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1、ICS 65.020.20 B 66 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3200一2018香蕉种苗繁育技术规程Technical code of practice for Cavendish banana seedling propagation 2018-03-15发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部发布NY/T 3200-2018 剧吕本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由农业部热带作物及制品标准化技术委员会归口。本标准起草单位:中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所、热作两院种苗组培中心。本标准主要起草人:魏守兴
2、、谢子四、魏军亚、黄丽娜、符运柳、韩丽娜、刘以道、草和业。I NY/T 3200-2018 香蕉种苗繁育技术规程1 范围本标准规定了香芽蕉CMusaAAA Cavendish sub-group)种苗繁育技术规程的术语和定义、种苗组培技术和种苗假植技术。本标准适用于香芽蕉种苗2 规范性引用文件下列文件对于本件。凡是不注日期的3.1 香蕉组培利用优假植标准的3.3 3.4 3.5 假植temporary 从香蕉组培苗移于诱导培养induction culture 外植体经过消毒后,接种至继代培养subculture 7中的某已达到在外植体初次培养基础上,把所获得不定芽转移到新鲜培养基中进行再培养
3、,从而使培养物得以成倍增殖的过程,又称增殖培养。3.6 培养代数culture times 同一外植体,经历继代培养的次数。3.7 生根培养rting culture 1 NY/T 3200-2018 把增殖芽转移到生根培养基中诱导生根,培养成组培苗的过程。3.8 变异variation 在组织培养过程中受培养基和培养条件等影响,培养出的香蕉植株遗传特性发生了明显变化,其形态上也显著表现出有别于原品种植株的特征。注:香蕉组培苗变异的主要特征表现为叶变细长,叶面不规则凹凸,叶片扭曲、失绿;叶柄变长;叶鞠散生呈散把;植株变矮等。4 种苗组培技术4.1 组培苗接种前的准备4.1.1 培养基配制4.1
4、.1.1 基本培养基母液配制香蕉组织培养所用MS培养基母液配制参见附录A。4.1.1.2 植物生长调节剂配制将香蕉培养所用植物激素6-BA用1mol/L HCl溶解,NAA用95%酒精溶解,根据需要配制成一定浓度的母液,装人容器,贴上标签后置于40C冰箱中保存。4.1.2 培养基配置根据不同培养阶段所需要的培养基类型,取出所需量母液等放人容器中,然后加人7g卡拉胶(或琼脂)和3%煎糖,用蒸馆水定容,加入相应的激素,搅拌均匀,用o.1 mol/L NaOH或HCl调节pH至5.8,然后分装到培养容器中,边搅拌边分装,每瓶或每袋分装量为25mL30 mL。4.1.3 培养基和其他用品灭菌将分装好的
5、培养基和接种用具等置于高压灭菌器内,采用高温高压蒸汽灭菌方法进行灭菌。4.2 外植体采集4.2.1 采芽母本园品种纯正、无病毒病株的香蕉园。4.2.2 种芽采集从母本园中选择健壮植株作为采芽母株,并做好标记。于晴朗天气,挖取优良母株健壮吸芽作为生产香蕉组培茵的外植体。4.3 外植体无菌处理将吸芽修成以生长点为中心、直径3cm4 cm、高4cm5 cm的组织块,自来水冲洗干净,75%酒精浸泡1min,然后修成直径1cm2 cm、长1cm3 cm的组织块,再用3%5%次氯酸铀消毒20 min30 min,元菌水清洗3次以上。4.4 外植体切割与接种将消毒好的组织块纵切为2块4块,接种到诱导培养基上
6、,并编好序号。4.5 外植体诱导及病毒检测诱导外植体于适宜的温度和环境中进行茎尖分生组织培养,将初次培养的分化芽用聚合酶链式反应技术CPCR)或酶联免疫吸附法CELISA)进行病毒检测。病毒检测方法按照NY/T2120的规定执行,经检测无病毒分化芽继续增殖培养。4.6 外植体继代培养经检测无病毒分化芽接种至继代培养基中,于适宜温度和环境中通过继代培养不断增殖,获得大量分化芽,继代培养次数不应超过10代,时间不应超过12个月,每代培养的时间在20d30 d。4.7 生根培养NY/T 3200-2018 将生长到一定高度的分化芽,转接到生根培养基中,于适宜的温度和环境中进行生根培养,分化芽应大小分
