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1、ICS 65.020 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3087一2017化学农药家蚕慢性毒性试验准则Chemical pesticide-Guideline for silkworm chronic toxicity test 2017-06-12发布2017-10-01实施中华人民共和国农业部发布NY!T 3087-2017 前言本标月li按J!(lGB!T 1.1-2009给州的规则起草。请注意本文件的某些内容可能把p及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准向农业部利叶直业管理司提出并归口。本标准起1tI单位.农业部农药检定所、山东农业大学.本标准主要起
2、草人:张F挝、姜辉、王开运、乔康、赵旭、柳新菊、俞瑞鲜.I NY!T 3087-2017 化学农药家蚕慢性毒性试验准则范围本标准规定了化学农药对家蚕慢性毒性试验的材料、条件、方法、质量控制和试验报告的基本要求。本标准适用于为化学农药登记而进行咀斟陆i且试验，其他类型的农药可参!自使用。本标准不适用于2 规范性引用文件下列文件对件。凡是不注日期GB!T 31 注3.4 3.5 3.6 3.7 供试物试验中需要测试的物质。发育历期developmenlal duralion 家蚕从孵化到成为热蚕的时间，包括5个龄期，每一龄期为起蚕到IIr(蚕的时间。结茧率perccnlage of cocnmg
3、结茧家蚕数占饲养家蚕总数的百分率。注:结!1i以形成蓝jZ为准，只i吐浮丝或结平板AI个体不做结茧蚕统计。茧层蛊cocoon shcll weighl 家蚕所结茧茧层的重量。LOEC表示。的供试物浓1 NY/T 3087-2017 3.8 3.9 全茧量lolal cocoon weighl 茧层、蚓体和l蜕皮的总重量。茧层率percen tage or cocoon shell 茧层最占光茧全茧量的百分率。3.10 3.11 化蜗率percentage or pupation 化蜗家蚕数占结茧家蚕数的百分率。死笼率percentage or dead worm cocoon 死笼茧占结茧总数
4、的百分率。注:凡茧内的死蚕、死蝠、，1，病芮蚕、病蜗蜗和虱然t健tt哺且康I但米化踊的毛脚蚕均记为死笼茧.4 试验概述将不同浓度的药液喷于桑叶上以供蚕食用。以二龄起蚕饲11畏处理桑叶，48h后转至干净培养装置中并饲njJ!无毒桑叶至熟蚕剔，现tl定和I观察农药对家蚕产蓝蓝及部分生物学指标的影响，另一确定对家蚕茧层盘影响的无可观察效应浓度CNOEC)和最低可观察效应浓度CLOEC)。5 试验方法5.1 材料和条件5.1 1 供试生物试验用家蚕CBombyxn叩门)品系采用春佳1x tJ!珠。以二龄起蚕为供试生物。5.1 2 供试物农药原药或制剂。难浴于水的可用少量对家蚕毒性小的有机溶剂、乳化剂或
5、分散剂等JliJ浴。5.1 3 主要仪器设备一一喷雾设备(需喷5&均匀，可定量计算);-一人工气候室;一通风式昆虫毒性试验培养装)1C参见附录A);通风泵，分析天平(精确到0.0001g);移液器。5.1.4 试验条件5.1 4.1 温度l龄-2龄家蚕饲养的最适泪度应为(27:l:1)C，试验期间每增长一龄，最适混度应降低lC，直到上族结茧，I友中温度应为C24土1)C。5.1.4.2 湿度试验期间相对湿度应为70%-85%，族中相对湿度应为60%-75%。5 1.4.3 光照光照周期(光I暗比)应为16h8h，光J!自强度应为1000Ix-3 000 Ix。5.2 试验操作NY/T 3087
