《GB 31658.2-2021 食品安全国家标准 动物性食品中氯霉素残留量的测定 液相色谱－串联质谱法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《GB 31658.2-2021 食品安全国家标准 动物性食品中氯霉素残留量的测定 液相色谱－串联质谱法.pdf（12页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、食品安全国家标准动物性食品中氯霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法04中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准备案号：XXXX-XXXX67.050CCS X31658.22021National food safety standardDetermination of chloramphenicol residues in animal derived food byliquid chromatography-tandem mass spectrometric methodGB2021?09?16发布2022?02?01实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发 布国 家 市 场 监 督 管
2、理 总 局中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部G B 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.本文件系首次发布.G B 食品安全国家标准动物性食品中氯霉素残留量的测定液相色谱串联质谱法范围本文件规定了猪、鸡肌肉、肝脏和鱼、虾可食性组织中氯霉素残留检测的制样和液相色谱串联质谱测定方法.本文件适用于猪、鸡肌肉、肝脏和鱼、虾可食组织中氯霉素残留量的测定.规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
3、文件.G B/T 分析实验室用水规格和试验方法术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义.原理试料中残留的氯霉素,采用间位氯霉素或氘代氯霉素作内标,依次用乙腈、氯化钠去蛋白,正己烷脱脂,乙酸乙酯提取,固相萃取柱净化,氮气吹干,液相色谱串联质谱法测定,内标法定量.试剂与材料除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合G B/T 规定的一级水.试剂 乙腈(CHC N):色谱纯.甲醇(CHOH):色谱纯.正己烷(CH).乙酸乙酯(CHC OO CH).氯化钠(N a C l).标准品 氯霉素(C A P,C h l o r a m p h e n i c o l,C H C lNO,C A S号:),含
4、量 .内标:间位氯霉素(m C A P)或氘代氯霉素(C A P D,C h l o r a m p h e n i c o lD,C HDC lNO,C A S号:),含量 .溶液配制 氯化钠溶液:取氯化钠 g,用水溶解并稀释至 mL,临用前配制.水饱和乙酸乙酯溶液:取乙酸乙酯 mL,于 mL棕色试剂瓶中,加水 mL,加盖、振摇、静置,使用时取上层溶液.标准溶液制备 氯霉素标准储备液:取氯霉素约 m g,精密称定,用甲醇适量超声使溶解并稀释定容至 mL容量瓶,制成浓度为 g/mL的标准储备液.保存,有效期年.G B 内标储备液:取内标 m g,精密称定,用甲醇适量超声使溶解并稀释至 mL容量
5、瓶,制成浓度为 g/m L的内标储备液.保存,有效期年.氯霉素标准工作液:精密量取氯霉素标准储备液适量,用流动相稀释成浓度为 n g/mL和 n g/m L的标准工作液.保存,有效期个月.内标工作液:精密量取内标储备液适量,用流动相稀释成浓度为 n g/mL的内标工作液.保存,有效期个月.材料C 固相萃取柱:m g/mL,或相当者.仪器和设备 液相色谱串联质谱仪:配电喷雾离子源.分析天平:感量 g和 g.涡旋混合器.组织匀浆器.低温离心机.样品浓缩仪.固相萃取装置.试料的制备与保存 试料的制备取适量新鲜或解冻的空白或供试组织,绞碎,并使均质.a)取均质的供试样品,作为供试试料;b)取均质的空白
