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1、人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素检测方法及临床意义检测方法及临床意义云南省红河州第一人民医院检验科云南省红河州第一人民医院检验科 李李 琼琼 芬芬n 概念概念u HCG HCG 组成组成u 宫外孕宫外孕u 葡萄胎葡萄胎u 绒毛膜癌绒毛膜癌n 检测方法及原理检测方法及原理n临床意义临床意义l概念概念u HCG HCG 组成组成 HCG是由是由和和二聚体二聚体组成组成 的糖蛋白激素。的糖蛋白激素。HCG HCG 亚单位的氨基酸排列与黄体生成素亚单位的氨基酸排列与黄体生成素（LHLH）的）的亚单位相似，但是它们的亚单位相似，但是它们的亚单亚单位各不相同。因此为避免交叉反应，位各不相同。因此为避免
2、交叉反应，目前均目前均采用抗采用抗-HCG-HCG单克隆抗体进行特异的单克隆抗体进行特异的HCGHCG检查。检查。凡孕卵在子宫腔以外的任何部位着床者，凡孕卵在子宫腔以外的任何部位着床者，统称为异位妊娠，习惯称为宫外孕。统称为异位妊娠，习惯称为宫外孕。根据根据着床部位不同，有输卵管妊娠、卵巢妊娠、着床部位不同，有输卵管妊娠、卵巢妊娠、腹腔妊娠、宫颈妊娠及子宫残角妊娠等。腹腔妊娠、宫颈妊娠及子宫残角妊娠等。在宫外孕中，在宫外孕中，以输卵管妊娠最多见，约占以输卵管妊娠最多见，约占90%90%以上。以上。u 宫外孕宫外孕输卵管与卵巢输卵管与卵巢宫外孕宫外孕 为为绒毛基质微血管消失绒毛基质微血管消失，从
3、而绒毛基，从而绒毛基 质积液，形成大小不等的水泡，形似葡质积液，形成大小不等的水泡，形似葡萄，故称为萄，故称为 葡萄胎葡萄胎 （hydatidiform hydatidiform molemole）。）。u 葡葡 萄萄 胎胎葡萄胎葡萄胎葡萄胎葡萄胎葡萄胎葡萄胎葡萄胎葡萄胎 是一种高度恶性的肿瘤，继发于葡萄胎、流产或是一种高度恶性的肿瘤，继发于葡萄胎、流产或足月分娩以后，出现不规则阴道流血及转移灶症足月分娩以后，出现不规则阴道流血及转移灶症状，并有血状，并有血HCGHCG升高，应诊断为绒毛膜癌。升高，应诊断为绒毛膜癌。其发病其发病情况大约为情况大约为0.0010.0013.6 3.6 ，少数可发
4、生于宫，少数可发生于宫外孕后，外孕后，多为生育年龄妇女多为生育年龄妇女。偶尔发生于未婚妇。偶尔发生于未婚妇女的卵巢称为原发性绒毛膜癌，在女的卵巢称为原发性绒毛膜癌，在5050年代，死亡年代，死亡率很高，近年来应用化学药物治疗，使绒癌的预率很高，近年来应用化学药物治疗，使绒癌的预后有了显著的改观。后有了显著的改观。u 绒毛膜癌绒毛膜癌绒毛膜癌绒毛膜癌子宫绒毛膜癌重度出血子宫绒毛膜癌重度出血l 检测方法检测方法顺磁性微粒化学发光免疫测定法顺磁性微粒化学发光免疫测定法 双抗体夹心法双抗体夹心法贝克曼仪器贝克曼仪器UniCel DxI 800UniCel DxI 800 -HCG-HCG郑州安图试剂郑
5、州安图试剂-仪器仪器Lucy3Lucy3 HCGHCG l检测原理检测原理 AMPPD:AMPPD:3-(2-螺旋金刚烷螺旋金刚烷)-4-甲氧基甲氧基-4-(3-磷氧酰磷氧酰)-苯基苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐二氧环乙烷二钠盐 ，是，是最新的超灵敏最新的超灵敏的碱性的碱性磷酸酶底物磷酸酶底物，反应速度快反应速度快；是碱性磷酸酶的化学发光底物，断裂并发射光子是碱性磷酸酶的化学发光底物，断裂并发射光子AMPD:AMPD:氨基甲基丙二醇氨基甲基丙二醇 化学发光免疫分析流程化学发光免疫分析流程l免疫学原理免疫学原理l 抗原、抗体特异性结抗原、抗体特异性结l 小分子采用小分子采用(一步、二步一步、二步
