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1、平面色谱法平面色谱法3-1 概述(概述(1)薄层色谱法薄层色谱法指固定相涂布于平面载体上,流动相通常是借助毛细管作指固定相涂布于平面载体上,流动相通常是借助毛细管作用流经固定相,使被分离的物质保留在固定相上的色谱方法用流经固定相,使被分离的物质保留在固定相上的色谱方法分类分类纸色谱纸色谱薄层色谱薄层色谱薄层电泳薄层电泳3-1 概述(概述(4)TLC与与HPLC的比较的比较固定相与流动相固定相与流动相样品的预处理样品的预处理进样进样色谱分离色谱分离定量定量固定相与流动相固定相与流动相HPLC流动相线速恒定流动相线速恒定流动相选择受限流动相选择受限固定相与流动相性质影响峰形固定相与流动相性质影响峰
2、形和分离度和分离度定距洗脱色谱定距洗脱色谱,并非所有组分,并非所有组分都能被检测,分析时间不可控都能被检测,分析时间不可控柱子反复使用柱子反复使用TLC薄层板各处流量不同薄层板各处流量不同流动相选择限制小流动相选择限制小吸附剂性质和流动相毛细管运动吸附剂性质和流动相毛细管运动情况影响分离度情况影响分离度定时展开色谱定时展开色谱,色谱图上各组分,色谱图上各组分均能被检测,分析时间可控均能被检测,分析时间可控薄层板一次使用,分离过程无交薄层板一次使用,分离过程无交叉污染,多样品同时分离叉污染,多样品同时分离样品预处理样品预处理HPLC防止色谱柱被污染,预处理过防止色谱柱被污染,预处理过程复杂而严格
3、程复杂而严格TLC固定相是一次性的固定相是一次性的,因此可不,因此可不需预处理,但如待测组分含量需预处理,但如待测组分含量太低、杂质太多影响待测组分太低、杂质太多影响待测组分的分离或干扰薄层板背景时可的分离或干扰薄层板背景时可采用萃取、吸附及衍生等方式采用萃取、吸附及衍生等方式进行处理进行处理可用作可用作HPLC前的预分离富集前的预分离富集进样进样HPLC对溶样溶剂及样品浓度有严格对溶样溶剂及样品浓度有严格要求要求可自动进样,每次一个样品可自动进样,每次一个样品TLC溶样溶剂可任意选择,点样体溶样溶剂可任意选择,点样体积是唯一需要严格控制的参数积是唯一需要严格控制的参数可自动进样,每次可多个样
4、品可自动进样,每次可多个样品色谱分离色谱分离HPLC每次进一个样,分析和平衡时每次进一个样,分析和平衡时间长间长恒组分洗脱适用极性范围窄的恒组分洗脱适用极性范围窄的样品;梯度洗脱适于极性范围样品;梯度洗脱适于极性范围宽的样品并需要更多的时间宽的样品并需要更多的时间反相色谱法最常用反相色谱法最常用使用相同固定相和流动相时重使用相同固定相和流动相时重现性较高现性较高TLC同时分析多个样品、方便灵活同时分析多个样品、方便灵活 1 适于各类物质的分离适于各类物质的分离 1 1正相(吸附)正相(吸附)色谱占主导色谱占主导对复杂样品分离能力好对复杂样品分离能力好定定 量量HPLC均相液体,符合比尔定律均相
5、液体,符合比尔定律 1 在线检测,线性范围宽在线检测,线性范围宽TLC不透明液体,不符合比尔不透明液体,不符合比尔定律,需溶解后定量定律,需溶解后定量离线检测,大量样品分析离线检测,大量样品分析时方便快捷时方便快捷原位测定(薄层扫描仪)原位测定(薄层扫描仪)普遍采用紫外普遍采用紫外-可见检测器可见检测器薄层扫描仪的应用(薄层扫描仪的应用(1)黄连中小檗碱含量的荧光扫描测定(定量)黄连中小檗碱含量的荧光扫描测定(定量)甲苯甲苯-醋酸乙酯醋酸乙酯-甲醇甲醇-异丙醇异丙醇-水水(6:3:2:1.5:0.3)氨蒸气预平衡)氨蒸气预平衡线性范围:线性范围:18.28 ng 329.04 ng回归方程:回
