发子实体菌褶表面或菌管内壁的双核菌丝的顶端细胞发育成担子，进入有性生殖阶段。育成担子，进入有性生殖阶段。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程8.8.u来自两个亲本的一对交配型不同的单倍体核在担子中融来自两个亲本的一对交配型不同的单倍体核在担子中融合，进行
17、核配，形成一个双倍体核；合，进行核配，形成一个双倍体核；u双倍体核进行减数分裂，结果产生四个单倍体核；双倍体核进行减数分裂，结果产生四个单倍体核；u担子顶端生担子顶端生4个小梗，小梗顶端膨大成幼担子，各个单倍个小梗，小梗顶端膨大成幼担子，各个单倍体核分别移至担子小梗的顶端，形成担孢子。至此，完体核分别移至担子小梗的顶端，形成担孢子。至此，完成了一个完整的生活史。成了一个完整的生活史。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程担孢子萌发担孢子萌发单核菌丝单核菌丝断裂方式（无性孢断裂方式（无性孢子）营养繁殖子）营养繁殖双核菌丝双核
18、菌丝质配断裂方式（无性孢断裂方式（无性孢子）营养繁殖子）营养繁殖锁状联合产生更多的双产生更多的双核菌丝，扭结核菌丝，扭结成子实体原基成子实体原基分化分化子实体子实体菌管与菌褶形成子实层双核菌丝先端细双核菌丝先端细胞形成担子细胞胞形成担子细胞核配双倍体核双倍体核减数分裂减数分裂担子细胞形成担子细胞形成四个单倍体的四个单倍体的核，同时形成核，同时形成四个突起四个突起担孢子担孢子弹射发育担子菌纲食用菌担子菌纲食用菌的典型生活史的典型生活史 病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程 核融合核融合Nuclear fusion减数分裂减
19、数分裂meiosis 担孢子梗担孢子梗sterigmataBasidiospores担孢子担孢子Basidium（担子）（担子）病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程三、有性繁殖过程中细胞核的变化三、有性繁殖过程中细胞核的变化一是质配后开始的异核双核阶段，即异核双核期。一是质配后开始的异核双核阶段，即异核双核期。具有产生子实体的能力，是大部分食用菌的主要存具有产生子实体的能力，是大部分食用菌的主要存在形式；在形式；二是核配后开始的短暂的双倍核期；二是核配后开始的短暂的双倍核期；三三是是核核配配马马上上进进行行减减数数分分裂
20、裂，每每个个细细胞胞中中都都有有4 4个个单单倍体核，称倍体核，称为单为单核期，此期亦短核期，此期亦短暂暂。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程四、食用菌中几种有代表性的生活史类型四、食用菌中几种有代表性的生活史类型 各各种种食食用用菌菌的的生生活活史史，由由于于控控制制有有性性过过程程的的基基因因不不同同而而有有差异，下面举几个有代表性的食用菌生活史类型。差异，下面举几个有代表性的食用菌生活史类型。草菇的生活史：草菇的生活史：初级同宗结合初级同宗结合子实体子实体担子担子担孢子担孢子减数分裂减数分裂核配核配单核菌丝单核菌
21、丝双核化双核化双核菌丝双核菌丝子实体原基子实体原基病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程 双孢蘑菇的生活史：次级同宗结合双孢蘑菇的生活史：次级同宗结合子实体子实体担子担子担孢子担孢子减数分裂减数分裂核配核配多核菌丝多核菌丝子实体原基子实体原基病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程香菇的生活史：四极性异宗结合，双因子控制、香菇的生活史：四极性异宗结合，双因子控制、四极性四极性 病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长
