毕业论文开题报告 (15).docx

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1、吉林农业科技学院本科毕业论文（设计）开 题 报 告题 目 南极磷虾中虾青素含量的测定 姓 名 李 春 阳 学 号 专 业 食品质量与安全 指导教师 职 称 讲 师 2018 年 10 月 5 日说 明1、毕业论文（设计）工作开始之前，学生填写吉林农业科技学院毕业论文（设计）开题报告，指导教师填写“指导教师意见”栏。2、学生要认真填写毕业论文（设计）工作的进展情况，指导教师要定期检查学生的毕业论文（设计）的进展情况。3、本开题报告的各部分内容要完整，所有签字必须齐全，院、部、系的工作检查将以此作为主要依据。4、本开题报告填写完整后，与毕业论文（设计）一起交给指导教师，作为毕业论文（设计）成绩考核

2、的主要依据材料。5、评定成绩后，吉林农业科技学院本科毕业论文（设计）开题报告与吉林农业科技学院毕业论文（设计）评阅与答辩手册要统一交到分院办公室。成绩优秀的毕业论文（设计）开题报告、评阅与答辩手册、毕业论文（设计）由分院办公室负责存到教务处教务科和学院档案室各1份，其它由系保存，以备检查、评估。吉林农业科技学院本科毕业论文（设计）开题报告1、 毕业论文（设计）的背景及意义：南极磷虾(Euphausia supeba)是一种海洋软甲纲的无脊椎动物，是世界上生物质能最大的物种，因其处在海洋食物链的底端决定其为许多海洋猎食动物(如海豹、鲸等)的主要食物来源。世界上许多国家己经开始进行南极磷虾的捕捞与

3、研究，我国也自2009年12月开始正式对南极磷虾进行捕捞。南极磷虾不仅是南大洋的关键物种，也是地球上储量最丰富且函待开发利用的渔业资源，同时其体内富含虾青素等类胡萝卜素物质，虾青素酷是南极磷虾甲壳内色素的主要组成成分，因此南极磷虾是天然虾青素的极好来源之一。天然虾青素是一种具有活性经基酮基团的多烯式类胡萝卜素，分子式为C40H52O4。虾青素是最重要的天然类胡萝卜素之一，是自然界抗氧化性最强的天然分子，此外虾青素还具有多种有益的生理学功能，比如着色功能(在鱼类肌肉、鳞片，鸟类羽毛和蛋黄中等)、增强免疫力功能、预防癌症以及抗紫外线功能等，因此天然虾青素具有多方向的研究价值，在保健品和化妆品制造业

4、都具有广阔的开发与利用前景。2、毕业论文（设计）的研究目标： 本文旨在探究对于南极磷虾中虾青素的一系列简捷、高效的提取纯化及日常分析方法，主要利用高效薄层色谱法和常压柱色谱法对虾青素进行分离纯化，并利用薄层扫描和液质联用进行纯度分析，力求高效省时、节约溶剂，以减少剧毒有机溶剂对环境的污染与破坏。3、毕业论文（设计）的主要研究内容、研究方法、具体措施和研究的可行性、创新点3.1实验材料 实验所用南极磷虾来自山东科茵尔生物制品有限公司，为南极磷虾的冷冻样品。所用磷虾体长3cm左右，通体呈淡红色。虾青素标准品来自德国Dr.Ehrenstorfe:公司，纯度)95%，为深紫黑色片针装晶体，有光泽，极易