6、归方程:IF=720.146+34.942m r=0.998 薄层扫描仪的应用(薄层扫描仪的应用(2)巴比妥盐的三维紫外光谱巴比妥盐的三维紫外光谱-薄层色谱图(定性)薄层色谱图(定性)与标准品的紫外吸收图比较(在与标准品的紫外吸收图比较(在Rf相同的前提下)提高定性可靠性相同的前提下)提高定性可靠性3-1 概述(概述(5)平面色谱法操作流程平面色谱法操作流程吸附剂或载体的选吸附剂或载体的选择及薄层的制备择及薄层的制备滤纸或薄层板的处理滤纸或薄层板的处理点样点样样品制备样品制备色谱前衍生化色谱前衍生化滤纸或薄层板预平衡滤纸或薄层板预平衡展开展开定位定位定性定性定量定量3-1 概述(概述(6)薄层
7、色谱法的基本材料及设备薄层色谱法的基本材料及设备滤纸及薄层板滤纸及薄层板(自制或市售)(自制或市售)涂布器涂布器点样器点样器(定性:普通毛细管;定量:微量注射器或微量定量毛细管)(定性:普通毛细管;定量:微量注射器或微量定量毛细管)展开室展开室显色器显色器薄层扫描仪薄层扫描仪3-2 薄层色谱系统薄层色谱系统薄层材料薄层材料未改性固定相未改性固定相改性固定相改性固定相载板载板粘结剂粘结剂荧光指示剂荧光指示剂薄层色谱操作过程薄层色谱操作过程薄层板的制备(铺板)薄层板的制备(铺板)活化活化点样点样展开展开定位、洗脱定位、洗脱薄层材料(薄层材料(1)未改性固定相未改性固定相硅胶:硅胶:最常用极性吸附剂
8、,具有表面吸附活性中心,略带酸性最常用极性吸附剂,具有表面吸附活性中心,略带酸性氧化铝:常用极性吸附剂,具表面活性,略带碱性氧化铝:常用极性吸附剂,具表面活性,略带碱性硅藻土:中性吸附剂硅藻土:中性吸附剂纤维素:液液分配色谱担体(水为固定相),具有一定粘性纤维素:液液分配色谱担体(水为固定相),具有一定粘性聚酰胺:特殊有机薄层材料聚酰胺:特殊有机薄层材料薄层材料(薄层材料(2)表面改性固定相表面改性固定相疏水改性硅胶:疏水改性硅胶:烷基键合硅胶,疏水性随烷基链长和改性程度增加而烷基键合硅胶,疏水性随烷基链长和改性程度增加而加强。反相色谱采用高含水溶剂系统,需低改性硅胶,使溶剂体系在加强。反相色
9、谱采用高含水溶剂系统,需低改性硅胶,使溶剂体系在较大范围内可调(增加色谱选择性)较大范围内可调(增加色谱选择性)亲水性改性硅胶:亲水性改性硅胶:介于极性和疏水性改性吸附剂间的色谱选择性,极介于极性和疏水性改性吸附剂间的色谱选择性,极性排序:硅胶性排序:硅胶氨基氨基氰基氰基二羟基二羟基表面改性纤维素:乙酰化纤维素(乙酰化程度可变)表面改性纤维素:乙酰化纤维素(乙酰化程度可变)薄层材料(薄层材料(3)载板载板具有一定机械强度、化学惰性、耐一定温度、表面平整、厚度具有一定机械强度、化学惰性、耐一定温度、表面平整、厚度均匀、价格便宜均匀、价格便宜玻板:玻板:5cm 10cm、10cm 20cm、20c
10、m 20cm光滑、平整、洗净后不附水珠、干燥光滑、平整、洗净后不附水珠、干燥薄层材料(薄层材料(4)粘结剂粘结剂加强固定相颗粒的附着力,增加薄层板润湿性,改善色谱分离加强固定相颗粒的附着力,增加薄层板润湿性,改善色谱分离无机粘结剂:煅石膏无机粘结剂:煅石膏有机粘结剂:羧甲基纤维素钠(有机粘结剂:羧甲基纤维素钠(CMC)0.8%CMC溶液配均浆涂铺的薄层板强度高,色谱分离性能好溶液配均浆涂铺的薄层板强度高,色谱分离性能好注意:注意:不适合浓硫酸显色、易霉变降解不适合浓硫酸显色、易霉变降解硅胶硅胶G:含含13 15%煅石膏煅石膏制备硅胶制备硅胶G:含含30%煅石膏煅石膏氧化铝氧化铝G:含含9%煅石