22、繁殖，引起不同程度的病理生理过程第三节第三节 食用菌的育种技术食用菌的育种技术 食食用用菌菌栽栽培培是是一一系系列列复复杂杂操操作作的的工工作作程程序序，包包括括种种菇菇选选择择、母母种种选选育育与与保保存存、菌菌种种制制备备、出出菇菇管管理理及及市市场场销销售售等等，每每个个程程序序都都有有至至关关重重要要的的细细节节操操作作。但但育育种种是是这这些些工工作作中中首首要要的的一一项项工工作作，没没有有优优良良的的菌菌种种，不不管管其其他他工工作作程程序序准准备备及及管管理理得多么好，都会造成减产或失败。得多么好，都会造成减产或失败。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性
23、，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程育种的首选目标育种的首选目标高产高产优质优质抗逆性强抗逆性强具有广泛的适应性具有广泛的适应性一些特殊的育种目标一些特殊的育种目标病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程一、引种与选择育种一、引种与选择育种（一）引种（一）引种 引种应遵照以下原则和程序进行：引种应遵照以下原则和程序进行：了解供种单位了解供种单位了解品种了解品种了解拟引进品种的生物学特性和栽培要点了解拟引进品种的生物学特性和栽培要点先试种再扩大先试种再扩大品种配套品种配套病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体
24、内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程（二）选择育种（二）选择育种 选选择择育育种种是是最最古古老老、最最简简便便、应应用用最最广广的的选选种种方方法法。它它是是先先分分离离和和收收集集各各地地的的有有关关菌菌株株，然然后后通通过过生生产产试试验验比比较较各各菌菌株株的的生生产产性性能能，选选留留最最优优者者。不不断断淘淘汰汰劣劣等等菌菌株株，选选留留优优秀秀菌菌株株，就就能能使使生产丰收，质量稳定。生产丰收，质量稳定。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程 食用菌自然选育的基本流程：食用菌自
25、然选育的基本流程：收集品种资源收集品种资源生理性能测定生理性能测定品种比较试验品种比较试验扩大、示范推广扩大、示范推广病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程食用菌选择育种的重点是进行不同菌株间的选择。食用菌选择育种的重点是进行不同菌株间的选择。人工选择育种不能改变个体的基因型，只是积累人工选择育种不能改变个体的基因型，只是积累和利用自然条件下发生的有益变异，使其向着人和利用自然条件下发生的有益变异，使其向着人们希望的方向积累，形成新的品种。们希望的方向积累，形成新的品种。具体步骤如下：具体步骤如下：1 1、资源的收集与采集
26、、资源的收集与采集 不不同同菌菌株株采采集集地地点点的的地地理理条条件件应应有有明明显显的的差差别别，采采集集野野生生标标本本时时，还还应应注注意意两两个个采采集集点点之之间间尽尽量量远远一一些些，同同时时采采集集不不同同地形、坡度、坡向的野生标本。地形、坡度、坡向的野生标本。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程 菌菌 种种 分分 离离孢子分离法孢子分离法 组织分离法组织分离法 菇木分离法菇木分离法 孢子弹射分离法孢子弹射分离法 整菇插种法整菇插种法 钩悬法钩悬法 贴附法贴附法 菌褶上涂抹法菌褶上涂抹法 孢子印分离法孢子
27、印分离法 单孢子分离法单孢子分离法 2 2、获取菌种、获取菌种平板稀释法平板稀释法 连续稀释法连续稀释法 子实体组织分离法子实体组织分离法 菌核组织分离法菌核组织分离法 菌索分离法菌索分离法 病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程(1)(1)(1)(1)孢子分离法孢子分离法孢子分离法孢子分离法 在无菌操作条件下在无菌操作条件下利用食用菌的有性孢子或无性利用食用菌的有性孢子或无性孢子孢子在适宜的培养基上萌发在适宜的培养基上萌发成菌丝体成菌丝体，而获得纯菌种，而获得纯菌种的方法称为的方法称为 孢子分离法孢子分离法。特特 点点
