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1、铜绿假单胞菌的耐药水平调查及分析 目的调查我院2023年9月2023年8月住院患者送检标本分别的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药水平，并分析亚胺培南耐药株对其他常用抗菌药物的耐药性。方法临床标本分别的铜绿假单胞菌用常规K-B方法进行药物敏感性试验，若结果判定为耐药和中介，则进一步采纳琼脂倍比稀释法检测铜绿假单胞菌对亚胺培南及其他10种抗菌药物的MIC。结果铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为13.7%，22株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对10常用种抗菌药物的耐药率也普遍较高，有3株铜绿假单胞菌对受试的11种抗菌药物全部耐药。结论铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率较高，并对多种抗菌药物耐药，应引起高度重视。 铜
2、绿假单胞菌;亚胺培南;MIC;耐药率铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa，PA)，是一种常见的院内获得性感染条件致病菌，在医院感染病原菌的检测中检出率最高，对多种抗菌药物表现为自然或获得性耐药。碳青霉烯类抗生素如亚胺培南曾是临床上运用的抗PA较为有效的药物，但近年来随着亚胺培南在临床的广泛应用，PA对其耐药率呈上升趋势，上海地区铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率高达20%1。我们对分别的PA对亚胺培南的耐药状况进行了调查，同时就耐药株对其他常用抗菌药物的敏感性进行分析，为临床治疗供应依据。1材料与方法1.1菌株来源全部40株铜绿假单胞菌均分别自我院2023年9月至2023年8月
3、临床各科送检的住院患者标本。临床分别株的鉴定根据常规K-B方法进行，根据美国临床和试验室标准委员会(CLSI)标准进行操作和推断，并判定为耐药和中介菌株，除去重复菌株，用15%甘油LB肉汤保存于-80。质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922和ATCC35218(用于含酶抑制剂的抗生素)，以及铜绿假单胞菌ATCC27853购防卫生部临床检验中心。1.2培育液和药敏抗生素Mueller-Hinton(MH)琼脂购自法国生物梅里埃公司，批号：811813401。亚胺培南(IPM)购自杭州默沙东制药有限公司，批号：06121;美罗培南(MEM)购自日本住友制药株式会社，批号：10080;哌拉西林(PR
4、L)购自华西制药集团，批号：20230401;哌拉西林/他唑巴坦(TZP)购自美国惠氏-百宫制药有限公司，批号：B770308;头孢他啶(CAZ)购自海南海灵制药有限公司，批号：060801;头孢吡肟(FEP)购自中美上海施贵宝制药有限公司，批号：0604791;头孢哌酮(CP)购自辉瑞制药有限公司，批号：75835017;头孢哌酮/舒巴坦(SCF)购自辉瑞制药有限公司，批号：65839296;环丙沙星(CIP)购自拜耳医药保健有限公司，批号：BXBWE67;氨曲南(ATM)购自江西制药有限公司，批号：0512071;丁胺卡那(AK)购自旭东海普药业有限公司，批号：060213。1.3抗菌药物
5、最低抑菌浓度(minimalinhibitoryconcentration，MIC)测定采纳琼脂倍比释法测定各种抗菌药物的MIC。依据2023年美国临床试验室标准化协会(CLSI/NCCLS)标准，亚胺培南的MIC4g/ml为敏感，MIC16g/ml为耐药，MIC值在416g/ml之间的菌株归入耐药组进行比较。2结果2.1共分别培育获得铜绿假单胞菌161株，通过K-B纸片扩散法检出亚胺培南耐药或中介的菌株共40株。2.2铜绿假单胞菌对亚胺培南的MIC测定本组40株PA中MIC4g/ml的菌株18株，MIC16g/ml的菌株10株，MIC介于416g/ml之间的菌株12株，故2023年9月202
6、3年8月我院共检出耐亚胺培南的铜绿假单胞菌22株，占同期全部检出的铜绿假单胞菌161株的13.7%，其耐药率为13.7%(22株/161株)。2.3铜绿假单胞菌的标本分布22株铜绿假单胞菌分别来自呼吸道标本14份，脓液3份，中段尿2份，血液1份，创面分泌物1份，腹水1份。2.4耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对其他抗生素的敏感率22株PA对其他10种被认为对铜绿假单胞菌疗效较好的受试抗菌药物的敏感性，以哌拉西林/他唑巴坦最为敏感，敏感率为72.7%，其次为哌拉西林和头孢哌酮，敏感率分别为68.2%和63.7%。对环丙沙星耐药率最高，为68.2%。另外，发觉3株对全部抗生素全部耐药的多重耐药株。3探讨随
7、着其临床应用的增加，铜绿假单胞菌对其耐药率呈上升趋势。我院2023年9月2023年8月从住院患者送检的各类标本中共分别出铜绿假单胞菌161株，经K-B纸片扩散法检出耐亚胺培南的菌株共40株。本试验采纳美国国家临床试验室标准委员会(NCCLS，2023年)所举荐的琼脂倍比稀释法，PA对常用抗菌药物的MICs琼脂倍比稀释法测定MIC后，发觉40株PA中耐亚胺培南的菌株仅为22株，较K-B法低，分析可能的缘由：K-B纸片扩散法为初步筛查，琼脂倍比稀释法则更精准地测定出抗菌药物的MIC，且全部操作步骤均有标准菌株作质控保证。传统的纸片法虽简便易行，但要求严格的质控和操作才能获得可信的结果，如药敏纸片厚
8、度或纸片受潮等因素，都可能导致结果出现偏差。琼脂稀释法可精确测定细菌的MIC，但操作烦琐，工作量大，故临床测定亚胺培南的耐药率仍依靠于K-B法，但需严格执行质控，并结合临床，以确保检验结果。耐亚胺培南铜绿假单胞菌对其他抗菌药物也存在肯定的耐药性，依据本组试验结果，22株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌总体上对哌拉西林/他唑巴坦、哌拉西林、头孢哌酮和头孢他定有肯定敏感性，可作为临床用药选择时的参考。由于PA对常用抗生素的敏感性不断下降以及耐药性不断改变，而不恰当的治疗会筛选出多种多样的耐药菌株，这对抗菌药物的应用提出了严峻的挑战。本组22株耐亚胺培南的PA中就发觉3株对全部抗生素全部耐药的多重耐药株，对于由这类多重耐药菌株引起的呼吸道感染，可采纳多粘菌素或妥布霉素雾化吸入治疗。本组22株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对美罗培南的敏感率为50%，提示亚胺培南与美罗培南耐药机制不尽相同。美罗培南是不经过特别通道扩散的，细菌外膜的低通透性合并主动外排系统起作用是它对PA形成低水平耐药性的主要机制。国外有探讨表明7，对美罗培南耐药的铜绿假单胞菌94.7%对亚胺培南耐药，而对亚胺培南耐药的菌株只有47%对美罗培南耐药，且美罗培南体外活性是亚胺培南的2倍，对部分耐亚胺培南菌株有效，故临床上可美罗培南治疗亚胺培南耐药的菌株，但仍需亲密监测药敏结果。