11、膏煅石膏硅胶硅胶H:不含粘结剂不含粘结剂薄层材料(薄层材料(5)荧光指示剂荧光指示剂适当波长激发光照射下可产生均匀的荧光背景,清晰显示化合物暗斑适当波长激发光照射下可产生均匀的荧光背景,清晰显示化合物暗斑用量:用量:1.5 2.0%短波荧光指示剂:短波荧光指示剂:254 nm紫外光激发发出荧光紫外光激发发出荧光譬如锰激活的硅酸锌譬如锰激活的硅酸锌长波荧光指示剂:长波荧光指示剂:366 nm紫外光激发发出荧光紫外光激发发出荧光譬如银激发的硫化锌、硫化镉譬如银激发的硫化锌、硫化镉五味子提取物五味子提取物TLC石油醚(石油醚(30-60)-甲酸乙酯甲酸乙酯-甲酸(甲酸(15:5:1)254nm 举举
12、 例例硅胶硅胶H不含粘合剂不含粘合剂硅胶硅胶G硅胶和煅石膏混合而成硅胶和煅石膏混合而成硅胶硅胶HF254不含粘合剂,含荧光指示剂不含粘合剂,含荧光指示剂 254nm波长照射下呈现荧光背景波长照射下呈现荧光背景硅胶硅胶GF254同时含粘合剂和荧光指示剂同时含粘合剂和荧光指示剂 254nm波长照射下呈现荧光背景波长照射下呈现荧光背景硅胶硅胶HF254+366不含粘合剂,含荧光指示不含粘合剂,含荧光指示 254nm和和356nm波长呈现荧光背景波长呈现荧光背景薄层色谱操作过程(薄层色谱操作过程(1)薄层制备(铺板)薄层制备(铺板)1份吸附剂(硅胶、氧化铝)份吸附剂(硅胶、氧化铝)+3份粘合剂份粘合剂
13、+水水搅拌至均匀糊状(无气搅拌至均匀糊状(无气泡和板结)泡和板结)均匀涂布薄层板均匀涂布薄层板硅胶硅胶G:自含粘合剂(含自含粘合剂(含5 10%煅石膏),仅加水煅石膏),仅加水硅胶硅胶H:不含黏合剂,需另加不含黏合剂,需另加CMC(0.4 1%澄清水溶液)澄清水溶液)预制板效果最佳(贵)预制板效果最佳(贵)/用涂布器自制亦可用涂布器自制亦可薄层色谱操作过程(薄层色谱操作过程(2)活化活化将晾干后的薄层板置于将晾干后的薄层板置于110 C烘烘30min,放在,放在干燥器干燥器中备用中备用吸附剂活性越强,活性级别越低,最好为吸附剂活性越强,活性级别越低,最好为2-3级级(共(共5级)级)赫曼尼柯法
14、测定活性赫曼尼柯法测定活性偶氮苯偶氮苯30 mg对甲基偶氮苯、苏丹红、苏丹黄、对氨基偶氮苯各对甲基偶氮苯、苏丹红、苏丹黄、对氨基偶氮苯各20 mg,溶于,溶于50 mL CCl4中配成实验溶液,在氧化铝或硅胶薄层上,以中配成实验溶液,在氧化铝或硅胶薄层上,以CCl4为展开剂展开,然后计算各染料组分的比移值,对照为展开剂展开,然后计算各染料组分的比移值,对照参照表参照表确定薄层确定薄层活性。活性。预制板及非吸附原理的薄层板不要活化预制板及非吸附原理的薄层板不要活化薄层色谱操作过程(薄层色谱操作过程(3)点样点样成功分离和精确定量的关键成功分离和精确定量的关键点样要求:点样要求:点样远点应小而圆,
15、距板边缘点样远点应小而圆,距板边缘2 cm需要时可多次点样(前次点样溶剂挥干),防止边缘效应需要时可多次点样(前次点样溶剂挥干),防止边缘效应点样量无超载,防止拖尾点样量无超载,防止拖尾点样勿伤及薄层表面点样勿伤及薄层表面点样装置:点样装置:容量毛细管、自动薄层点样仪等容量毛细管、自动薄层点样仪等薄层色谱操作过程(薄层色谱操作过程(4)展开展开展开原理:展开原理:差速迁移差速迁移展开方式:展开方式:上行展开(最常用),还有其它多种形式上行展开(最常用),还有其它多种形式展开过程:展开过程:展开室预先用展开剂饱和(平衡系统)展开室预先用展开剂饱和(平衡系统)点样薄板一段浸点样薄板一段浸入展开剂(