28、菌丝菌龄短，因是有性繁菌丝菌龄短，因是有性繁殖产物，其菌丝生命力强。殖产物，其菌丝生命力强。侵染病毒的菌类可用孢侵染病毒的菌类可用孢子分离法脱毒。子分离法脱毒。这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有差异，且自然分化现象较严重，变异大，差异，且自然分化现象较严重，变异大，差异，且自然分化现象较严重，变异大，差异，且自然分化现象较严重，变异大，需经出菇试验才能在生产上应用。需经出菇试验才能在生产上应用。需经出菇试验才能在生产上应用。需经出菇试验才能在生产上应用。孢子孢子孢子孢子分离法分为单孢分
29、离法和多孢分离法。分离法分为单孢分离法和多孢分离法。分离法分为单孢分离法和多孢分离法。分离法分为单孢分离法和多孢分离法。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程(2)(2)组织分离法组织分离法 组织分离组织分离法法 是利用子实体内部菌肉组织来获得菌是利用子实体内部菌肉组织来获得菌种的一种最简便的方法，是生产上常用的一种分离菌种的一种最简便的方法，是生产上常用的一种分离菌种的方法。种的方法。组织分离是一种无性繁殖过程，所得到的菌种是组织分离是一种无性繁殖过程，所得到的菌种是营养后代，后代不易变异，营养后代，后代不易变异，菌株可
30、保持原品种的优良菌株可保持原品种的优良品质品质。但如采用感染病毒的子实体进行组织分离时，。但如采用感染病毒的子实体进行组织分离时，常得到带病毒的菌丝体。常得到带病毒的菌丝体。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程子实体组织分离法子实体组织分离法子实体组织分离法子实体组织分离法 选择优良的种菇作为选择优良的种菇作为分离材料，用无菌水冲洗分离材料，用无菌水冲洗后，用后，用75%75%的酒精溶液表面的酒精溶液表面消毒。取消毒过的刀片从消毒。取消毒过的刀片从菌柄或菌盖中部纵切、撕菌柄或菌盖中部纵切、撕开，挑取菌盖与菌柄交界开，挑取
31、菌盖与菌柄交界处的一小块组织处的一小块组织(火柴头大火柴头大小小)，接种到，接种到PDAPDA培养基上培养基上3-53-5天后，接种块上产生白天后，接种块上产生白色绒毛状菌丝。色绒毛状菌丝。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程(3)(3)菇木分离法菇木分离法 利用菇木中菌丝的分利用菇木中菌丝的分离而获得纯菌种的方法。离而获得纯菌种的方法。这种方法污染较大这种方法污染较大 菇木分离法菇木分离法菇木分离法菇木分离法 能用孢能用孢子分离或子分离或组织分离组织分离的菌类，的菌类，一般不用一般不用这种方法。这种方法。在自然界，银耳
32、菌丝与香灰在自然界，银耳菌丝与香灰菌丝在一起才能产生银耳子实体，菌丝在一起才能产生银耳子实体，而用长有菌丝的段木来分离，能而用长有菌丝的段木来分离，能同时得到银耳菌丝及香灰菌丝，同时得到银耳菌丝及香灰菌丝，因此，生产上用的银耳菌种常采因此，生产上用的银耳菌种常采取菇木分离法，香菇、木耳等菌取菇木分离法，香菇、木耳等菌类也可采用菇木分离法类也可采用菇木分离法 病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程菇木的选择与菇木的选择与处理处理 分离时仅分离时仅需取需取1cm1cm厚的厚的一片或一块菇一片或一块菇木，一般选取木，一般选取菇木
33、的中间部菇木的中间部位，不取两端，位，不取两端，因两端裸露在因两端裸露在外，污染率高。外，污染率高。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程 菇菇 木木 分分 离离 法法病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程3 3、生物特性分析研究、生物特性分析研究 获获得得菌菌种种后后，对对不不同同样样本本菌菌株株的的生生物物学学特特性性进进行行试试验验研研究究，首首先先淘淘汰汰掉掉一一些些基基因因型型一一致致的的菌菌株株，保保留留不不一一致致的的菌菌株株。并并对对它
