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1、 细菌鉴定一。一。形态与培养特性形态与培养特性形态与染色形态与染色1 染色性染色性 革兰染色，抗酸染色等革兰染色，抗酸染色等2 形状，大小和排列（球菌，杆菌或螺形形状，大小和排列（球菌，杆菌或螺形 菌，单个，成双，成链，葡萄状等）菌，单个，成双，成链，葡萄状等）3 细菌的特性结构（芽孢大小及位置，鞭毛细菌的特性结构（芽孢大小及位置，鞭毛数目及位置等）数目及位置等）培养特性培养特性 1 营养要求营养要求 简单或复杂简单或复杂 2 生长速度生长速度 快或慢快或慢 3 气体环境气体环境 需氧，兼性厌氧或厌氧需氧，兼性厌氧或厌氧 4 适宜生长温度适宜生长温度 10，25，35-37，42，44 等等
2、菌落特征菌落特征 大小，表面，透明度，高度，边缘，光泽，大小，表面，透明度，高度，边缘，光泽，乳化，硬度，色素，气味，溶血性等。乳化，硬度，色素，气味，溶血性等。二。二。生化反应生化反应三。三。血清学试验血清学试验常见努卡菌种的鉴定试验 星形 鼻疽 新星 巴西 豚鼠酪蛋白 -+-次黄嘌呤 -+酪氨酸 -+-黄嘌呤 -+明胶液化 -+-45生长 +-+鼠李糖 -+-一些革兰阳性杆菌鉴定一。触酶试验阳性1。大菌落，菌体规则，大至中等，或成链状有时溶血-考虑芽孢杆菌属。2。菌落中等大小，溶血，菌体中至小-考虑产单核李斯特菌，痤疮杆菌，放线杆菌。3。不规则革兰阳性杆菌（1）菌落颜色：黄色-短杆菌属某些
3、菌，粉色-马红球菌橘红色至红色-努卡菌，红球菌属，短杆菌属某些菌。（2）较宽分枝：努卡菌，痤疮杆菌属，红球菌属，罗菌属，放线菌，快速生长分枝杆菌。（3）Y型分枝杆菌：放线菌，苏黎士菌属，厄菌属，痤疮杆菌属，马棒状杆菌，罗菌属。（4）非常圆，似球菌：C.aquaticum，厄菌属，皮肤杆菌，短杆菌属，红球菌属。（5）动力阳性：厄菌属，C.aquaticum，CDC群A3，A4，A5。（6）溶血：痤疮杆菌属，放线菌。（7）七叶苷/明胶：+/+厄菌属，C.aquaticum，CDC群A。+/-皮肤杆菌，CDC群3，5-？放线菌。（8）无以上特征的细菌a.菌落相对较大，不透明，通常白色或米黄色，有时棕
4、褐色或棕色：极小棒状杆菌，纹带棒状杆菌，干燥棒状杆菌，假白喉杆菌，某些白喉杆菌。b.小菌落，灰色，菌体呈球杆状或棒状，做尿素和蔗糖：杰棒状杆菌，解脲棒状杆，某些白喉杆菌。二。触酶阴性1。小或中等灰色菌落，可移动，有或无溶血，菌体可呈链状：丹毒丝菌，乳杆菌。2。小或中等菌落，小杆菌，H2S阳性：丹毒丝菌3。中或小菌落，不规则革兰阳性杆菌（1）Y型分枝，无明显连接点：Bifidobacterium（2）不规则细杆菌，有些有分枝，有些呈链状，溶血：溶血隐秘杆菌（明胶阴性）化脓隐秘杆菌（明胶阳性）（3）菌落无溶血，多形：放线菌，CDC2群。嗜血杆菌种间鉴定菌名菌名 X X因子因子 V V因子因子 马血
5、溶血马血溶血 乳糖乳糖 甘露糖甘露糖 触酶触酶 COCO2 2流感流感 +-+-+溶血溶血 +-+-+-杜克雷杜克雷 +-+-副流感副流感 -+-+-+-+D D D D副溶血副溶血 -+-+-+-副嗜沫副嗜沫 -+-+-+-+嗜沫嗜沫 -+-+-+奈瑟菌科不同属间的鉴别属名属名 形态形态 氧化酶氧化酶 触酶触酶 葡萄糖产酸葡萄糖产酸奈色球菌属奈色球菌属 双球状双球状 +V V布兰汉菌属布兰汉菌属 双球状双球状 +-+-金氏菌属金氏菌属 球杆状球杆状 +-+-+莫拉菌属莫拉菌属 杆状杆状 +-+-不动杆菌属常见种间的鉴定试验 菌名 醋酸钙 鲍曼 溶血 居尼 洛菲 41 0 100 0 90 0