16、原点不能没入展开剂)入展开剂(原点不能没入展开剂)展开(溶剂前沿距边缘展开(溶剂前沿距边缘0.5 1 cm时终止)时终止)挥尽溶剂挥尽溶剂溶剂蒸气的影响溶剂蒸气的影响未经溶剂蒸气预平衡未经溶剂蒸气预平衡展开室预先用溶剂蒸气平衡展开室预先用溶剂蒸气平衡人参皂甙的薄层色谱人参皂甙的薄层色谱 展开溶剂的蒸气也参与色谱展开展开溶剂的蒸气也参与色谱展开的全过程。(固相板上的吸附的全过程。(固相板上的吸附剂如硅胶、液相展开剂、气相剂如硅胶、液相展开剂、气相溶剂蒸气三相相互作用)溶剂蒸气三相相互作用)相对湿度的影响相对湿度的影响苍术提取物薄层色谱图苍术提取物薄层色谱图可用浓硫酸可用浓硫酸-水体系调节水体系调
17、节温度的影响温度的影响淫羊藿薄层色谱淫羊藿薄层色谱*宝藿苷宝藿苷薄层色谱操作过程(薄层色谱操作过程(5)定位定位/洗脱洗脱定位方法定位方法光学检出法:荧光显示、荧光淬灭光学检出法:荧光显示、荧光淬灭蒸气检出法:碘蒸气法(可逆,不可逆反应)蒸气检出法:碘蒸气法(可逆,不可逆反应)试剂显色法:喷雾显色法、浸渍显色法试剂显色法:喷雾显色法、浸渍显色法洗脱方法洗脱方法取下取下TLC上分离的斑点、用溶剂将化合物的斑点从吸附剂上定量洗脱上分离的斑点、用溶剂将化合物的斑点从吸附剂上定量洗脱下来,收集洗脱液并用适当方法测定。下来,收集洗脱液并用适当方法测定。拍照拍照最佳数据保存方法最佳数据保存方法连翘薄层色谱
18、连翘薄层色谱3-3 薄层色谱参数薄层色谱参数定性参数及于相平衡参数关系定性参数及于相平衡参数关系比移值;相对比移值比移值;相对比移值板效参数板效参数理论塔板数;理论板高理论塔板数;理论板高分离评价参数分离评价参数分离度;分离数分离度;分离数定性参数及于相平衡参数关系(定性参数及于相平衡参数关系(1)比移值比移值溶剂前沿溶剂前沿起始线起始线/原点原点展开剂展开剂有有颜颜色色或或显显色色同一物质在相同薄层条件下同一物质在相同薄层条件下Rf值相等。值相等。定性参数及于相平衡参数关系(定性参数及于相平衡参数关系(2)相平衡参数相平衡参数分配系数分配系数分配比(保留因子、容量因子)分配比(保留因子、容量
19、因子)与温度、组分及两相性质有关,与温度、组分及两相性质有关,K值不同分离的前提值不同分离的前提Vm:薄层板中流动相的体积:薄层板中流动相的体积Vs:不同模式色谱含义不同,:不同模式色谱含义不同,分配色谱中指固定相的体积分配色谱中指固定相的体积衡量薄层板对待测组分保留能力的重要参数衡量薄层板对待测组分保留能力的重要参数定性参数及于相平衡参数关系(定性参数及于相平衡参数关系(3)比移值与相平衡参数关系比移值与相平衡参数关系推导:推导:设展开剂流速为设展开剂流速为u,则组分的平均流速,则组分的平均流速设展开时间为设展开时间为t,则:,则:薄层条件确定情况下,薄层条件确定情况下,K,k,R组分难洗脱
20、组分难洗脱关于关于Rf的几点讨论(的几点讨论(1)Rf与与K和和k有关,即与组分性质、薄层板和展开剂性质有关有关,即与组分性质、薄层板和展开剂性质有关色谱条件一定,色谱条件一定,Rf只与组分性质有关只与组分性质有关(TLC定性参数)定性参数)K,k,R组分难洗脱组分难洗脱改变展开剂极性可以改变改变展开剂极性可以改变K和和k,进一步改变,进一步改变RfRf=0,K=,组分极性过大(不展开),可增加展开剂的极性,如仍,组分极性过大(不展开),可增加展开剂的极性,如仍不能提高不能提高Rf,则组分极性过高,可更换低活性硅胶板或用反相薄层板,则组分极性过高,可更换低活性硅胶板或用反相薄层板以增大以增大R