34、它们们进进行行对对温温度度、生生长长速速度度、生生长长势势、PHPH要要求求等等生生物物学学特特性性的的分分析和研究，进行劣汰。析和研究，进行劣汰。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程4 4、菌株出菇性能比较试验、菌株出菇性能比较试验 比比较较各各菌菌株株的的优优劣劣，详详细细记记录录各各菌菌株株的的产产量量、菇菇形形、温温性性、干干鲜鲜比比、始始菇菇期期、菇菇潮潮间间隔隔、形形态态等等。为为了了试试验验的的准准确确性性，要要保保证证菌菌种种的的质质量量，培培养养基基配配方方，接接种种，管管理理措措施施等等可可能能影影响
35、响结结果果的的因因素素，尽尽可可能使之一致。试验还应按生物统计原理进行安排。能使之一致。试验还应按生物统计原理进行安排。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程5、扩大栽培试验、扩大栽培试验 上述的品种评比结果仅是个阶段性的成果，还上述的品种评比结果仅是个阶段性的成果，还应和当地的当家菌株同时进行栽培，证实它是更优应和当地的当家菌株同时进行栽培，证实它是更优良的菌株。良的菌株。6、示范推广试验、示范推广试验 经经扩扩大大试试验验后后，将将选选出出的的优优良良品品种种放放到到有有代代表表性性的的试试验验点点进进行行示示范范性性
36、生生产产，待待试试验验结结果果进进一一步步确定之后，再由点到面推广。确定之后，再由点到面推广。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程二、诱变育种二、诱变育种 诱变育种是利用物理或化学因子处理食用诱变育种是利用物理或化学因子处理食用菌的细胞群，促使其细胞中的遗传物质的分子菌的细胞群，促使其细胞中的遗传物质的分子结构发生改变，从而引起其遗传性变异，然后结构发生改变，从而引起其遗传性变异，然后从变异的细胞中筛选出少数具有优良新性状变从变异的细胞中筛选出少数具有优良新性状变异的菌株。异的菌株。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏
37、机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程1、诱变因素、诱变因素p碱基的类似物，常用的有碱基的类似物，常用的有5-5-溴尿嘧啶（溴尿嘧啶（BUBU）p碱基化学修饰物碱基化学修饰物u亚硝酸引起的氧化脱氨反应亚硝酸引起的氧化脱氨反应u羟胺的致突变作用羟胺的致突变作用u烷化剂的致突变作用，常见的有烷化剂的致突变作用，常见的有EMSEMS、NTGNTG、EESEES和芥子气和芥子气诱变因素分物理因素和化学因素两大类诱变因素分物理因素和化学因素两大类化学因素（诱变剂）：化学因素（诱变剂）：病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引
38、起不同程度的病理生理过程p嵌合剂和移码突变嵌合剂和移码突变 常用的嵌合剂有吖啶橙、二氨基吖啶和吖啶黄常用的嵌合剂有吖啶橙、二氨基吖啶和吖啶黄素等。素等。p物理因素：辐射诱变物理因素：辐射诱变u紫外线（紫外线（UVUV）、X X射线、射线、射线、射线、射线、射线、射线、中子射线、超声波、激光射线、中子射线、超声波、激光u卫星和宇宙飞船搭载，利用超真空、超低卫星和宇宙飞船搭载，利用超真空、超低重力的作用，进行诱变育种。重力的作用，进行诱变育种。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程2、诱变对象、诱变对象是单细胞或细胞少的菌丝片