5、溶于低极性脂溶性溶剂，在甲醇等高极性有机溶剂中溶解度则比较小。3.2主要试剂和仪器(1)所用试剂薄层色谱所用试剂皆为分析纯(AR，包括正己烷、丙酮、石油醚、酷(天津富宇试剂公司);皂化过程所用试剂皆为分析纯，包括氢氧化钾乙酸乙(白色片状固体，济南鑫旺化工有限公司)、甲醇(天津富宇试剂公司);高效液相色谱所用试剂皆为优级纯(GR，包括甲醇(上海国药集团试剂有限公司)和水(哇哈哈牌纯净水)。(2)所用仪器 电热鼓风干燥箱:DHG-9053A,0-250摄氏度，上海和呈仪器制造有限公司; 电动高速组织捣碎机:JJ-2(B)，青岛胜方分析仪器游戏公司; 磁力搅拌器:X85-2S，上海梅颖浦仪器制造有限

6、公司; 旋转蒸发仪:RE-5210，上海亚荣生化仪器厂; 台式高速离心机:TG18G，湖南凯达科学仪器有限公司; 薄层扫描仪:搭载软件为WINCATS 1.4.1版本，瑞士卡玛(CAMAG)公司。 高效薄层预制板:5cmX10 cm的GF2s4预制板，青岛海洋化工有限公司，厚度为200um，硅胶粒径为5-7um，点样采用10ul的微量毛细管点样器。3.3实验方法 南极磷虾的干虾在55摄氏度下鼓风干燥24h，用组织打碎机打成20目左右虾粉，加入正己烷，30摄氏度下以1:6 (W:V)的比例在磁力搅拌器上提取三次，每次1 h过滤提取液，在30摄氏度下采用旋转蒸发仪在低压下除去正己烷，所得虾油加入丙

7、酮萃取，虾青素于丙酮相，重复数次直至丙酮溶液几乎无色，合并丙酮溶液。丙酮溶液在30摄氏度下旋转蒸发浓缩除去溶剂，得深红色虾青素酷的粗提物。3.4虾青素酉旨的皂化 虾青素酷的皂化采用低温长时工艺。因为碱既能与虾青素分子相连的脂肪酸分子发生皂化反应，又能促使虾青素分子本身的降解。据研究在0-5摄氏度左右，能将碱对虾青素分子的降解作用减到较低水平，使皂化反应更加平稳彻底的进行，因此选用氢氧化钾的甲醇溶液在低温下进行皂化。 选取6 h和12h, 4 摄氏度和15摄氏度，采用三因素二水平正交表进行正交实验，碱液浓度0.010 gml-1, 0.013 gml-1，验证合适的皂化条件。 皂化过程:将提取的

8、虾油与甲醇以1:9(v/v)的比例混合均匀，再加入精确称量的氢氧化钾配制成皂化溶液，待氢氧化钾充分溶解，将混合物置于一定温度下保持一段时间。之后取出向混合物中加入适量去离子水，使混合物分层，水层在上，红色有机相在下。将分层的混合物加入分液漏斗，剧烈震荡并经 4 摄氏度下冷藏1h后除去上层水相。这一步骤重复数次直至下层有机相pH为7。有机相用氮气吹干后重复溶解于二氯甲烷中。3.5虾青素的薄层色谱分析 虾青素粗提物的薄层色谱分析选取正己烷一丙酮和石油醚一乙酸乙酷两个展开系统进行虾青素酷的薄层分离实验。 实验表明当石油醚一乙酸乙酷系统和正己烷一丙酮系统具有相似的分离效果时，前者耗时几乎是后者的两倍，

9、所以选用正己烷一丙酮作为今后虾青素的薄层色谱展开剂。 以正己烷与丙酮3:1(v/v)的混合展开剂为中心，调节两种有机溶剂的体积比例观察分离效果，最终选定正己烷与丙酮7:2(v/v)的混合溶液为虾青素的分离的展开剂。 原始样品制备:5g虾油用3Oml丙酮处理，10000 g下高速离心5 min，得到深红色沉淀和红色上清液。这一步骤重复数次直至上清液几乎透明，然后合并上清液，在250C避光环境中用旋转蒸发仪除去丙酮，称量旋蒸瓶的前后质量差，得到固体物质为1.49 g，将之溶解于15 ml二氯甲烷中，制成原始样品。 皂化样品制备:取1 ml原始样品，与9 ml甲醇和0.13 g氢氧化钾混匀，待氢氧化