6、)竞争结合法竞争结合法l 大分子采用大分子采用(一步、二步一步、二步)夹心法夹心法l 磁性微粒子化学发光技术磁性微粒子化学发光技术 l 磁性微粒子磁性微粒子d7ud7ul 扩大表面积、增加灵敏性扩大表面积、增加灵敏性l 加快反应速度、迅速捕获抗原、抗体加快反应速度、迅速捕获抗原、抗体l 易于结合相、游离相的分离，提高准确性易于结合相、游离相的分离，提高准确性l 提高发光强度、快速达到稳定、持续发光提高发光强度、快速达到稳定、持续发光 进样系统进样系统反应池反应池PMT放大器放大器记录仪记录仪负高压负高压 检测系统检测系统电化学发光分析法仪器方框图电化学发光分析法仪器方框图PMT:光电倍增管光电
7、倍增管 如如超出线性范围上线值时，必须超出线性范围上线值时，必须按不同样本的需要，做不同倍数按不同样本的需要，做不同倍数的稀释的稀释 检测值检测值 是指由于是指由于抗原抗原抗体抗体比例不合适比例不合适而导致假阴性的现象，其中而导致假阴性的现象，其中抗抗体体过剩叫做过剩叫做前带前带效应，效应，抗原抗原过过剩叫做剩叫做后带后带效应。效应。钩状效应钩状效应l稀释方法稀释方法 p先用早早孕试纸筛查，确定稀释倍数先用早早孕试纸筛查，确定稀释倍数p根据不同浓度的血清样本的需要，对血清作相应倍根据不同浓度的血清样本的需要，对血清作相应倍数的稀释，得出的实验结果，数的稀释，得出的实验结果，克服了克服了HOOK
8、效应对效应对检测结果的影响，检测结果的影响，不影响绒毛膜促性腺激素增高的不影响绒毛膜促性腺激素增高的血清学检测值，保证了检测结果的准确性，提高了血清学检测值，保证了检测结果的准确性，提高了临床诊断的符合率，辅助临床用药监测、观察疗效临床诊断的符合率，辅助临床用药监测、观察疗效及预后评价。及预后评价。n 临床意义临床意义 u 诊断早期妊娠诊断早期妊娠妊娠期间正常血妊娠期间正常血HCGHCG参考水平参考水平妊娠周数 HCG（mIU/ml）0.2-1(2-7天）5-50 1-2（8-14天）50-500 2-3（15-21天）100-5000 3-4（22-28天）500-10000 4-5（29-
9、35天）1000-50000 5-6（36-42天）10000-100000 6-8（43-56天）15000-2000002-3月（60-90天）10000-100000 在受精卵植入子宫后在受精卵植入子宫后24 48小时小时，就可以在，就可以在血液中检测出来血液中检测出来。在妊娠最初。在妊娠最初3 3个月个月血血HCGHCG水水平每（平每（2.20.52.20.5 小时小时）天约升高一倍。比）天约升高一倍。比如今天是如今天是234234，如果后天测出来是，如果后天测出来是450450左右左右,就就可认为是正常宫内早孕。可认为是正常宫内早孕。(测量浓度为测量浓度为500mIU/ml的的LH,
10、HCG不高于不高于5.0mIU/ml)J郑州安图试剂郑州安图试剂-仪器仪器Lucy3Lucy3u异常妊娠与胎盘异常妊娠与胎盘 功能的判断功能的判断L宫外孕时，宫外孕时，由于输卵管肌层菲薄、滋养细由于输卵管肌层菲薄、滋养细胞发育不良胞发育不良,血供差血供差,合体滋养细胞合成合体滋养细胞合成血血HCGHCG量显著减少量显著减少,每天升高幅度也减少。每天升高幅度也减少。如果连续两次增加速度缓慢，表明宫外孕如果连续两次增加速度缓慢，表明宫外孕或者胚胎不正常发育迟缓。或者胚胎不正常发育迟缓。故血故血HCGHCG检查可检查可作为与其它急腹症的鉴别。作为与其它急腹症的鉴别。L流产诊断与治疗流产诊断与治疗：不
11、完全流产如子宫内尚有：不完全流产如子宫内尚有胎盘组织残存，血胎盘组织残存，血HCGHCG多次检查时，会出现忽多次检查时，会出现忽高忽低或逐渐上升的情况；如血高忽低或逐渐上升的情况；如血 HCG HCG 仍维持仍维持高水平多不会发生难免流产；如血高水平多不会发生难免流产；如血 HCG HCG 逐渐逐渐下降，则有流产或死胎的可能；在保胎治疗下降，则有流产或死胎的可能；在保胎治疗中，如血中，如血 HCG HCG 仍继续下降，说明保胎无效；仍继续下降，说明保胎无效；如血如血 HCG HCG 不断上升，说明保胎成功。因此，不断上升，说明保胎成功。因此，可作为保胎或吸宫治疗的参考依据。可作为保胎或吸宫治疗