21、f关于关于Rf的几点讨论(的几点讨论(2)Rf=1,K=0,组分极性过小(不吸附),可降低展开剂极性(或增加,组分极性过小(不吸附),可降低展开剂极性(或增加硅胶的吸附活性)降低硅胶的吸附活性)降低Rf对于极性组分,当采用硅胶吸附薄层板时:对于极性组分,当采用硅胶吸附薄层板时:展开剂极性展开剂极性,k,R(容易洗脱)(容易洗脱)展开剂极性展开剂极性 ,k ,R (不容易洗脱)(不容易洗脱)Rf范围:范围:0 Rf 1;Rf 0.2 0.8(常用);(常用);Rf 0.3 0.5(最佳)(最佳)定性参数及于相平衡参数关系(定性参数及于相平衡参数关系(4)相对比移值相对比移值Rx讨论:讨论:相对比
22、移值相对比移值Rx与组分和参考物性质(溶解度等)及色谱条件有关,范与组分和参考物性质(溶解度等)及色谱条件有关,范围可以大于或者小于围可以大于或者小于1由于参考物与待测物采用完全形同的色谱条件展开,可以消除系统误由于参考物与待测物采用完全形同的色谱条件展开,可以消除系统误差,大大提高结果的重复性和可靠性差,大大提高结果的重复性和可靠性参考物既可以是加入样品的纯物质,亦可以是样品中某一已知组分参考物既可以是加入样品的纯物质,亦可以是样品中某一已知组分板效参数板效参数理论塔板数理论塔板数理论塔板高度理论塔板高度D:原点到组分斑点中心的距离:原点到组分斑点中心的距离W:组分斑点的宽度:组分斑点的宽度
23、代表色谱柱分离效能的指标,平面色谱的代表色谱柱分离效能的指标,平面色谱的n值只要取决于色谱系统的值只要取决于色谱系统的物理特性如物理特性如吸附剂粒度吸附剂粒度、均匀度均匀度、活度,展开剂流速及展开方式等、活度,展开剂流速及展开方式等L:原点到展开剂前言的距离:原点到展开剂前言的距离分离评价参数(分离评价参数(1)分离度(分辨率)分离度(分辨率)两相邻斑点中心距离与两斑点平均宽度(直径)的比值两相邻斑点中心距离与两斑点平均宽度(直径)的比值TLC分离度与比移值关系分离度与比移值关系影响影响TLC分离的影响因素(分离的影响因素(1)色谱分离方程色谱分离方程柱效:柱效:取决于吸附剂的性能取决于吸附剂
24、的性能主要影响斑点的分散程度,主要影响斑点的分散程度,n,斑点集中,斑点集中,R 选择性因子选择性因子:取决于展开剂(及吸附剂)种类与组成取决于展开剂(及吸附剂)种类与组成应选择适宜的流动相和活性适宜的薄层板使应选择适宜的流动相和活性适宜的薄层板使 1使性质接近组分的使性质接近组分的K产生较大差别是分离条件优劣的量度产生较大差别是分离条件优劣的量度影响影响TLC分离的影响因素(分离的影响因素(2)容量因子容量因子k:取决于展开剂的极性取决于展开剂的极性最佳分离条件最佳分离条件Rf=0.3 0.5,可用范围,可用范围0.2 0.9调整展开剂的极性或改变薄层板的活性,可使得被分离组调整展开剂的极性
25、或改变薄层板的活性,可使得被分离组分的分的Rf落在需要空间落在需要空间分离评价参数(分离评价参数(2)分离数分离数SNa:近似等于原点到溶剂前沿的距离:近似等于原点到溶剂前沿的距离W0(1/2)和和W1(1/2):表示:表示Rf=0和和1的斑点宽度的一半的斑点宽度的一半在相邻斑点分离度为在相邻斑点分离度为1.177时,在时,在Rf=0-1两组分斑点间所能容纳的斑点个数两组分斑点间所能容纳的斑点个数SN是衡量是衡量TLC分离容量的重要技术参数;分离容量的重要技术参数;斑点越集中,在相同展距中能分离的组分数越多,表明板效越高,色谱斑点越集中,在相同展距中能分离的组分数越多,表明板效越高,色谱板的容
