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1、第二节 细胞工程简介二 动物细胞工程,动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体胚胎移植核移植,动物细胞培养培养液,葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等,水、矿质元素、激素、蔗糖、氨基酸、琼脂等,植物组织培养基,一、动物细胞培养,1、过程：,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,胰蛋白酶,动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。,（分解弹性纤维）,10代细胞,传代培养,无限传代,遗传物质未改变,遗传物质改变,问题： 、比较动物细胞培养和植物组织培养,动物细胞培养与植物组织培养的比较,动物细胞培养应用,生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫苗、干扰素
2、、单克隆抗体、动物激素）检测有毒物质用于某些器官移植,例一：下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 （ D ） A.培养中的效应T细胞能产生单克隆抗体 B.培养中的B细胞能够无限地增殖 C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞,二、动物细胞融合1、过程：,物理法、化学法,灭活的病毒,2、用途：,制备单克隆抗体,融合过程示意图,三、单克隆抗体,1、概念:单：单个细胞克隆: 无性繁殖抗体: 化学性质单一、特异性强,2、单克隆抗体制备过程,2.特点： 特异性 强， 灵敏度 高。3.应用（1）理论意义（2）实践意义 单抗诊断盒； 生物导弹。,13,归纳总结 植物体
3、细胞杂交和单克隆抗体制备,14,例二、 用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列 实验步骤中错误的是 （ B ） A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋 巴细胞 B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C.用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞 群，培养后提取单克隆抗体,四、胚胎移植,实例：试管动物的产生试管婴儿应用：加快优良种畜的繁殖速度,五、核移植技术,实例：克隆羊多莉,18,例三,据图回答下列问题：,（1）过程是用纤维素酶和果胶酶 处理细胞的细胞壁，后经过程诱导原生质体融合，实际融合的过程中原生质体
4、可能会形成 3 种细胞团（只考虑两个细胞融合 的情况）。是细胞壁再生 的过程，与此过程密切相关 的细胞器是 高尔基体 。,19,（2）在过程培养中，除了提供水分、无机盐、糖类、 维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入 植物激素 。 同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程中必须保证 无菌 。（3）若番茄细胞内含A条染色体，马铃薯细胞内含B条染 色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育（假设 能成功）,得到的后代应含 （A+B）/2 条染色体，还必须用 秋水仙素 来处理幼苗，才能得到可育的番茄马铃薯植株，此时体细胞中含有 A+B 条染色体。（4）若番
5、茄是二倍体，马铃薯是四倍体，则杂种植株 六 倍体。,20,动物细胞培养和单克隆抗体的制备,例2,下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图，据图回答下列问题：,（1） 技术是进行单克隆抗体制备的基础。（2）根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于选择培养基。,21,（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性 是特异性强、灵敏度高 。（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用 的诱导剂外，还可以采用 灭活的病毒 。（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞在体外大量增殖的 特点，又具备淋巴细胞分泌特异性抗体的特点。（6）淋巴细胞是由动物体 骨髓 中的 造血干细胞 细 胞分化、发育而来的。（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要 方式是 主动运输 。,22,答案 (1)动物细胞培养（微生物培养） （2）选择（3）特异性强、灵敏度高 （4）灭活的病毒（5）在体外大量增殖 分泌特异性抗体（6）骨髓 造血干 （7）主动运输（主动吸收）,