10、钾充分溶解，将混合物置于冰箱冷藏室，4摄氏度下保持12h。之后取出向混合物中加入20 ml去离子水，混合物分层，水层在上，红色有机相在下。将分层的混合物加入分液漏斗，剧烈震荡并经4摄氏度下冷藏1h后除去上层水相。这一步骤重复数次直至下层有机相pH为7。有机相用氮气吹干后重复溶解于2 ml二氯甲烷中，制得皂化样品。 标准品制备:标准品是由准确称量的0.9300 mg虾青素标准品溶解于10 ml甲醇与二氯甲烷3:1(v/v)的混合溶液中，即虾青素标准品的浓度为0.0930 mg/ml,溶液呈红色。 上述样品制备的过程都是在避光条件下进行，制得的样品和标准品溶液在检之前都存贮于一20 0C的冰箱冷冻

11、室内，检测时各取出三种样品加入防有机溶剂的离心管中，将原始样品、皂化样品和标准品分别编号为1, 2, 3号，一次性使用，因二氯甲烷的挥发性比较强。3.6可行性：（1） 实验材料易于采取，原材料方便收集。（2） 实验室仪器设备充足，利于实验后数据的收集和整理。（3） 通过对专业知识的学习，掌握实验方法。（4） 有很多类似的植物多糖提取和抗氧化研究文献可供参考。3.7创新点：本论文通过一系列实验提取并纯化了南极磷虾中的虾青素，得到纯度为99.36%的游离虾青素。创新点是在分析过程中首次建立并确认了南极磷虾中虾青素的高效薄层色谱分析方法，并证明这一方法快捷、可靠且重现性好，同时采用常压硅胶柱色谱法对

12、虾青素进行了初步纯化，通过液质联用及薄层扫描分析确证，方法特异性好且简便高效。4、 主要参考资料及使用的原始资料（数据）：1徐学明，法夫酵母产虾青素的研究D.无锡轻工业大学，2000.2张绣，潘霞.诱变方式对红酵母菌NZ-O 1选育的影响.J.食品与发酵工业，2009,35(12):15一18.3朱艺峰，鱼饲料着色剂一甲壳类下脚料类胡萝卜素的提取技术.J.海洋湖沼通2002,2:21-274Lacker, T., Strohschein, S., Albert, K., Separation and identifica-tion of variouscarotenoids by C-30 r

13、eversed-phase high-performance liquid chromatography coupled to UV and atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometric detection.J.Chromatogr. A 1999, 854:37-44.5 Miao, F.P., Lu, D.Y, Li, YG, Zeng, M.T., Characterization of astaxanthin esters inHaematococcus pluvialisby liquid chromatogr

14、a-phy-atmospheric pressure chemicalionization mass spectrometry.J. Anal. Biochem. 2006, 352:176-181.6许培雅，章银军.虾壳虾青素提取工艺研究.J.粮食与饲料工业，2003,2:27-28.7何丽一，平面色谱方法及应用.M.化学工业出版社，2000:23-258张豁中，温玉麟，动物活性成分化学.M.天津:天津科学技术出版社，19955、毕业论文（设计）的进度安排：1-2周：准备实验材料，熟悉实验仪器，做实验的预实验。3-5周：做单因素实验中虾青素物质总含量的测定。6-8周：从南极磷虾中提取虾青素，对料液比、超声波功率、提取温度和超声时间为单因素做正交试验。9-10周：数据统计，分析。11-12周：完成毕业论文初稿。6、指导教师意见：（对论文题目、深度、广度及工作量的意见、要求和对结果的预测等） 指导教师签字： 年 月 日7、开题报告评议情况：评议结果（开题报告是否通过，意见及建议等）答辩小组组长： 年 月 日答 辩 小 组 成 员序 号姓 名职 称专 业8