12、的参考依据。L在产后在产后4 4天或人工流产术后天或人工流产术后1313天天，血血HCGHCG应低于应低于1000mIU/ml1000mIU/ml，产后，产后9 9天天或人工流产术后或人工流产术后2525天，血天，血HCGHCG应恢应恢复正常。复正常。如不符合这一情况，则应如不符合这一情况，则应考虑有异常可能。考虑有异常可能。u滋养细胞肿的诊断滋养细胞肿的诊断与治疗监测与治疗监测 L葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜癌及睾丸葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜癌及睾丸畸胎瘤等患者血畸胎瘤等患者血HCGHCG显著升高显著升高，有的可达，有的可达到数百万到数百万mIU/ml 。如果血如果血HCG HCG 增加速度增
13、加速度非常快，表明有葡萄胎的可能，非常快，表明有葡萄胎的可能，必须紧必须紧密监测，当然也有可能是双胞胎。密监测，当然也有可能是双胞胎。L滋养层细胞肿瘤患者术后滋养层细胞肿瘤患者术后，如血，如血HCGHCG不下降或不转阴，提示可能不下降或不转阴，提示可能有残留病变，这类病例常易复发，有残留病变，这类病例常易复发，故需定期检查。故需定期检查。小结小结：HCG检测的临床意义检测的临床意义(诊断早期妊娠诊断早期妊娠(宫外孕与胎盘功能的判断宫外孕与胎盘功能的判断(滋养细胞肿瘤的诊断和治疗监测滋养细胞肿瘤的诊断和治疗监测J 不同方法、不同厂家的试剂，不同方法、不同厂家的试剂，检测原理、线性范围不同检测原理
14、、线性范围不同J 避免钩状效应的发生避免钩状效应的发生小结：小结：分析中的注意事项分析中的注意事项治疗前及疗效观察：治疗前及疗效观察：l病例病例姓名姓名年龄年龄（岁）（岁）病检病检诊断诊断日期日期治疗前、后：治疗前、后：HCG(mIU/ml)HCG(mIU/ml)时时xxxx2929绒癌绒癌2013-11-282013-11-282140800.002140800.002013-11-302013-11-302360650.002360650.002013-12-102013-12-10100061.26100061.262013-12-132013-12-1352104.0052104.00
15、2013-12-212013-12-213980.003980.00曹曹xxxx2626绒癌绒癌2013-11-72013-11-7238920.09238920.092013-11-82013-11-8488492.86488492.862013-11-132013-11-13817986.42817986.422013-11-182013-11-1824504.0024504.002013-11-232013-11-236933.006933.002013-12-12013-12-12219.002219.00李李x x1717葡萄胎葡萄胎2013-11-142013-11-141372020.001372020.002013-11-202013-11-206339.006339.00余余xxxx4545葡萄胎葡萄胎2013-12-122013-12-122298690.002298690.002013-12-192013-12-191100550.001100550.00谢谢！谢谢！知识回顾知识回顾Knowledge Knowledge ReviewReview谢谢 谢！谢！放映结束放映结束 感谢各位的批评指导！感谢各位的批评指导！让我们共同进步让我们共同进步