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1、在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确第12章 反应分离技术(离子交换离子交换 免疫亲和免疫亲和)在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确反应分离技术：将化学反应与物理分离过程一体化，反应分离技术：将化学反应与物理分离过程一体化，反应分离技术：将化学反应与物理分离过程一体化，反应分离技术：将化学反应与物理分离过程一体化，使反应与分离操作在同一设备中完成。使反应与分离操作在同一设备中完成。使反应与分离操作在同一设备中完成。使反应与分离操作在同一设备中完成。反应
2、分离操作：利用反应体的分离和不利用反应体反应分离操作：利用反应体的分离和不利用反应体反应分离操作：利用反应体的分离和不利用反应体反应分离操作：利用反应体的分离和不利用反应体的分离。的分离。的分离。的分离。反应体：再生型反应体、一次性反应体和生物体反反应体：再生型反应体、一次性反应体和生物体反反应体：再生型反应体、一次性反应体和生物体反反应体：再生型反应体、一次性反应体和生物体反应体应体应体应体在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确离子交换离子交换免疫亲和反应免疫亲和反应在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题
3、的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确一一.离子交换技术离子交换技术概念概念 离子交换法是应用合成的离子交换剂作为吸附剂，离子交换法是应用合成的离子交换剂作为吸附剂，离子交换法是应用合成的离子交换剂作为吸附剂，离子交换法是应用合成的离子交换剂作为吸附剂，将溶液中的物质，依靠库仑力吸附在交换剂上，然将溶液中的物质，依靠库仑力吸附在交换剂上，然将溶液中的物质，依靠库仑力吸附在交换剂上，然将溶液中的物质，依靠库仑力吸附在交换剂上，然后用合适的洗脱剂将吸附物质从交换剂上洗脱下来，后用合适的洗脱剂将吸附物质从交换剂上洗脱下来，后用合适的洗脱剂将吸附物质从交换剂上洗脱下来，后用合适的洗脱剂将
4、吸附物质从交换剂上洗脱下来，达到分离、浓缩、提纯的目的。达到分离、浓缩、提纯的目的。达到分离、浓缩、提纯的目的。达到分离、浓缩、提纯的目的。生物工业中最常用的交换剂为生物工业中最常用的交换剂为生物工业中最常用的交换剂为生物工业中最常用的交换剂为离子交换树脂离子交换树脂离子交换树脂离子交换树脂。几乎所有的生物大分子都是极性的，都可使其带几乎所有的生物大分子都是极性的，都可使其带几乎所有的生物大分子都是极性的，都可使其带几乎所有的生物大分子都是极性的，都可使其带电，所以离子交换法已广泛用于生物大分子的分离电，所以离子交换法已广泛用于生物大分子的分离电，所以离子交换法已广泛用于生物大分子的分离电，所
5、以离子交换法已广泛用于生物大分子的分离纯化。纯化。纯化。纯化。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确离子交换树脂的结构组成离子交换树脂的结构组成a a:交联的具有三维空间立体结构的网络骨架，交联的具有三维空间立体结构的网络骨架，通常不溶于酸、碱和有机溶媒，化学稳定性通常不溶于酸、碱和有机溶媒，化学稳定性良好；良好；b b:联接在骨架上的功能基（活性基）及可交联接在骨架上的功能基（活性基）及可交换离子。换离子。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（一）、离
6、子交换树脂分类（一）、离子交换树脂分类按活性基团分类按活性基团分类:阳离子交换树脂阳离子交换树脂阳离子交换树脂阳离子交换树脂(cation exchange)(cation exchange)(cation exchange)(cation exchange)（含酸性基团），（含酸性基团），（含酸性基团），（含酸性基团），对阳离子具有交换能力；对阳离子具有交换能力；对阳离子具有交换能力；对阳离子具有交换能力；阴离子交换树脂阴离子交换树脂阴离子交换树脂阴离子交换树脂(anion exchange)(anion exchange)(anion exchange)(anion exchange)（含
