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1、结核菌素试验第1页，本讲稿共19页 （一）定义：由人工培养的结核杆菌的培养滤液制成的一种生物制品，其有效成份为结核蛋白。（二）使用：3月的婴幼儿接种卡介苗前筛选。测试卡介苗接种后是否有效，于接种后12周进行，阳性者表示接种成功。（其他略）（三）品种：OT、PPD（TB-PPD、BCG-PPD等）。（四）规格：1ml/支、10人份，每毫升含PPD 1g，相当于50个国际结素单位。一、结核菌素（一、结核菌素（Tuberculin）第2页，本讲稿共19页 1旧结素（Old Tuberculin OT）：以Koch最初方法制成的结素。由于其制作简易，性质稳定，所以在较长时间内一直使用。缺点是含杂质多，
2、不易标准化，不同生产单位或同一单位生产的各批效价不一。2纯蛋白衍化物（Pure Protein Derivatine PPD）：用化学方法从结核菌培养液中提取出较纯结核蛋白而制成的一种固体状结素。其纯度高，特异性强，可以标准化，因此逐步取代了旧结素。第3页，本讲稿共19页 （一）方法；皮内注射法（Mantoux法），最大优点是剂量和结果都较准确。（二）部位：左前臂掌侧中间。如有疤痕、血管瘤等无法注射时，可换臂，但需注明。（三）剂量：0.1ml/人次。（四）观察：72小时。二、皮试二、皮试第4页，本讲稿共19页 结素反应属于细胞介导的迟发型（）变态反应，是由结核蛋白与携带免疫信息的小淋巴细胞（致
3、敏T淋巴细胞）接触后产生的变态反应。结核蛋白在生产提取过程中发生部分变性，抗原成份已不完整，是半抗原，其本身不能使动物致敏，只有加上腊质丁（Wax D）才能使动物致敏，而腊质丁正是结核菌外壳的组成成份。故只有当机体受到结核菌或卡介苗感染后方能形成致敏T淋巴细胞而对结素产生反应，而非感染者不对结素产生反应。三、反应机制三、反应机制第5页，本讲稿共19页 结素反应共有二个阶段，第一个阶段是特异性阶段。当结素进入致敏机体后，与循环中的致敏T淋巴细胞接触，刺激T淋巴细胞释放大量免疫活性物质淋巴因子，如巨噬细胞游走抑制因子、转移因子、皮肤反应因子、趋化因子、巨噬细胞凝集因子、淋巴毒素等。第二个阶段是非特
4、异性阶段。释放出的这些活性物质可以促使巨噬细胞向有反应原的地方游走、聚集、发育、繁殖，可以使局部血管扩张，通透性增加，导致局部充血、渗出，第6页，本讲稿共19页 更多的细胞从血管向外浸润，在24小时后局部出现红晕和硬结，4872小时达到高峰，形成肉眼可见的局部皮肤反应，反应强烈者可出现水泡、溃疡，严重者可见前臂肿胀，疼痛、发热、周身不适等。红晕是局部血管扩张所致，对判断机体致敏无意义，而硬结是水肿加巨噬细胞浸润所致，是判断机体致敏的依据。第7页，本讲稿共19页1发热（T37.5）2各种传染病及恢复期。3各种器质性疾病如心脏、血管系统、肾脏、肝脏和胃肠等疾病急性期。4身体极度虚弱者。5患有局部或
5、全身性皮肤病。6防御机制不健全者，如免疫缺陷，丙种球蛋白缺乏者。7其他预防接种不到二周者。8本人或家属有过敏史或变态反应史。9神经及精神不正常，易出现晕厥、休克、癫痫等情况者。四、禁忌症四、禁忌症第8页，本讲稿共19页 1试验前先核对药名、剂量、有效期及婴幼儿，如有沉淀、安瓿破损及过期者不得使用。2用75%酒精消毒皮肤。3应用一次性注射器，刻度和针孔斜面一致向上与皮肤平行刺入皮内，缓慢准确地注射0.1ml（含5U PPD）呈直径约为6-10mm大小白色隆起，不要揉搓，会自行消退，不要用酒精棉球（签）按压针眼。五、操作五、操作第9页，本讲稿共19页 4干扰因素：a、光线：直接日光照射10分钟，结
6、素效价减少80%。1955年WHO曾做过这样的研究，用光照射过的结素为接种卡介苗的学生做测定，同时设对照组。结果发现光照组90%以上反应减弱，较对照组相差最大达8mm。b、温度：保存温度偏高可使结核蛋白变性而降低效价，时间长了则结素会完全失效。c、技术：注射剂量不足，未摇均匀，注射较深、验看不仔细不熟练等。第10页，本讲稿共19页 1时间：72小时。2方法：一看、二摸、三量。看局部有无红晕、双圈、水泡等。对衣袖较紧者，撸起袖子时要稍等片刻再观察，否则会误为阴性。用手指上下、左右轻轻来回触摸，不能挤捏，容易造成疼痛和假阳性。触摸后用尺测量硬结边缘，根据手臂的纵横径垂直交叉各测量一次，以毫米为单位
7、记录，如1012mm。3计算记录硬结平均直径：横径+纵径/2。六、观察六、观察第11页，本讲稿共19页 4结果标准：我国现将结素试验反应结果分为三类：阴性：无硬结或硬结平均直径5mm；阳性：硬结平均直径5-19mm；强阳性：硬结平均直径15mm（成年人为20mm），或有双圈、水泡、溃疡、皮疹等。如无20 mm，但有双圈、水泡、溃疡、皮疹等也为强阳性。第12页，本讲稿共19页 结素试验结果定性与定量之间的关系：“”硬结平均直径5mm或无硬结；“”硬结平均直径5-9mm；“”硬结平均直径10-14mm；“”硬结平均直径15-19mm；“”硬结平均直径20mm，或有水泡等。第13页，本讲稿共19页第14页，本讲稿共19页第15页，本讲稿共19页第16页，本讲稿共19页第17页，本讲稿共19页第18页，本讲稿共19页 12-8冷藏，避光保存，不能直接放在冰上，不与其他药物混放。2安瓿打开后1小时内用完。3试验应在室内进行，避免阳光直射。4注射时或注射后出现晕厥、癔症反应、过敏反应等并发症，应及时给予对症处理。5查PPD反应时，如有水泡、溃疡应保持干燥防止感染。6应记录PPD批号、效期、注射时间、观察时间及72小时结果。七、注意事项七、注意事项第19页，本讲稿共19页