6、-2017 5.2 1 预试验5.2.1.1 浓度组设置参考家蚕急性毒性试验得LH的LCso值，以较大的问R设置4个5个浓度组，并设空白对!L1共讯、物使用溶剂Wl浴时，还铺设溶剂对照。对!l!组和11哥浓度处理组均设2个重复，每重复20头二龄起蚕。按照G/T 31270.11规定的试验方法获得LCso值，或按照附录B中规定的方法获得LCso值。当使用按照G/T31270.11方法得出的LCsoA才，须用桑叶浸渍修正系数对LCso进行修正后，方可用于本标准中试验浓度设定。修正系数默认值为O.l6 L/kg桑叶。5.2.1 2 染毒采用饲喂毒I叶法，选取桑树顶端新鲜有光泽的嫩叶，同次试验选取桑叶
7、大小和重量应尽量一致，每片叶重范阳为2.0 g3.0 g。采用I晓雾设备将试验药液啧于桑Iq的背面。喷药前称盘桑叶的重茧，ff虫药后立IJ再次稀量桑叶重量，以测定每片桑.1上!W!施供试物的准确盐。待桑IIJ.j(干后，将叶子的1柄插入装有10%琼JJ旨培养基的离心笆中，以保持l片新鲜，每个装置2片11.1 选择健康、大小一致的二龄起蚕，随机移入通风式昆虫毒性试验培养装置中的桑叶上。48 h后，将家蚕转移至干净饲养装置中J饲段无毒桑l至熟蚕期。待家蚕发育成熟后，及时捉蚕上放，整个试验饲养至结蓝、化蛇l为止。5.2.1 3 观察与记录试验过程中，观察并记录家蚕各龄期的发育历期、眠蚕体重及其他异常
8、行为。上放后第8d采茧削茧视tl定全茧蓝、茧层盘、蚓重，雌雄分别进行统计。5.2.1.4 数据处理以茧层盘为主要评价指标，采用方差分析对各个浓度处理组与对照组间的差异进行显著性分析，求出供试物对家蚕茧层量与对!有显著差异的最低浓度(LOECJ和l茧层量与对!百元显著差异的最高浓度(NOECJ。5.2 2 正式试验5 2 2 1 浓度组设置根据预试验确定的浓度范围按一定比例间距(几何级差应控制在3.2以内)设置5个7个浓度组，并设空白对照。供试物使用溶剂助溶时，还得设溶剂对照。对!自组和每浓度处理组均设3个重复，每重复20头二龄起蚕。5.2.2.2 染毒按5.2.1.2的规定进行。5.2.2.3
9、 观察与记录按5.2.1.3的规定进行。同时统计良蜗数茧，计算茧层率、死笼率和化蜗率。5.2.2.4 蚊据处理以茧层量为主要评价指标，采用方差分析对各个浓度处理组与对!m组间的差异进行显著性分析，最终获得供试物对家蚕茧层盘影响的NOEC和1LOEC，并获得供试物刘家蚕的发育历WJ、眠蚕体重、蜗重、茧层率、结茧率、化踊率、3E笼率等;生物学指标影H向情况。5.23 限度试验参考家蚕急性毒性试验得tfj的LC50值，设笠1/10LCso为上限浓度，进行限度试验。当限度试验证明供试物对家蚕茧层量影响的NOEC比限度试验浓度高，可判定供试物对家蚕茧层量无显著影响，则无需继续进行慢性毒性试验。限度试验中
10、，对!l组和处理组至少设置6个重复。5.3 质量控制质量控制条件包括.试验结束时，对照组死亡率不超过20%;3 NY/T 3087-2017 试验中所设宜的浓度中应至少包括与对照组有显著差异和无显著差异的浓度各1个。6 试验报告试验报告应至少包括F列内容.a)供试物的信息，包括.1)供试物的物理状态及相关西!化特性，包括通用名、化学名称、结构式、水浴血(，度等，2)化学鉴定数据(如CAS号)、纯度(杂质)。b)供试生物品系名称、来源、c)试验条件，何A括:1)试验期2)采用3)5)、结茧率、4)1)qGqA哇否降5)4 NY/T 3087-2017 附录A(资料性附录)通凤式昆虫毒性试验培养装
11、置破硝材质jffi风暴露装置(见图A.l)，直径20cm，高15cmo装置连接一个小型空气泵用来保证空气流通。试验时在装置的瓶底铺一层2mm4 mm的mJj旨，用以减缓桑n!萎帘的速度。2-一一一一一3 一-一一-一说IYJ一进气，2 玻璃益，3一一暴露装丘，D 片r单位为厘米15 5 20 4一-H_l气，5 处丑n桑111-0图A.l通凤式昆虫毒性试验培养装置示意图5 NY!T 3087-2017 附录Bl规范性附录)农药家蚕急性毒性试验一一愤雾法B.1 预试验B 11 浓度组设置以较大的问距设置4个5个浓度在，;j设空向对照。供试物使用溶剂助浴时，还能设浴剂对!m。对!自组和每浓度处理!