7、碱性基团），（含碱性基团），（含碱性基团），（含碱性基团），对阴离子具有交换能力对阴离子具有交换能力对阴离子具有交换能力对阴离子具有交换能力；具体又可以分为：强阳、弱阳、强阴、弱阴。具体又可以分为：强阳、弱阳、强阴、弱阴。具体又可以分为：强阳、弱阳、强阴、弱阴。具体又可以分为：强阳、弱阳、强阴、弱阴。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确根据离子交换剂的树脂材料分：以苯乙烯和二乙烯苯共聚而成的合成树脂以苯乙烯和二乙烯苯共聚而成的合成树脂聚苯乙烯聚苯乙烯树脂树脂为基质的离子交换树脂；为基质的离子交换树脂；多糖类骨架多糖类骨架的
8、离子交换树脂。的离子交换树脂。离子交换树脂分类在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确常用的离子交换树脂常用的离子交换树脂强酸性阳离子交换树脂强酸性阳离子交换树脂强酸性阳离子交换树脂强酸性阳离子交换树脂：活性基团是：活性基团是：活性基团是：活性基团是-SOSOSOSO3 3 3 3H H H H（磺酸基）磺酸基）磺酸基）磺酸基）和和和和-CHCHCHCH2 2 2 2SOSOSOSO3 3 3 3H H H H（次甲基磺酸基）；次甲基磺酸基）；次甲基磺酸基）；次甲基磺酸基）；弱酸性阳离子交换树脂弱酸性阳离子交换树脂弱酸性阳离子
9、交换树脂弱酸性阳离子交换树脂：活性基团有：活性基团有：活性基团有：活性基团有-COOH,COOH,COOH,COOH,C C C C6 6 6 6H H H H5 5 5 5OHOHOHOH等弱酸性基团；等弱酸性基团；等弱酸性基团；等弱酸性基团；强碱性阴离子交换树脂强碱性阴离子交换树脂强碱性阴离子交换树脂强碱性阴离子交换树脂：活性基团为季铵基团，如：活性基团为季铵基团，如：活性基团为季铵基团，如：活性基团为季铵基团，如三甲胺基或二甲基三甲胺基或二甲基三甲胺基或二甲基三甲胺基或二甲基-羟基乙基胺基；羟基乙基胺基；羟基乙基胺基；羟基乙基胺基；弱碱性阴离子交换树脂弱碱性阴离子交换树脂弱碱性阴离子交换
10、树脂弱碱性阴离子交换树脂：活性基团为伯胺或仲胺，：活性基团为伯胺或仲胺，：活性基团为伯胺或仲胺，：活性基团为伯胺或仲胺，碱性较弱；碱性较弱；碱性较弱；碱性较弱；在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（二）离子交换过程（二）离子交换过程装载树脂及平衡装载树脂及平衡;吸附样品吸附样品;样品淋洗样品淋洗(解吸、分离解吸、分离)树脂再生。树脂再生。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确离子交换分离的一般流程离子交换分离的一般流程 （1 1 1 1）原料液的预处理）
11、原料液的预处理）原料液的预处理）原料液的预处理(离子化离子化离子化离子化)，使得流动相易于被，使得流动相易于被，使得流动相易于被，使得流动相易于被吸附剂吸附；吸附剂吸附；吸附剂吸附；吸附剂吸附；（2 2 2 2）装载，上样，使原料液和离子交换树脂的充分）装载，上样，使原料液和离子交换树脂的充分）装载，上样，使原料液和离子交换树脂的充分）装载，上样，使原料液和离子交换树脂的充分接触，以利于吸附进行；接触，以利于吸附进行；接触，以利于吸附进行；接触，以利于吸附进行；（3 3 3 3）淋洗离子交换树脂，以去除杂质；）淋洗离子交换树脂，以去除杂质；）淋洗离子交换树脂，以去除杂质；）淋洗离子交换树脂，以
12、去除杂质；（4 4 4 4）把离子交换树脂上的有用物质解吸并洗脱下来；）把离子交换树脂上的有用物质解吸并洗脱下来；）把离子交换树脂上的有用物质解吸并洗脱下来；）把离子交换树脂上的有用物质解吸并洗脱下来；（5 5 5 5）离子交换树脂的再生。）离子交换树脂的再生。）离子交换树脂的再生。）离子交换树脂的再生。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确离子交换机理及选择性离子交换机理及选择性待分离的待分离的A A+自溶液中扩散到树脂表面；自溶液中扩散到树脂表面；A A+从树脂表面进入树脂内部的活性中心；从树脂表面进入树脂内部的活性中心