39、段，并呈均匀的悬浮是单细胞或细胞少的菌丝片段，并呈均匀的悬浮状态。这有利于均匀地与诱变剂接触。状态。这有利于均匀地与诱变剂接触。诱变的细胞应处于生理活动期。稍加萌发的孢子诱变的细胞应处于生理活动期。稍加萌发的孢子比休眠状态的孢子对诱变剂的敏感增强数倍，诱比休眠状态的孢子对诱变剂的敏感增强数倍，诱变效果好。变效果好。被处理的细胞最好是单核的。细胞内有两个核时，被处理的细胞最好是单核的。细胞内有两个核时，两核内的遗传物质对诱变剂的反应可能不同，在两核内的遗传物质对诱变剂的反应可能不同，在其后代会出现不纯的菌落。其后代会出现不纯的菌落。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且
40、在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程 诱变的处理诱变的处理 育种工作中常用杀菌率来表示各种诱变剂的相对剂育种工作中常用杀菌率来表示各种诱变剂的相对剂量。诱变率随剂量的增高而增高，但并不是越高越好。量。诱变率随剂量的增高而增高，但并不是越高越好。u物理诱变物理诱变 实验室普遍使用的是紫外线。步骤如下：在诱变实验室普遍使用的是紫外线。步骤如下：在诱变箱中装箱中装15W15W的紫外灯管的紫外灯管 先预热先预热20min 20min 将将5mL5mL孢子孢子悬浮液移入直径悬浮液移入直径6cm6cm的培养皿或的培养皿或10-12mL10-12mL孢子悬浮液移孢子悬浮液移入直径入直径9cm9cm
41、的培养皿中的培养皿中 打开盖在距离紫外灯管打开盖在距离紫外灯管30cm30cm处照射处照射0.5-5min 0.5-5min 处理后可直接稀释涂平板处理后可直接稀释涂平板增殖培养时必须用黑纸包住三角瓶。增殖培养时必须用黑纸包住三角瓶。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程3 3、挑选突变株挑选突变株 诱诱变变后后的的孢孢子子培培养养长长出出菌菌落落后后应应及及时时挑挑选选菌菌落落。同同宗宗结结合合的的菌菌株株选选择择发发育育健健全全的的单单个个菌菌落落。异异宗宗结结合合的的选选择择两两个个可可亲亲和和的的单单核核菌菌落落配
42、配对。最后进行栽培实验，比较生产性能。对。最后进行栽培实验，比较生产性能。选选出出的的菌菌株株中中，发发生生突突变变的的仅仅占占少少数数。而而产产生生显显著著 高高产产优优质质正正向向突突变变的的菌菌株株更更是是极极少少数数。因因此此，诱诱变变育育种种中中，初初筛筛的的菌菌株株不不可可过过少少，通通常常选选择择100-1000100-1000个个菌菌株株，并并设设置置重重复复，以以确确保保实验的可靠性。实验的可靠性。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程三、杂交育种技术三、杂交育种技术 食、药用菌的杂交是指不同种或种内不同
43、食、药用菌的杂交是指不同种或种内不同株系之间的交配，后者则较为重要。株系之间的交配，后者则较为重要。杂交育种的原理：杂交育种的原理：病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程l1.1.亲本的选择亲本的选择双亲本都要有突出的优点双亲本都要有突出的优点 亲本之间要有较大的遗传差异亲本之间要有较大的遗传差异 杂交亲本应具有较好的配合力杂交亲本应具有较好的配合力l2.2.杂交的方式主要有两种方式：杂交的方式主要有两种方式：单核菌丝和单核菌丝交配单核菌丝和单核菌丝交配 单核菌丝和双核菌丝交配单核菌丝和双核菌丝交配（一）杂交育种的基本原则
44、一）杂交育种的基本原则病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程（二）杂交育种的方法（二）杂交育种的方法杂交育种的一般程序为：杂交育种的一般程序为：选择亲本选择亲本 单孢分离单孢分离 杂交配对杂交配对 转管繁殖转管繁殖 初筛初筛 复筛复筛 试验试验 示范推广。示范推广。1.1.单孢分离单孢分离 玻片稀释分离法玻片稀释分离法平板稀释分离法平板稀释分离法显微操作器分离法显微操作器分离法病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程l单单单杂交单杂交 在在培培养养皿皿的