12、组均设2个重复，每重复20头二龄起蚕。B.12 染毒采用饲l吸毒叶法，选取桑树顶端新鲜有光泽的嫩l叶，同次试验选取桑11-大小和垂直t应尽:w:一致，每片11-亟范Eill为2.Og3.Og。采用IWt设备将试验药液I货于桑111的背面。l质药前称主i桑11的重:i1t，I贤药后立/l再次称盘桑11-重量，以现定每片桑11上l货施供试物的准确量。待桑11晾干后，将l叶子的111柄插入装有10%琼)J旨培养基的离心管巾，以保持11-片新鲜，每个装)13片叶。选择健康、大小一致的二龄起蚕，随机移入迎风式昆虫毒性试验培养装置中的桑11-上。染7E时间为96 h.B.1 3 症状观察与数据记录于药if
13、rj处理后24hA8 h、72 h和96h观察并记录家蚕中毒症状及死亡数。B.1.4 数据处理计):96 h各处理浓度对家蚕的死亡率，求出供试物对家蚕的最高全存活浓度和11孟低全致死浓度。B2 正式试验B 2.1 浓度组设置根据预试验rifo定的浓度范围按一定比例间距(几何级差应控制在2.2以内)设立5个7个浓度组，并设空白对!帽，供试物使用溶剂助浴l时，还馆设浴剂对!照。对!t!组和每浓度处型组均设3个重复，每个重复20头二龄起蚕。B.2.2 染毒按B.1.2的方法进行。B 2.3 症状观察与数据记录按B.1.3的要求进行。B 2.4 数据处理计1供试物对家蚕24hA8 h、72 h和96
14、h的LCso及其95%置信限.6 NY/T 3087-2017 参考文献 1 JXingyoll S.肌I-IaroldVan Der Valk,Hui Ji吨.et a,2012.DeveJopment of a standard acute dietary t。目Cllyt出1for the silkwonnCombyx mori L.)J.Crop Prolection(IZ):260-267 2J蔡ill基，1999.农药环境i1J;J1ll学研究MJ北京中国环搅科学Hl版社3J华德公，2002山东蚕桑M.北京。1:1:/网;ldv.ll.:版在l 4J张香萨，2008就桑养蚕新技术M
15、J郑州中JM农民:1:版在l5J可iI农业大学，1980养蚕学MJ.北京。r!，向农业11:版tl6JNY/T 1154.9-2008农药室内生物测定试验准则杀虫剂第9部分!l!法7 止日-h0的LFhz中华人民共和国农业行业标准化学农药家蚕慢性毒性试验准则NY/T 3087-2017 中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(/1111政编码100125 网址)北京印刷一厂印刷新华H店北京发行所发行各地新华书店经销拎，等奇峰提印张O.75 字数15千字2017年9月北京第1次印刷*2017年9月第l版书号。16109.1281定价18.00元，非开本880mmX1230mm1/16 版权专有侵权必究举报电话(010)65005894