13、；A A+与与RBRB在活性中心上发生复分解反应；在活性中心上发生复分解反应；解吸附离子解吸附离子B B+自树脂内部扩散至树脂表面；自树脂内部扩散至树脂表面；B B+离子从树脂表面扩散到溶液中；离子从树脂表面扩散到溶液中；交换速度的控制步骤是扩散速度，由离子进交换速度的控制步骤是扩散速度，由离子进入树脂入树脂内部的扩散（膜扩散）和在树脂内部内部的扩散（膜扩散）和在树脂内部的扩散（粒扩散）的扩散（粒扩散）控制。控制。A A+RB RARB RAB B+离子交换机理：在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确离子交换的选择性是分离纯
14、化的基础离子交换的选择性是分离纯化的基础当溶液中同时存在着很多种离子时，树脂对离子有选择吸附当溶液中同时存在着很多种离子时，树脂对离子有选择吸附当溶液中同时存在着很多种离子时，树脂对离子有选择吸附当溶液中同时存在着很多种离子时，树脂对离子有选择吸附作用。作用。作用。作用。一般来说，一般来说，一般来说，一般来说，离子和树脂间亲和力越大离子和树脂间亲和力越大离子和树脂间亲和力越大离子和树脂间亲和力越大，就越容易吸附；，就越容易吸附；，就越容易吸附；，就越容易吸附；对无机离子，离子的化合价越高对无机离子，离子的化合价越高对无机离子，离子的化合价越高对无机离子，离子的化合价越高，就越容易被吸附；，就越
15、容易被吸附；，就越容易被吸附；，就越容易被吸附；离子交换反应受溶液的离子交换反应受溶液的离子交换反应受溶液的离子交换反应受溶液的pHpHpHpH影响很大。影响很大。影响很大。影响很大。对强酸、强碱树脂来说，对强酸、强碱树脂来说，对强酸、强碱树脂来说，对强酸、强碱树脂来说，任何任何任何任何pHpHpHpH下都可进行交换反应，而弱酸、弱碱树脂的交换反应下都可进行交换反应，而弱酸、弱碱树脂的交换反应下都可进行交换反应，而弱酸、弱碱树脂的交换反应下都可进行交换反应，而弱酸、弱碱树脂的交换反应则分别在偏碱性、偏酸性或中性溶液中进行；则分别在偏碱性、偏酸性或中性溶液中进行；则分别在偏碱性、偏酸性或中性溶液
16、中进行；则分别在偏碱性、偏酸性或中性溶液中进行；离子交换树脂在水和非水体系中的行为是不同的。离子交换树脂在水和非水体系中的行为是不同的。离子交换树脂在水和非水体系中的行为是不同的。离子交换树脂在水和非水体系中的行为是不同的。有机溶剂有机溶剂有机溶剂有机溶剂的存在会使树脂脱水收缩，结构紧密，降低吸附有机离子的的存在会使树脂脱水收缩，结构紧密，降低吸附有机离子的的存在会使树脂脱水收缩，结构紧密，降低吸附有机离子的的存在会使树脂脱水收缩，结构紧密，降低吸附有机离子的能力，而相对提高吸附无机离子的能力。能力，而相对提高吸附无机离子的能力。能力，而相对提高吸附无机离子的能力。能力，而相对提高吸附无机离子
17、的能力。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确离子交换纯化策略离子交换纯化策略对生物大分子进行分离纯化，可采用两种方式：对生物大分子进行分离纯化，可采用两种方式：对生物大分子进行分离纯化，可采用两种方式：对生物大分子进行分离纯化，可采用两种方式：正吸附：正吸附：正吸附：正吸附：将目标产物离子化，再交换到介质上，杂质不被吸将目标产物离子化，再交换到介质上，杂质不被吸将目标产物离子化，再交换到介质上，杂质不被吸将目标产物离子化，再交换到介质上，杂质不被吸附而从柱流出，称为正吸附。附而从柱流出，称为正吸附。附而从柱流出，称为正吸附
18、。附而从柱流出，称为正吸附。负吸附：负吸附：负吸附：负吸附：将杂质离子化后被交换，而目标产物不被交换直接将杂质离子化后被交换，而目标产物不被交换直接将杂质离子化后被交换，而目标产物不被交换直接将杂质离子化后被交换，而目标产物不被交换直接流出，这种方式称为负吸附。流出，这种方式称为负吸附。流出，这种方式称为负吸附。流出，这种方式称为负吸附。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确离子交换树脂在天然产物分离中的应用n n离子交换树脂用于生物碱的纯化n n离子交换树脂纯化氨基酸n n离子交换树脂对皂苷类产品的脱色精制 在整堂课的教学
