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1、菌株的驯化2011/1130现在学习的是第1页，共17页一、实验准备l1、出发菌株（a、B1-1、Bos6-、Q33-6）l2、培养基 （牛肉膏蛋白胨固体培养基）l3、Amp （母液200mg/ml，操作使用 100ug/ml、100mg/ml）备注：将抗生素冷冻保存。2011/11/30现在学习的是第2页，共17页二、试验目的l将a、B1-1、Bos6-、Q33-6四株菌接种到涂有Amp 100mg/mL 20uL的平板上，逐步提高浓度，最终将其驯化能在Amp 高浓度（300-400）上生长。2011/11/30现在学习的是第3页，共17页三、实验阶段l1、将a、B1-1、Bos6-、Q33
2、-6四株 菌接种到涂有Amp 100ug/mL 20uL的平板上，验证四株菌活性。l2、将a、B1-1、Bos6-、Q33-6四株 菌接种到涂有Amp 100mg/ml 20ul的平板上，并逐步提高涂抹量。2011/11/30现在学习的是第4页，共17页2011/11/21菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100ug/mL 20uL+B1-1Amp 100ug/mL 20uL+Bos6-Amp 100ug/mL 20uL+Q33-6Amp 100ug/mL 20uL+2011/11/30现在学习的是第5页，共17页2011/11/22菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长
3、情况生长情况aAmp 100ug/mL 40uL-B1-1Amp 100ug/mL 40uL-Bos6-Amp 100ug/mL 40uL-Q33-6Amp 100ug/mL 40uL+分析：培养基凝固不好。2011/11/30现在学习的是第6页，共17页2011/11/23菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100ug/mL 40uL+B1-1Amp 100ug/mL 40uL+Bos6-Amp 100ug/mL 40uL+Q33-6Amp 100ug/mL 40uL+结论：四株菌生长良好，第一阶段完成。2011/11/30现在学习的是第7页，共17页2011/11/2
4、4无培养基，没有进行试验2011/11/30现在学习的是第8页，共17页2011/11/25菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100mg/mL 20uL+B1-1Amp 100mg/mL 20uL+Bos6-Amp 100mg/mL 20uL+Q33-6Amp 100mg/mL 20uL+Q33-6、Bos6-长势很好出现大量单菌落2011/11/30现在学习的是第9页，共17页Bos6-2011/11/30现在学习的是第10页，共17页Q33-62011/11/30现在学习的是第11页，共17页2011/11/26菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAm
5、p 100mg/mL 40uL+B1-1Amp 100mg/mL 40uL+Bos6-Amp 100mg/mL 40uL+Q33-6Amp 100mg/mL 40uL+有生长但不明显，划线二端生长或边缘生长。分析：涂抹后中间Amp浓度略高于边缘，进而菌落大部分出现在边缘，其中Q33-6是很好的佐证。2011/11/30现在学习的是第12页，共17页Q33-62011/11/30现在学习的是第13页，共17页2011/11/27菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100mg/mL 40uL+B1-1Amp 100mg/mL 40uL+Bos6-Amp 100mg/mL 40
6、uL+Q33-6Amp 100mg/mL 40uL+仍然边缘生长，其中B1-1出现单菌落2011/11/30现在学习的是第14页，共17页2011/11/28菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100mg/mL 40uL+B1-1Amp 100mg/mL 40uL+Bos6-Amp 100mg/mL 40uL+Q33-6Amp 100mg/mL 40uL+2011/11/30现在学习的是第15页，共17页阶段总结通过实验及毋泼前期试验得知四株菌能够很好的生长在 Amp 100mg/ug 的培养基上，其中Q33-6,Bos6-比较优势。对于更高浓度的Amp，四株菌能够生长但长势不理想，主要是四株菌生长在边缘区。考虑下步接菌是否只接平板中部。2011/11/30现在学习的是第16页，共17页2011/11/30现在学习的是第17页，共17页