6、44 0 100 0 0 0SBA溶血 0 0 100 0 0明胶水解 0 0 96 0 0精氨酸 100 98 96 95 0枸缘酸 100 100 91 82 0丙二酸 100 98 0 0 0 菌株 触酶 氧化酶 （阳性%）（阳性%）伴放线放线杆菌 99 19人心杆菌 1 100啮蚀艾肯菌 8 100金氏金氏菌 0 100 多杀巴斯德 98 96一些嗜二氧化碳杆菌鉴定试验 伴放线 狗咬CO2嗜纤维 人心 艾肯葡萄糖 99 93 100 0 乳糖 0 100 0 0 麦芽糖 95 95 100 0 蔗糖 0 0 98 0精氨酸 0 99 0 0触酶 99 100 1 8吲哚 0 0 100
7、 0 硝酸盐 100 0 0 99 鸟氨酸 0 0 0 98 李斯特菌属 产单核细胞李斯特菌革兰阳性小杆菌直或微弯，常呈V字形成对 排列，无芽胞，无荚膜。22-25度形成周鞭毛，有动力，37度动力阴性。在血平皿上形成较小，圆形，光滑而有狭窄 B溶血环的菌落，在液体培养基中呈均匀浑 浊 生长。在半固体培养基中，动力自穿刺 线向四周蔓延生长，呈倒伞状。丹毒丝菌属 红斑毒丝菌属 革兰阳性杆菌，菌体细长，长短不一，有时 呈长丝形，与放线菌相似，易被脱色而呈革 兰阴性杆菌，其间夹着革兰阳性颗粒。血平皿上，光滑型菌落小，圆而凸起，有光 泽。粗糙型菌落较大，表面呈颗粒状，周围 有轻微的溶血，延长培养时间则溶
8、血更明显。红球菌属 马红球菌革兰阳性卵圆形短杆菌，无芽胞，无鞭毛。血平皿上，菌落呈橙红色，表面光滑，湿润 边缘整齐，48小时后色素更明显，菌落增大。不常见需氧革兰阳性球菌某些特性像链球菌 触酶 形态 Abiotrophia -c,cb,rods格鲁比卡菌 -cb,pr,ch乳球菌 -cb,pr,ch明串珠菌 -cb,pr,ch像葡萄球菌 触酶 形态Aerococcus -/w c,pr,tet,cl差异球菌 +cb,pr,tet孪生球菌 -c,pr,ch,cl创伤球菌 -c,pr,ch,cl微球菌 +c,cl,tet平面球菌 -c,pr,tet,clStomatococcus-/+/w c,p
9、r,cl平面球菌的鉴定W1K7114 C727084 49 腹水1.革兰阳性球菌，兼性需氧，单个，成对，四联或呈葡萄状，草绿色溶血。2.万古霉素耐药，LAP阳性，PYR阴性，七叶 树苷阳性，多盐不生长，精氨酸阴性，BD BBLCRYSTALTM编码2716000442 ID=99.57%Pediococcus。3.通常对泰能，庆大，氯霉素，青霉素敏感，替考拉宁耐药。大多数常见共栖菌及部位部位 菌名呼吸道 需氧菌需氧菌 化脓性链球菌及其他化脓性链球菌及其他 溶血链球菌溶血链球菌 肺炎链球菌，金葡，肺炎链球菌，金葡，CNSCNS，柰色球菌柰色球菌 支原体，支原体，StomatococcusStom