19、中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确Immunoaffinity Chromatography Immunoaffinity Chromatography IACIAC一种将免疫反应与色谱分析方法相结合的分析方法。一种将免疫反应与色谱分析方法相结合的分析方法。高效、简便的样品前处理技术，大大简化了提取、净化、衍高效、简便的样品前处理技术，大大简化了提取、净化、衍生化等复杂的前处理过程，在食品分析中属于痕量检测，检生化等复杂的前处理过程，在食品分析中属于痕量检测，检测线非常低（达测线非常低（达10-12数量级）。数量级）。二二 免疫亲和色
20、谱免疫亲和色谱在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确概述概述生物分子能够区分结构和性质非常接近的其他分子，选择性生物分子能够区分结构和性质非常接近的其他分子，选择性地与其中某一种分子相结合，生物分子间的这种特异性相地与其中某一种分子相结合，生物分子间的这种特异性相互作用称为互作用称为亲和作用亲和作用。生物分子间的生物分子间的亲和识别亲和识别包括包括抗体抗体-抗原、酶抗原、酶-底物、激素底物、激素-受体受体等亲和作用。等亲和作用。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问
21、题也很明确1.1.离子强度：一般来说，提高离子强度，亲和作用减弱或完全破坏。离子强度：一般来说，提高离子强度，亲和作用减弱或完全破坏。2.2.pHpH：在适当的：在适当的p pHH下，亲和结合作用较高，在其它下，亲和结合作用较高，在其它p pHH下，亲和作用下，亲和作用减弱或完全破坏。减弱或完全破坏。3.3.抑制氢键形成的物质：脲和盐酸胍的存在可减弱亲和作用抑制氢键形成的物质：脲和盐酸胍的存在可减弱亲和作用4.4.温度：提高温度，静电作用、氢键、配位键减弱；但是，疏水性相温度：提高温度，静电作用、氢键、配位键减弱；但是，疏水性相互作用增强互作用增强5.5.液体离子：液体离子：SCNSCN-、I
22、 I-、CIOCIO4 4-的存在，疏水性相互作用减弱的存在，疏水性相互作用减弱6.6.螯合剂：影响配位键，使亲和作用消失螯合剂：影响配位键，使亲和作用消失影响亲和作用的因素在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确利用生物分子之间的专一性识别或特定的相互作用进行分离利用生物分子之间的专一性识别或特定的相互作用进行分离的技术为的技术为亲和分离技术亲和分离技术亲和配基亲和配基是对生物分子具有专一性识别或特定的相互作用的是对生物分子具有专一性识别或特定的相互作用的物质物质亲和色谱亲和色谱(Affinity Chromatograph
23、y(Affinity Chromatography，AC)AC)是利用生物大分子是利用生物大分子具有对一类生物大分子特异识别和可逆结合的特性而建立起具有对一类生物大分子特异识别和可逆结合的特性而建立起来的一种分离的色谱方法，也叫做生物亲和或生物特异性亲来的一种分离的色谱方法，也叫做生物亲和或生物特异性亲和色谱。和色谱。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确含配体溶液含配体溶液收集目的蛋白收集目的蛋白 洗下未结合的蛋白洗下未结合的蛋白混合蛋白混合蛋白样品样品平衡液平衡液带有配体的树带有配体的树脂珠或胶粒脂珠或胶粒在整堂课的教学
24、中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确免疫亲和色谱的原理 利用抗原与抗体的高亲和力、高专一性和可逆结合的特点以及色谱技术的差速迁移理论而建立的一种新型色谱技术。就是将被测物的特异性抗体固定在适当的固相载就是将被测物的特异性抗体固定在适当的固相载体上，制备成免疫亲和色谱的固定相（免疫亲和色体上，制备成免疫亲和色谱的固定相（免疫亲和色谱柱），根据被测物的反应原性、抗原抗体结合的谱柱），根据被测物的反应原性、抗原抗体结合的特异性记忆，抗原抗体复合物在一定条件下能够可特异性记忆，抗原抗体复合物在一定条件下能够可逆解离的特性进行色谱分离。逆解离的特
25、性进行色谱分离。利用免疫亲和色谱法，特别是以单抗为配基的免疫亲和利用免疫亲和色谱法，特别是以单抗为配基的免疫亲和色谱法是高度纯化蛋白质类生物大分子的有效手段色谱法是高度纯化蛋白质类生物大分子的有效手段。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确分离过程概述当含有待测物的样品粗提液经过免疫亲和柱时，粗提液中对抗体有特殊亲和力的待测物就会结合到抗体上，通过淋洗去除非目标分析物后，再采用适当的方法将结合在抗体的目标物洗脱下来，从而使被测物选择性的提取和浓缩。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，
