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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 生化检验中的各种空白概念对所谓 试剂空白 样本空白 水空白 杯空白 等 空白 名词,同学们可能会,并结合自己的懂得, 总结如下 , 期望大家指正和补充 : 空白概念区分要点 :* 空白=只含* 的空白吸光度1、试剂空白：由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度,所以从理论上说,全部终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除；试剂本身的吸光度就是 试剂空白；测量方法是依据正常测试的试剂和样本量,把样本换成蒸馏水来测量；在传统手工方法中 , 每次测定都要做至少三个管 : 测定管、标准管、空白管；其中空白管是试剂加蒸馏水,测出来也就是试剂空白；由于 操作环
2、境、仪器状态、试剂稳固性等变异,所以要求每次都要测定试剂空白,称为实时试剂空白；在全自动分析仪上,大体上是模拟手工操作；但很多全自动分析仪为追求速度, 在设计上采纳一些折中方法来测定试剂空白；以日立全系列生化仪为例； 该系列分析仪是做不了实时试剂空白,由于它们全是先加入样本后加试剂,为了折中, 只好在定标时做一个试剂空白,储存起来, 需要扣除试剂空白时再减这个预先储存的值；这种 做法,对于比较稳固的试剂来讲,对结果影响不大；通俗的讲,日立的仪器工作流程中第一是将标本加入到比色杯名师归纳总结 中,然后依次加入R1试剂、R2试剂,所以试剂空白在每个测定项目第 1 页,共 5 页- - - - -
3、- -精选学习资料 - - - - - - - - - 曲线中是无法看到的；但是7170 从 CALIBRATION中是可以看到的,S1ABS就是代表试剂空白吸光度,在 CALIBRATION画面里的下方找到Reaction Monitor反应监察,其中 STD1就是代表试剂空白反应曲线 . 为了减小误差,日立仪器会连续做两次测定,所以你看到FIRST和 SECOND 两条,运算时是取他们的平均值；做试剂空白目的之一就是观看试剂是否稳固, 积极实行措施订正； 对于日立的这种试剂空白测定很多仪器都采纳这种方法,也叫做试剂空白校准；总的说来, 自动生化仪上的试剂空白一般表现为零点吸光度,该吸光度是
4、通过校精确立的；2、样本空白：由于溶血、脂血、黄疸等情形,会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响；所以对样本本身吸光度的测量,即样本空白,可以去除这方面的影响； 测量方法是依据正常测试的试剂和样本量,把试剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量；自动生化仪上, 很难界定样本空白；与排除样本空白有关的大约有如下几点 : 1 在双试剂测定时,加入试剂1 和样品后的吸光度可肯定程度上扣除样本空白,所以有单试剂不能扣除样本空白的说法；2现在优质的试剂的抗干扰才能都比较强,比方有些双试剂,R1加入后先和样本孵育一段时间,将血红蛋白、脂肪、胆红素等反 应掉,再加入 R2开头测定反应； 在肯定范畴内都可以排除样本
5、空白；名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 5 页精选学习资料 - - - - - - - - - 3现代全自动生化仪大多采纳双波长测定；双波长测定的原就是依据 干扰组分 和待测物质 吸取光谱的峰形特点,挑选两个波长和,使干扰组分在这两个波特长的吸光系数相等,而使待测物质在两波特长的吸光系数有显著差异；以两波长分别测定分析溶液的吸光 度, 以两个吸光度值之差 A运算；这也可以扣除一部分样本空白；4有些仪器 , 例如日立系列 , 有特地的“ 血清信息” 功能的设置；做法都是单独占用一个空白通道来运算,3、水空白：这也叫做样品空白校准；比色杯在加入水以后的吸光度； 水空白的意义主
6、要是对光路系统 进行检查和校正,如光源,比色杯等,同时在运算中起到排除“ 杯差”的作用；日立 7060 中的 Cell Blank定标的意义：杯空白测定的就是水空白；定标就是要找出一个参考点,就是一个 K值或 F 值；它是由仪器 状态和试剂状态确定下来的； 当我们测定一个标本时, 无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义, 我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是 酶的活性； 那就要乘上一个 K值,运算并打印出来的结果对我们就有 意义了； K 值就是我们通过定标找出来的；一般上最低要求是由试剂 空白与标准品,经过仪器测定出两个吸光度；名师归纳总
7、结 - - - - - - -第 3 页,共 5 页精选学习资料 - - - - - - - - - K=标准浓度 /A 标准 A试剂空白 标准液的浓度我们是知道的, 这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个 K值；无论什么样的标本, 用其吸光度乘以 K 值我们就得到了答案；因此,K 值具有特别打算性的意义, 可以打算标本的精确性；K值的打算因素：我们看看 K值会受到什么影响呢？第一,标准液的浓度肯定要精确 标准液最好与标本一样是以血清为基质的；其次,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度肯定要精确；吸光度受仪器状况注射器、反应杯、清洗系统、针、搅拌棒等、试剂状况成分、纯度、用量及稳固性的影响,假
8、如您的仪器相当稳固,试剂是影响 K值的一个主要因素；如何确定 K值是正确的？一般我们用质控血清来检查, 最好是两种水平的质控来检查,假如质控结果很好,可以说 ,K 值是精确的,用这个 果也是精确的,所以 K 值特别关键；K值的真面目：K 值运算出来病人的结K值实际上代表了斜率, 截距代表试剂空白, 试剂空白每天都在变化,所以 K 值的稳固性打算您的仪器与试剂,假如仪器与试剂都特别稳名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 5 页精选学习资料 - - - - - - - - - 定,那 K值也很稳固；多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳固性, 质控结果不好, 有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标；酶的项目如何确定 K值：一是运算出来的理论 K 值；K = TV 1000/SV L 二是用有酶项目的定标液得出K值：目前各公司可以供应多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目；名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 5 页