10、atococcus,莫拉菌，莫拉菌，肠道菌，微球菌，乳杆菌，嗜血杆菌肠道菌，微球菌，乳杆菌，嗜血杆菌 厌氧菌厌氧菌 韦荣球菌，韦荣球菌，消化链球菌消化链球菌,梭杆菌梭杆菌 卟啉单胞菌卟啉单胞菌,拟杆菌拟杆菌,普雷沃菌，普雷沃菌，真杆菌，双歧杆菌，丙酸杆菌真杆菌，双歧杆菌，丙酸杆菌 真菌真菌 念珠菌念珠菌大多数常见共栖菌及部位部位 菌名胃肠道 需氧菌需氧菌 乳杆菌，肠球菌，肠道菌，棒杆菌，乳杆菌，肠球菌，肠道菌，棒杆菌，链链 球菌，葡萄球菌球菌，葡萄球菌 厌氧菌厌氧菌 拟杆菌拟杆菌,普雷沃菌普雷沃菌,卟啉单胞菌卟啉单胞菌,梭杆菌，真杆菌梭杆菌，真杆菌,梭菌，梭菌，消化链球消化链球菌菌,双歧杆菌双
11、歧杆菌,放线菌，韦荣球菌放线菌，韦荣球菌 丙酸杆菌丙酸杆菌,动弯杆菌动弯杆菌 大多数常见共栖菌及部位部位 菌名泌尿生殖道 需氧菌需氧菌 棒杆菌，乳杆菌，葡萄球菌棒杆菌，乳杆菌，葡萄球菌，链球菌，不致病链球菌，不致病柰柰 色球菌，支原体色球菌，支原体,脲原体脲原体,阴道加德勒菌，阴道加德勒菌，肠道菌，不动杆菌，肠球菌，二氧化碳嗜纤维肠道菌，不动杆菌，肠球菌，二氧化碳嗜纤维菌菌 厌氧菌厌氧菌 拟杆菌拟杆菌,卟啉单胞菌卟啉单胞菌,普雷沃菌，放线菌，普雷沃菌，放线菌，梭杆菌属梭杆菌属,动弯杆菌动弯杆菌,丙酸杆菌丙酸杆菌,消化链球菌，双歧杆菌消化链球菌，双歧杆菌 真菌真菌 念珠菌属念珠菌属 大多数常见共
12、栖菌及部位部位 菌名皮肤 耳 眼 需氧菌需氧菌 棒杆菌，葡萄球菌，微球菌，不致病柰色球菌棒杆菌，葡萄球菌，微球菌，不致病柰色球菌 不动杆菌，气球菌不动杆菌，气球菌 厌氧菌厌氧菌 丙酸杆菌丙酸杆菌,梭梭菌菌,消消化链球菌化链球菌 真真菌菌 念珠菌念珠菌,梨头霉梨头霉,毛毛霉霉,马马拉色菌拉色菌大多常见致病菌及部位部位 菌名血液血液 需氧菌需氧菌 CNSCNS，金葡，肺链，肠球菌，肠道菌，金葡，肺链，肠球菌，肠道菌，假单胞菌，流感。假单胞菌，流感。厌氧菌厌氧菌 脆弱拟杆菌脆弱拟杆菌 真菌真菌 白色念珠菌白色念珠菌中枢神经系统中枢神经系统 需氧菌需氧菌 肺链，流感，脑双，肺链，流感，脑双，B B链，
13、链，CNSCNS，金葡金葡 产单核李斯特，大肠，产单核李斯特，大肠，TBTB，努卡菌，努卡菌，苍白密螺旋体苍白密螺旋体,疏螺旋体疏螺旋体,钩端螺旋体钩端螺旋体大多常见致病菌及部位 部位 菌名 真菌 白念，新型隐球菌，荚膜组织胞浆菌 球粗孢子菌上呼吸道 需氧菌 溶血隐秘杆菌 肺炎衣原体 肺炎支原体 A链，淋 球菌，白喉棒杆菌 真菌 念珠菌大多常见致病菌及部位 部位 菌名下呼吸道 需氧菌需氧菌 金葡，肺链，流感，卡他，肺克，大肠，金葡，肺链，流感，卡他，肺克，大肠，绿脓，军团菌，绿脓，军团菌，TBTB，努卡菌，百日咳，努卡菌，百日咳，肺炎支原体肺炎支原体,肺炎衣原体，沙眼衣原体肺炎衣原体，沙眼衣原
14、体 鹦鹉热衣原体衣原体 厌氧菌厌氧菌 混合厌氧菌混合厌氧菌 真菌真菌 组织胞浆菌，球孢子菌，芽生菌，隐球组织胞浆菌，球孢子菌，芽生菌，隐球菌菌 卡氏肺孢子虫卡氏肺孢子虫大多常见致病菌及部位部位 菌名耳 需氧菌需氧菌 肺链，流感，卡他，绿脓肺链，流感，卡他，绿脓 真菌真菌 曲霉菌属，念珠菌属曲霉菌属，念珠菌属眼眼 需氧菌需氧菌 肺链，金葡，肺链，金葡，CNSCNS，流感，淋球菌，流感，淋球菌，假单胞菌，卡他，芽胞杆菌，假单胞菌，卡他，芽胞杆菌，沙眼衣原体沙眼衣原体胃胃 需氧菌需氧菌 幽门螺杆菌幽门螺杆菌 大多常见致病菌及部位部位 菌名肠道肠道 需氧菌需氧菌 弯曲杆菌，沙门菌，志贺菌，弧菌，金弯曲