45、的平平板板培培养养基基上上接接入入两两个个杂杂交交亲亲本本的的距距离离为为2.5-3cm,2.5-3cm,适适温温培培养养后后，当当两两单单孢孢菌菌丝丝接接触触后后，如如出出现现双双核核菌菌丝丝，即即可可挑挑取取少少量量双双核核菌菌丝丝至至斜斜面面培养基上培养。培养基上培养。2.2.杂交杂交病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程l单单双杂交双杂交 以以香香菇菇为为例例，在在平平板板培培养养基基上上接接种种一一小小块块单单核核菌菌丝丝体体，2525培培养养1010天天后后，在在单单核核菌菌落落边边缘缘1cm1cm处处接接种种
46、一一小小块块双双核核菌菌丝丝体体，继继续续培培养养，当当单单双双核核菌菌落落交交接接时时，挑挑取取小小块块菌菌落落镜镜检检，如如发发现现双双核核化化，即即可可挑挑取取少少量量菌菌丝丝至至斜斜面面培培养养基基上上培培养养。（单单核核菌丝与双核菌丝其中的一个核融合）菌丝与双核菌丝其中的一个核融合）病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程四极性的异宗结合的食用菌，由于自交不育，经四极性的异宗结合的食用菌，由于自交不育，经配对后，凡出现双核菌丝的组合，并能正常结实配对后，凡出现双核菌丝的组合，并能正常结实者，即证明杂交成功。者，即证
47、明杂交成功。次级同宗结合食用菌（如双孢蘑菇），首先经过次级同宗结合食用菌（如双孢蘑菇），首先经过单孢子分离、培养，获取不孕菌丝。随后进行不单孢子分离、培养，获取不孕菌丝。随后进行不孕性菌丝间的配对。孕性菌丝间的配对。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程4.4.初次筛选初次筛选 经过初步筛选，淘汰大部分表现一般的菌株。经过初步筛选，淘汰大部分表现一般的菌株。经初筛后再做出菇试验比较，选出优良菌株。经初筛后再做出菇试验比较，选出优良菌株。将可亲和的组合移入新的斜面保存备用。将可亲和的组合移入新的斜面保存备用。3.3.转管繁殖
48、转管繁殖病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程5.5.复筛复筛通过栽培比较，选出少数性能优良的菌株。通过栽培比较，选出少数性能优良的菌株。出菇鉴定包括如下几个方面：出菇鉴定包括如下几个方面：菌丝生长速度；菌丝生长速度；出菇菌块（袋）的表型特征；出菇菌块（袋）的表型特征；子实体表型特征；子实体表型特征；测定其最适生长温度、湿度等；测定其最适生长温度、湿度等；计算子实体的产量。计算子实体的产量。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程6.6.小面积栽培试验：
49、小面积栽培试验：将复筛菌株置于不同地域的栽培区进行栽培，将复筛菌株置于不同地域的栽培区进行栽培，以考察其适应性与性状的稳定性，并做相关的以考察其适应性与性状的稳定性，并做相关的详细记录。详细记录。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程7.7.大面各示范推广：大面各示范推广：逐步扩大栽培面积，进行示范性的推广，将种逐步扩大栽培面积，进行示范性的推广，将种性优良、优质高产的菌株逐渐定为当家菌株。性优良、优质高产的菌株逐渐定为当家菌株。8.8.为确定保留下来的杂交新品种正式定名，并申为确定保留下来的杂交新品种正式定名，并申请有关
50、部门批准。请有关部门批准。病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程四、生物技术在食用菌良种选育中的应用四、生物技术在食用菌良种选育中的应用（一）原生质体融合技术一）原生质体融合技术p 原理原理u细细胞胞壁壁是是保保护护细细胞胞质质和和各各种种细细胞胞器器的的一一层层坚坚实实外外壁壁，能能有有效效防防止止外外源源基基因因的的侵侵染染。同同一一种种类类的的个个体体，细细胞胞壁壁可可以以自自融融，使使其其原原生生质质和和细细胞胞核核进进行行内内部部交交换换，从从而而引引起起种内近亲遗传性的变异。种内近亲遗传性的变异。病原体侵入机体