6、样品,作为空白试料;c)取均质的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试料.试料的保存 以下保存.测定步骤 提取取试料g(准确至 g),加内标工作液 L、乙腈mL、氯化钠溶液mL,涡旋振荡m i n,r/m i n离心 m i n,取上清液,残渣重复提取次,合并上清液.加正己烷mL,涡旋振荡m i n,r/m i n离心 m i n,弃去上层液,正己烷重复处理次.加水饱和的乙酸乙酯溶液mL,涡旋振荡m i n,r/m i n离心 m i n,上层液转移到 mL离心管中,重复提取次,合并提取液,氮气吹干,加水乙腈()mL使溶解,备用.净化取固相萃取柱,依次用甲醇、水各 mL预洗.取备用
7、液过柱,加水洗柱次,每次mL,加流动相m L,以m L/m i n速度洗脱,收集洗脱液.加水饱和乙酸乙酯溶液mL,涡旋振荡m i n,r/m i n离心m i n,取上层液,重复处理次,合并上层溶液,氮气吹干.加流动相 mL溶解,滤过,供液相色谱串联质谱测定.标准曲线的制备按表精 密 量 取 氯 霉 素 标 准 工 作 液 和 内 标 工 作 液 适 量,用 流 动 相 稀 释 成 氯 霉 素 浓 度 分 别 为 n g/m L、n g/mL、n g/mL、n g/mL、n g/mL、内标浓度为 n g/mL的标准溶液,供液相色谱法串联质谱法测定.以测得特征离子质量色谱峰外标和内标峰面积比为纵
8、坐标、对应的标准溶液浓G B 度为横坐标,绘制标准曲线.求回归方程和相关系数.表标准溶液配制方法项目 n g/m L n g/m L n g/m L n g/m L n g/m L n g/m LC A P L L n g/m LC A P L L L n g/m LC A P D L L L L L 测定 液相色谱条件a)色谱柱:C(mm mm,m);b)流动相:甲醇水();c)流速:mL/m i n;d)柱温:;e)进样量:L;f)运行时间:m i n.质谱条件a)离子源:电喷雾离子源;b)扫描方式:负离子扫描;c)检测方式:多反应监测;d)电离电压:k V;e)源温:;f)碰撞气:氩气
9、m b a r;g)脱溶剂气速:L/h;h)锥孔气速:L/h;i)数据采集窗口:m i n;j)驻留时间:s;k)测试药物定性离子对、定量离子对及对应的锥孔电压和碰撞能量见表.表氯霉素定性离子对、定量离子对及对应的锥孔电压和碰撞能量目标化合物母离子m/z子离子m/z锥孔电压V碰撞能量e V氯霉素(C A P)a 间位氯霉素m C A P 氘代氯霉素(C A P D)注:准确质荷比在每次实验前进行确认,内标可任选一种.a为定量离子.测定法取试料溶液和相应的标准溶液,作单点或多点校准,按内标法以色谱峰面积定量.氯霉素特征离子质谱图见图A ,标准溶液中各特征离子的质量色谱图分别见图A .空白试验取空
10、白试料,除不加标准溶液外,采用相同的测定步骤进行平行操作.结果计算试料中待测物残留量按标准曲线或公式()计算.G B XAA iSCSCiSVAiSASC iSm()式中:X 试样中氯霉素残留量的数值,单位为微克每千克(g/k g);AS 对照溶液中氯霉素的峰面积;A iS 对照溶液中内标的峰面积;CS 对照溶液氯霉素标准品浓度的数值,单位为纳克每毫升(n g/mL);C iS 对照溶液中氯霉素内标浓度的数值,单位为纳克每毫升(n g/mL);CiS 供试溶液中氯霉素内标浓度的数值,单位为纳克每毫升(n g/mL);A 供试溶液中氯霉素的峰面积;AiS 试样溶液氯霉素内标的峰面积;V 溶解残余物所用溶液体积的数值,单位为毫升(mL);m 试样质量的数值,单位为克(g).检测方法的灵敏度、准确度和精密度 灵敏度本方法氯霉素的检测限为 g/k g,定量限为 g/k g.准确度本方法在 g/k g g/k g添加浓度的回收率为 .精密度本方法批内相对标准偏差,批间相对标准偏差.G B 附录A(资料性)氯霉素特征离子质谱图氯霉素特征离子质谱图见图A ,标准溶液中氯霉素及内标特征离子质量色谱图见图A .图A 氯霉素特征离子质谱图G B 图A 标准溶液中氯霉素及内标特征离子质量色谱图31658.22021GBGB31658.22021书 书 书1?