15、杆菌，沙门菌，志贺菌，弧菌，金葡葡 蜡状芽胞杆菌，耶尔森菌，大肠杆菌，蜡状芽胞杆菌，耶尔森菌，大肠杆菌，气单胞菌气单胞菌,爱德华菌爱德华菌 厌氧菌厌氧菌 梭菌，拟杆菌梭菌，拟杆菌生殖道生殖道 需氧菌需氧菌 淋球菌，杜克嗜血杆菌，沙眼衣原体淋球菌，杜克嗜血杆菌，沙眼衣原体,支原体支原体,脲原体，苍白密螺旋体，鞘杆脲原体，苍白密螺旋体，鞘杆菌菌 厌氧菌厌氧菌 拟杆菌，梭菌，放线菌，拟杆菌，梭菌，放线菌，梭梭杆菌杆菌 动弯杆动弯杆 菌菌 大多常见致病菌及部位部位 菌名 真菌真菌 念珠菌念珠菌皮肤和软组织皮肤和软组织 需氧菌需氧菌 A A链，金葡，链，金葡，CNSCNS，绿脓，流感，肠道菌绿脓，流感，
16、肠道菌 分枝杆菌，丹毒丝分枝杆菌，丹毒丝 菌，创伤弧菌，菌，创伤弧菌，努卡菌，弗朗西斯菌努卡菌，弗朗西斯菌,巴通体菌巴通体菌,密螺旋密螺旋体体 厌氧菌厌氧菌 脆弱拟杆菌，消化链球菌，产气荚膜梭脆弱拟杆菌，消化链球菌，产气荚膜梭菌菌 真菌真菌 糠秕马拉糠秕马拉 菌菌,表皮藓菌表皮藓菌,念珠菌，念珠菌，曲霉菌，申克孢子菌，毛藓菌曲霉菌，申克孢子菌，毛藓菌,小孢子菌小孢子菌,芽生菌芽生菌大多常见致病菌及部位部位 菌名骨和关节骨和关节 需氧菌需氧菌 金葡，淋球菌，链球菌，流感，肠道菌金葡，淋球菌，链球菌，流感，肠道菌 假单胞菌，假单胞菌，CNSCNS，分枝杆菌，分枝杆菌 真菌真菌 申克孢子菌，球孢子菌
17、，念珠菌属申克孢子菌，球孢子菌，念珠菌属尿道尿道 需氧菌需氧菌 大肠杆菌，奇异变形，克勒伯菌，大肠杆菌，奇异变形，克勒伯菌，肠杆菌，假单胞菌，肠球菌，腐生葡萄肠杆菌，假单胞菌，肠球菌，腐生葡萄 金葡，金葡，TBTB，淋球菌，淋球菌，脲原体脲原体 真菌真菌 念珠菌属念珠菌属标本和菌株标本和菌株 染色染色 需氧培基需氧培基 厌氧培基厌氧培基CSF *B CCSF *B C心包液心包液 *B C BBAB C BBA胸水胸水 *B C BBAB C BBA腹水腹水 *B C Mac BBA LKV BBE B C Mac BBA LKV BBE CANCANCAPD *B C CAPD *B C T
18、hTh BBA BBA滑膜液滑膜液 *B CB C骨髓骨髓 *B C BBA *B C BBA导管尖导管尖 B B耳外分泌物耳外分泌物 *B Mac/B C BBA *B Mac/B C BBA眼眼 *B C *B C便便 B Mac HE Ca B Mac HE Ca 标本和菌株标本和菌株 染色染色 需氧培基需氧培基 厌氧培基厌氧培基直肠拭子直肠拭子 MMac HE Ca EBac HE Ca EB阴道子宫阴道子宫 B TMB TM尿道阴茎尿道阴茎 *TMTM泌尿生殖其它泌尿生殖其它 *B C Mac TM BBA LKV BBE B C Mac TM BBA LKV BBE CNACNA痰
19、痰 *B C MacB C Mac气管吸出物气管吸出物 *B C MacB C Mac肺泡灌洗液肺泡灌洗液 *B C Mac BBA LKV BBE B C Mac BBA LKV BBE CNACNA肺泡毛刷肺泡毛刷 *B C Mac B C Mac 组织组织 *B C Mac B C Mac ThTh BBA LKV BBE BBA LKV BBE CNACNA鼻鼻 B CB C咽咽/会厌会厌 B SSA/B SSA CB SSA/B SSA C标本和菌株标本和菌株 染色染色 需氧培基需氧培基 厌氧培基厌氧培基尿尿 B MacB Mac伤口或脓伤口或脓 *B C Mac BBA LKV B
