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1、精品学习资源生化检验中的各种空白概念对所谓 试剂空白 样本空白 水空白 杯空白 等 空白 名词,同学们可能会，并结合自己的懂得 , 总结如下 , 期望大家指正和补充 :空白概念区分要点 :* 空白=只含* 的空白吸光度1、试剂空白：由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度，所以从理论上说， 全部终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除；试剂本身的吸光度就是 试剂空白；测量方法是依据正常测试的试剂和样本量，把样本换成蒸馏水来测量；在传统手工方法中 , 每次测定都要做至少三个管 : 测定管、标准管、空白管；其中空白管是试剂加蒸馏水，测出来也就是试剂空白； 由于 操作环境、仪器状态、试剂稳固性等变异，所
2、以要求每次都要测定试剂空白，称为实时试剂空白；在全自动分析仪上，大体上是模拟手工操作；但很多全自动 分析仪为追求速度， 在设计上采纳一些折中方法来测定试剂空白； 以日立全系列生化仪为例； 该系列分析仪是做不了实时试剂空白， 由于它们全是先加入样本后加试剂， 为了折中， 只好在定标时做一个试剂空白，储存起来， 需要扣除试剂空白时再减这个预先储存的值；这种做法，对于比较稳固的试剂来讲，对结果影响不大；通俗的讲，日立的仪器工作流程中第一是将标本加入到比色杯 中，然后依次加入 R1 试剂、R2试剂，所以试剂空白在每个测定项目欢迎下载精品学习资源曲线中是无法看到的；但是 7170 从 CALIBRATI
3、ON中是可以看到的， S1ABS就是代表试剂空白吸光度，在 CALIBRATION画面里的下方找到 Reaction Monitor反应监察，其中 STD1就是代表试剂空白反应曲线. 为了减小误差，日立仪器会连续做两次测定，所以你看到FIRST和 SECON两D 条，运算时是取他们的平均值；做试剂空白目的之一就是观看试剂是否稳固， 积极实行措施订正； 对于日立的这种试剂空白测定很多仪器都采纳这种方法，也叫做试剂空白校准；总的说来， 自动生化仪上的试剂空白一般表现为零点吸光度，该吸光度是通过校精确立的；2、样本空白：由于溶血、脂血、黄疸等情形，会导致样本本身的吸光度对测试 结果造成影响；所以对样
4、本本身吸光度的测量，即样本空白，可以去 除这方面的影响； 测量方法是依据正常测试的试剂和样本量， 把试剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量； 自动生化仪上， 很难界定样本空白；与排除样本空白有关的大约有如下几点:1 在双试剂测定时，加入试剂 1 和样品后的吸光度可肯定程度上扣除样本空白，所以有单试剂不能扣除样本空白的说法；2现在优质的试剂的抗干扰才能都比较强，比方有些双试剂， R1加入后先和样本孵育一段时间，将血红蛋白、脂肪、胆红素等反 应掉，再加入 R2 开头测定反应； 在肯定范畴内都可以排除样本空白；欢迎下载精品学习资源3现代全自动生化仪大多采纳双波长测定；双波长测定的原 就是依据 干扰组分
5、和待测物质 吸取光谱的峰形特点，挑选两个波长和，使干扰组分在这两个波特长的吸光系数相等，而使待测物质在两波特长的吸光系数有显著差异；以两波长分别测定分析溶液的吸光度， 以两个吸光度值之差 A运算；这也可以扣除一部分样本空白；4有些仪器 , 例如日立系列 , 有特地的“血清信息”功能的设置；做法都是单独占用一个空白通道来运算， 这也叫做样品空白校准；3、水空白：比色杯在加入水以后的吸光度； 水空白的意义主要是对光路系统进行检查和校正， 如光源，比色杯等，同时在运算中起到排除“杯差” 的作用；日立 7060 中的 Cell Blank 杯空白测定的就是水空白；定标的意义：定标就是要找出一个参考点，
6、就是一个K 值或 F 值；它是由仪器状态和试剂状态确定下来的； 当我们测定一个标本时， 无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪， 测出来的值只是一个吸光度， 这个吸光度对我们没有什么意义， 我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性； 那就要乘上一个 K 值，运算并打印出来的结果对我们就有意义了； K 值就是我们通过定标找出来的；一般上最低要求是由试剂空白与标准品，经过仪器测定出两个吸光度；欢迎下载精品学习资源K=标准浓度 /A 标准 A 试剂空白 标准液的浓度我们是知道的， 这两个吸光度可以由仪器测出， 这样就得出一个 K 值；无论什么样的标本， 用其吸光度乘以 K 值我们就得到了答案；因
7、此，K 值具有特别打算性的意义， 可以打算标本的精确性；K值的打算因素：我们看看 K 值会受到什么影响呢？第一，标准液的浓度肯定要精确 标准液最好与标本一样是以血清为基质的；其次，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度肯定要精确；吸光度受仪器状况注射器、反应杯、清洗系统、针、搅拌棒等、试剂状况成分、纯度、用量及稳固性的影响，假如您的仪器相当 稳固，试剂是影响 K 值的一个主要因素；如何确定 K 值是正确的？一般我们用质控血清来检查， 最好是两种水平的质控来检查， 假如质控结果很好，可以说 ,K 值是精确的，用这个 K 值运算出来病人的结果也是精确的，所以 K 值特别关键；K值的真面目：K值实际上代表了斜率， 截距代表试剂空白， 试剂空白每天都在变化， 所以 K 值的稳固性打算您的仪器与试剂，假如仪器与试剂都特别稳欢迎下载精品学习资源定，那 K 值也很稳固；多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳固性， 质控结果不好， 有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两点定标；酶的项目如何确定 K 值： 一是运算出来的理论 K 值；K = TV 1000/SV L 二是用有酶项目的定标液得出 K 值：目前各公司可以供应多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目；欢迎下载