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1、第二节 细胞工程简介二 动物细胞工程动物细胞工程概述v动动物物细细胞胞工工程程动物细胞培养动物细胞培养 动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体制备应用单克隆抗体制备应用胚胎移植胚胎移植核核 移移 植植动物细胞培养基本概念v培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等维生素和动物血清等v原代培养：单个细胞原代培养：单个细胞 传至十代左右传至十代左右v传代培养：经原代培养的细胞传代培养：经原代培养的细胞 传传40到到50代。代。v细胞株：细胞株：10到到40、50代的细胞，遗传物质代的细胞，遗传物质没发生改变。没发生改变。v细胞系：超过细胞系：超过50
2、代的细胞，遗传物质发生代的细胞，遗传物质发生改变，可无限增殖。改变，可无限增殖。动物细胞培养过程胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源）胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源）单个细胞单个细胞原代细胞原代细胞细胞株细胞株细胞系细胞系剪碎胰蛋白酶剪碎胰蛋白酶分离细胞分离细胞洗涤、稀释、分离洗涤、稀释、分离原代培养原代培养传代培养传代培养（遗传物质没有发生改变）（遗传物质没有发生改变）（遗传物质发生改变）（遗传物质发生改变）动物细胞培养应用1.生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）2.检测有毒物质检测有毒物质
3、3.用于某些器官移植用于某些器官移植动物细胞融合仙台病毒丧失感染活性丧失感染活性（不感染细胞）（不感染细胞）保留融合活性保留融合活性（诱导细胞融合）（诱导细胞融合）紫外线紫外线物理法物理法化学法化学法生物法生物法融融合合过过程程示示意意图图单克隆抗体的概念v单单:单个细胞单个细胞v克隆克隆:无性繁殖无性繁殖v抗体抗体:化学性质单一、特异性强化学性质单一、特异性强v实验目的实验目的:制备单克隆抗体制备单克隆抗体.v实验原理：实验原理：B B淋巴细胞能产生抗体，骨髓淋巴细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。生抗体又能无限增殖。v
4、实验材料：小白鼠实验材料：小白鼠v实验器材：培养皿、针筒等等。实验器材：培养皿、针筒等等。v实验过程：如下页实验过程：如下页根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的勒设计的 实验方案实验方案:单单克克隆隆抗抗体体制制备备过过程程单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用v主要用于疾病的诊断、治疗和预防。与常规主要用于疾病的诊断、治疗和预防。与常规抗体相比，具有特异性强、灵敏度高的优点。抗体相比，具有特异性强、灵敏度高的优点。如；各种癌症、肝炎病毒、如；各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细病毒、细菌及血吸虫等数百种疾病的诊断；在疾病治菌及血吸虫等数百种疾病的诊断；在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士，能识别疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士，能识别“自己自己”与与“异己异己”，一旦发现，一旦发现 致病因素便致病因素便与之结合将其杀死。若在单抗上带上抗癌药与之结合将其杀死。若在单抗上带上抗癌药物制成物制成“生物导弹生物导弹”，将药物定向带到癌细，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。康细胞。中央电教馆资源中心中央电教馆资源中心2003.10