20、BE CNAB C Mac BBA LKV BBE CNA百副日咳百副日咳 Regan Regan lowelowe布鲁菌布鲁菌 B CB C白喉棒杆菌白喉棒杆菌 Cystine-telluriteCystine-tellurite ，LoefflersLoefflers serumserum难辨梭菌难辨梭菌 CCFACCFA大肠大肠0157 0157 山梨糖山梨糖-MacMac链链 LIMLIM肉汤肉汤杜克嗜血杜克嗜血 C+C+万古霉素万古霉素军团菌军团菌 BCYEBCYE弧菌弧菌 TCBSTCBS 菌株菌株 需氧需氧培基培基 耶尔森菌 CINFrancisella tularensis C
21、 或 BCYE淋球菌 TM注：CIN,cefsulodin-irgasan-novobiocinTh,thioglycolate Ca,campylobacter agarHE,Hektoen EB,enrichment brothTM,Thayer-Martin BBA,brucella blood agarBCYE,bufferedcharcoal yeast extract可接受的临床厌氧标本1 抽出物（用注射器）2 前庭大腺3 胆汁4 血5 骨髓6 支气管镜检查保护性毛刷7 后穹隆穿刺术8 输卵管9 子宫内避孕器检查放线菌10卵巢11胎盘(通过剖腹分娩)12 窦道，瘘管抽出物13 便（
22、检查难辨芽胞梭菌）14 外科手术拭子及组织15 气管壁抽出物16 尿（经耻骨弓上采样）17 子宫（经自宫内膜采样）不可接受的临床厌氧标本1 未经保护的支气管 肺泡灌洗液2 子宫颈3 污染的子宫颈内拭子4 恶露（产后一两周阴道排泻物）5 鼻咽拭子6 会阴7 前列腺液或精液8 痰（咳出或导出）9 便或直肠拭子10 咽拭子11 气管造口术抽出物12 尿道13 尿（从膀胱或导管）14 尿（排出的）15 阴拭子或外阴拭子血液中分离出山羊布鲁菌 布鲁菌（Brucella spp)可引起布鲁菌 病(Brucellosis)，又称波浪热，它是人蓄共患性全身传染病。患者，男，35岁，因不明原因发热4个多月后入我
23、院。患者有进食生羊肉串史。布鲁杆菌凝集试验阳性（1:8），血培养第10天阳性。经培养鉴定为山羊布鲁菌。临床用利福平0.3g，强力霉素0.1g每天两次联合使用，6周为1个疗程，体温逐渐下降，1个月后痊愈出院。血液中分离出山羊布鲁菌细菌鉴定：血液传种到麦康凯平皿，血平皿，巧克力平皿(放CO2孵箱)，37度培养48小时后，血平皿及巧克力平皿生长出圆形，突起，半透明，有光泽，边缘整齐且不溶血的大小相同的小菌落。麦康凯平皿不生长。菌落革兰染色为革兰阴性球杆菌，染色很弱，像细沙样。布鲁菌诊断血清阳性，硫磺和品红耐受试验均为阳性，布鲁菌6个种中只有山羊布鲁杆菌此两种试验均为阳性。氧化酶，触酶，尿素，硝酸盐均阳性；硫化氢阴性，无动力。血液中分离出山羊布鲁菌 布鲁菌病临床表现为发热，寒战，虚弱不适，头痛，躯体疼痛和出汗，体重减轻和厌食。布鲁菌常从血液和骨髓中获得，偶尔可从肝和脾活组织检查及脓液中获得。因布鲁菌生长慢，要延长培养时间，以防漏检。为提高疗效，减少复发和防止耐药菌株产生，布鲁菌病的治疗需要延长抗生素联合治疗时间和多疗程法。世界卫生组织推荐的首选治疗为利福平0.6g/d和强力霉素0.1g/d两次，联合用药，6周为1个疗程。