26、量越大板的容量越大经典薄层板的经典薄层板的SN7 10,高效薄层板,高效薄层板SN10 203-4 薄层色谱条件选择薄层色谱条件选择溶剂对洗脱强度的影响溶剂对洗脱强度的影响溶剂对分离度的影响溶剂对分离度的影响薄层板活度级别选择薄层板活度级别选择吸附薄层板溶剂系统选择步骤吸附薄层板溶剂系统选择步骤TLC色谱条件选择原则色谱条件选择原则TLC展开系统的溶剂优化展开系统的溶剂优化溶剂对洗脱强度的影响溶剂对洗脱强度的影响吸附色谱和正相分配色谱吸附色谱和正相分配色谱溶剂极性越大,溶剂强度越大,洗脱能力越强溶剂极性越大,溶剂强度越大,洗脱能力越强对于反相分配色谱对于反相分配色谱溶剂极性越大,溶剂强度越小,
27、洗脱能力弱溶剂极性越大,溶剂强度越小,洗脱能力弱溶剂对分离度的影响溶剂对分离度的影响溶剂的极性影响溶剂的极性影响Rf或或k,溶剂种类和组成影响,溶剂种类和组成影响 溶剂强度越小,溶剂强度越小,Rf越大,越大,k越大越大溶剂种类和组成影响溶剂种类和组成影响 薄层板活度级别选择薄层板活度级别选择极性化合物极性化合物用吸附薄层色谱分离时,宜选用用吸附薄层色谱分离时,宜选用吸附活性小吸附活性小的的(活度级别大的)薄层板、(活度级别大的)薄层板、极性大的强洗脱剂极性大的强洗脱剂展开,否则展开,否则Rf太小太小非极性化合物非极性化合物用吸附薄层色谱分离时,宜选用用吸附薄层色谱分离时,宜选用吸附活性大吸附活
28、性大的(活度级别小的)薄层板、的(活度级别小的)薄层板、极性小的弱洗脱剂极性小的弱洗脱剂展开展开中等极性化合物宜选择中间条件展开中等极性化合物宜选择中间条件展开以感兴趣的以感兴趣的Rf是否在是否在0.3 0.5为衡量标准为衡量标准薄层布罗克曼活性级与材料含水量的关系薄层布罗克曼活性级与材料含水量的关系布罗克曼活性级布罗克曼活性级活性强弱活性强弱薄层材料含水量(薄层材料含水量(w/w%)硅胶硅胶氧化铝氧化铝强强 弱弱005315625103815硅胶与氧化铝的吸附活性与含水量有关,含水量越多,活性越低,活度硅胶与氧化铝的吸附活性与含水量有关,含水量越多,活性越低,活度级别越高。一般分为五级,常用
29、硅胶为级别越高。一般分为五级,常用硅胶为 级。含水量超过级。含水量超过17%,吸附,吸附色谱色谱分配色谱分配色谱吸附薄层溶剂系统选择步骤吸附薄层溶剂系统选择步骤根据被分析物类别和薄层板的活度级别选择溶剂系统,是感兴根据被分析物类别和薄层板的活度级别选择溶剂系统,是感兴趣斑点的趣斑点的Rf落在落在0.3 0.5的适宜范围内。的适宜范围内。若若Rf0.5,则减少极性溶剂比例;,则减少极性溶剂比例;若若Rf0.3,则增加极性溶剂比,则增加极性溶剂比例例当当Rf合适后,进行等强度溶剂系统的替换直到合适后,进行等强度溶剂系统的替换直到R符合要求符合要求。如二元溶剂系统无法满足要求,可选三元或四原溶剂系统
30、,或如二元溶剂系统无法满足要求,可选三元或四原溶剂系统,或在二元溶剂系统中加入少量酸碱改善在二元溶剂系统中加入少量酸碱改善R,一般分析酸性物质加,一般分析酸性物质加少量醋酸,分析碱性物质加少量氨水。少量醋酸,分析碱性物质加少量氨水。TCL色谱条件的选择原则色谱条件的选择原则活活泼泼吸吸附附剂剂不活泼不活泼极极性性非极性非极性展展开开剂剂非非极极性性极性极性被被分分离离 物物质质非极性组分非极性组分强吸附剂强吸附剂非极性展开剂非极性展开剂弱吸附剂弱吸附剂极性组分极性组分极性展开剂极性展开剂3-5 薄层色谱的应用(薄层色谱的应用(1)中药品种的鉴定:中药品种的鉴定:例北柴胡与其它同属近缘植物的鉴别例北柴胡与其它同属近缘植物的鉴别可见光谱可见光谱UV366nm荧光光谱荧光光谱3-5 薄层色谱的应用(薄层色谱的应用(2)中成药鉴别中成药鉴别3-5 薄层色谱的应用(薄层色谱的应用(3)