26、由浅入深，所提出的问题也很明确免疫亲和色谱的特点选择性，专属性强选择性，专属性强 因为因为IACIAC是利用抗原抗体的特异性反应，所以只有与色谱固定相是利用抗原抗体的特异性反应，所以只有与色谱固定相抗原决定簇相吻合的被测物才能被结合。抗原决定簇相吻合的被测物才能被结合。可通过制备高纯度的抗体以及有多个活性位点的抗体来尽可能地提可通过制备高纯度的抗体以及有多个活性位点的抗体来尽可能地提高抗原的选择性和专属性。高抗原的选择性和专属性。纯化、浓集效果好纯化、浓集效果好 本方法灵敏度高，分析时间短，分析效率高。本方法灵敏度高，分析时间短，分析效率高。既可作为样品的制备技术，也可作为样品的分离手段，还可
27、用于样品的浓既可作为样品的制备技术，也可作为样品的分离手段，还可用于样品的浓缩纯化。缩纯化。可重复（再生）使用可重复（再生）使用 与传统的固相萃取技术相比，免疫亲和柱可在适当的缓冲液冲洗后再生与传统的固相萃取技术相比，免疫亲和柱可在适当的缓冲液冲洗后再生重复使用重复使用。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确免疫亲和色谱技术的要点n n抗体的制备抗体的制备n n抗体作为固定相的配体，直接影响目标测定物的特异性亲和力，抗体作为固定相的配体，直接影响目标测定物的特异性亲和力，是是IACIAC建立的关键因素建立的关键因素n n制成
28、制成IACIAC基体基体n n基体的基本要求基体的基本要求n n低效基体，不能在低效基体，不能在HPLCHPLC系统使用系统使用n n开发新型基体材料，高效能开发新型基体材料，高效能+机械稳定性，能在机械稳定性，能在HPLCHPLC系统使用系统使用n n抗体与基体的偶联抗体与基体的偶联n n活化活化n n偶联方式：随机偶联与定向偶联偶联方式：随机偶联与定向偶联n n洗脱方式洗脱方式n n冲洗液冲洗液n n洗脱液（酸性，碘化钠，有机改性剂，降低洗脱液（酸性，碘化钠，有机改性剂，降低K K）n n抗体再生抗体再生在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深
29、，所提出的问题也很明确单抗制备复杂，成本高，但也具有很多优点。单抗制备复杂，成本高，但也具有很多优点。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确单抗问世后单抗问世后,不少生物技术公司在研制适宜于培养杂不少生物技术公司在研制适宜于培养杂交瘤细胞的生物反应器及其培养基。这些大规模生交瘤细胞的生物反应器及其培养基。这些大规模生产单抗技术的建立和不断完善产单抗技术的建立和不断完善,将降低免疫亲和色谱将降低免疫亲和色谱吸附剂的价格。吸附剂的价格。随着新的合成基质和偶联化合物的出现以及对免疫随着新的合成基质和偶联化合物的出现以及对免疫亲和色
30、谱研究的深入亲和色谱研究的深入,必将使免疫亲和色谱在工业性必将使免疫亲和色谱在工业性生产纯化蛋白质的应用上逐渐得到发展。生产纯化蛋白质的应用上逐渐得到发展。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确免疫亲和色谱的应用模式n n非在线IAC模式n n在线IAC模式n n高效免疫亲和色谱柱的应用高效免疫亲和色谱柱的应用n n联用技术的应用联用技术的应用在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确免疫亲和技术制药领域的应用天然药物粗提物活性成分的筛选真菌毒素的检测 中药中的黄曲霉毒素中药中的黄曲霉毒素实际检测中常与HPLC、质谱、荧光分光方法联合使用在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确思考题n n在离子交换色谱操作中，怎样选择离子交在离子交换色谱操作中，怎样选择离子交换树脂？换树脂？n n离子交换分离的一般流程离子交换分离的一般流程n n举例说明离子交换树脂在天然产物分离中举例说明离子交换树脂在天然产物分离中的应用的应用n n免疫亲和色谱原理，特点，要点免疫亲和色谱原理，特点，要点