7、级,室内光照1500 lx3 000 lx,光照时间12h/d,温度(28:!:2).C,培养健壮组培苗。4.8 组培苗质量标准4.8.1 基本要求4.8.1.1 种源来源清楚、品种纯正、可靠。4.8.1.2 培养基及材料元真菌或细菌污染。4.8.1.3 根系白、粗,且有分叉侧根及根毛,具有长3cm以上的白色根2条以上。4.8.1.4 假茎黄绿色,基部不成钩状,叶销不散开。4.8.1.5 变异率2%。4.8.2 分级按照NY/T357的规定进行分级。5 种苗假植技术5.1 苗圃地选择交通方便,水源充足,排水良好,远离老蕉园,远离香蕉枯萎病疫区,周围元辣椒或茄子等茄科植物、瓜类等葫芦科植物以及豆
8、类等豆科植物。5.2 建圃清除杂草,平整土地,根据地形搭建荫棚。荫棚遮光度达到50%75%,防虫网40目 60目;如需御寒保温,则加盖塑料薄膜。5.3 营养土配制根据当地具体情况配制营养土,基质充分混匀后,平铺在1.5m宽的苗床上或装人育苗容器中。5.4 育苗窑器规格育苗容器选用10cmX10 cm或10cmX12 cm且具小孔的塑料育苗杯。5.5 炼苗把生根良好的组培苗直接置于元直射阳光且遮光度75%的荫棚下5d7 d,幼苗从嫩绿色转变为正常绿色。5.6 洗苗、消毒与分苗打开瓶盖或撕开袋口,轻轻将组培苗取出,浸泡于洗苗盆中,洗苗时可单株或多株搓洗根部,洗净根部培养基,然后放人0.1%0.3%
9、的代森钵溶液或其他高效低毒杀菌剂溶液中浸泡15s,再按大、中、小进行分苗。5.7 假植假植前1d2 d,消毒处理营养土,按大、中、小将幼苗分别分哇假植。5.8 管理5.8.1 保温保湿假植后,淋足定根水,加盖塑料薄膜小拱棚,7d内见干浇水,7d后揭去塑料薄膜,做好保温、保湿工作。5.8.2 施肥待小苗抽出第1片新叶后,可施磷酸二氢梆或氮磷饵(N:p:K=曰:15:15)复合肥等进行施肥管理,每周2次,浓度为0.1%,待小苗完全变绿后,营养液浓度可加大至O.2%0.3%。5.8.3 病虫害防治在营养土装袋前,苗床上施少量药剂防治地下害虫。假植后应经常检查植株的生长情况,每10d NYjT 320
10、0-2018 15 d结合施肥喷施杀虫杀菌剂等。注意要短时间通风排气,降低空气湿度,减少真菌病害的发生。5.8.4 变异株剔除假植后,及时剔除变异株。5.9 假植苗质量标准5.9.1 基本要求5.9.1.1 种源来源清楚、品种纯正、可靠。5.9.1.2 纯度二三98%。5.9.1.3 叶色青绿不徒长,叶5.9.1.4 5.9.1.5 4 NY/T 3200-2018 附录A(资料性附录)岛18培养基母液及培养基配制参考MS培养基母液及培养基配制参考见表A.l。表A.lMS培养基母液及培养基配制参考母液化学药品名称培养基配方用量扩大倍数扩大后称量母液定容体积配制培养基吸取量名称mg/L 倍mg
11、mL mL/L 硝酸御CKN)1900 50 95000 大量硝酸镀CN凡N)1650 50 82500 元素硫酸簇CMgSO.7H2Q)370 50 18500 1000 20 磷酸二氢仰CKH2PO.)170 50 8500 氯化钙ceaclz.2H2Q)440 50 22000 硫酸锺CMnSO.4H20)22.3 100 2230 硫酸镑CZnSO.7H20)8.6 100 860 微量棚酸(H3B)6.2 100 620 元素腆化御CKI)o.83 100 83 1000 10 铝酸纳CNa2MoO.2H2Q)0.25 100 25 硫酸铜CCuSO.5H20)0.025 100 2
12、.5 氯化钻CCoclz 6H20)0.025 100 2.5 铁盐乙一胶四乙酸一纳CNa2-EDTA)37.3 100 3730 1000 10 硫酸亚铁CFeSO.7H20)27.8 100 2780 甘氨酸2.0 50 100 有机维生素o.1 50 5 维生素民0.5 50 25 1000 10 物质烟酸0.5 50 25 肌醇100 50 5000 注1:诱导培养基为MS+6-BA 4 mg/Lo 注2:继代培养基为MS+6-BA 2 mg/L-3 mg/L+NAA o.01 mg/L。注3:生根培养基为MS+NAA o.05 mg/L-O.1 mg/L。注4:配置培养基时,先从母液
13、中取出所需量的大量元素、微量元素、铁盐、有机物质放入容器中,然后加入7g卡拉胶(或琼脂)和3%煎糖,用蒸馆水定容至1L,加入相应的激素,搅拌均匀,用O.1 mol/L NaOH和HCl调节pH至5.8。5 gON|OON的问问Z中华人民共和国农业行业标准香蕉种苗繁育技术规程NY/T 3200-2018*中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(邮政编码:100125网址:)北京印刷一厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销 9导争导印张O.75 字数15千字2018年5月北京第1次印刷争6开本880rnrnX1230rnrn 1/16 2018年5月第1版书号16109 4487 定价18.00元*版权专有侵权必究举报电话(010)65005894 NY/T 3200-2018