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1、菌株的驯化2011/1130第1页,此课件共17页哦一、实验准备l1、出发菌株(a、B1-1、Bos6-、Q33-6)l2、培养基 (牛肉膏蛋白胨固体培养基)l3、Amp (母液200mg/ml,操作使用 100ug/ml、100mg/ml)备注:将抗生素冷冻保存。2011/11/30第2页,此课件共17页哦二、试验目的l将a、B1-1、Bos6-、Q33-6四株菌接种到涂有Amp 100mg/mL 20uL的平板上,逐步提高浓度,最终将其驯化能在Amp 高浓度(300-400)上生长。2011/11/30第3页,此课件共17页哦三、实验阶段l1、将a、B1-1、Bos6-、Q33-6四株 菌
2、接种到涂有Amp 100ug/mL 20uL的平板上,验证四株菌活性。l2、将a、B1-1、Bos6-、Q33-6四株 菌接种到涂有Amp 100mg/ml 20ul的平板上,并逐步提高涂抹量。2011/11/30第4页,此课件共17页哦2011/11/21菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100ug/mL 20uL+B1-1Amp 100ug/mL 20uL+Bos6-Amp 100ug/mL 20uL+Q33-6Amp 100ug/mL 20uL+2011/11/30第5页,此课件共17页哦2011/11/22菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp
3、 100ug/mL 40uL-B1-1Amp 100ug/mL 40uL-Bos6-Amp 100ug/mL 40uL-Q33-6Amp 100ug/mL 40uL+分析:培养基凝固不好。2011/11/30第6页,此课件共17页哦2011/11/23菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100ug/mL 40uL+B1-1Amp 100ug/mL 40uL+Bos6-Amp 100ug/mL 40uL+Q33-6Amp 100ug/mL 40uL+结论:四株菌生长良好,第一阶段完成。2011/11/30第7页,此课件共17页哦2011/11/24无培养基,没有进行试验20
4、11/11/30第8页,此课件共17页哦2011/11/25菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100mg/mL 20uL+B1-1Amp 100mg/mL 20uL+Bos6-Amp 100mg/mL 20uL+Q33-6Amp 100mg/mL 20uL+Q33-6、Bos6-长势很好出现大量单菌落2011/11/30第9页,此课件共17页哦Bos6-2011/11/30第10页,此课件共17页哦Q33-62011/11/30第11页,此课件共17页哦2011/11/26菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100mg/mL 40uL+B1-1Am
5、p 100mg/mL 40uL+Bos6-Amp 100mg/mL 40uL+Q33-6Amp 100mg/mL 40uL+有生长但不明显,划线二端生长或边缘生长。分析:涂抹后中间Amp浓度略高于边缘,进而菌落大部分出现在边缘,其中Q33-6是很好的佐证。2011/11/30第12页,此课件共17页哦Q33-62011/11/30第13页,此课件共17页哦2011/11/27菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100mg/mL 40uL+B1-1Amp 100mg/mL 40uL+Bos6-Amp 100mg/mL 40uL+Q33-6Amp 100mg/mL 40uL+
6、仍然边缘生长,其中B1-1出现单菌落2011/11/30第14页,此课件共17页哦2011/11/28菌株菌株平板涂布浓度平板涂布浓度生长情况生长情况aAmp 100mg/mL 40uL+B1-1Amp 100mg/mL 40uL+Bos6-Amp 100mg/mL 40uL+Q33-6Amp 100mg/mL 40uL+2011/11/30第15页,此课件共17页哦阶段总结通过实验及毋泼前期试验得知四株菌能够很好的生长在 Amp 100mg/ug 的培养基上,其中Q33-6,Bos6-比较优势。对于更高浓度的Amp,四株菌能够生长但长势不理想,主要是四株菌生长在边缘区。考虑下步接菌是否只接平板中部。2011/11/30第16页,此课件共17页哦2011/11/30第17页,此课件共17页哦