常用实验室检查免疫说课讲解.ppt

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1、常用实验室检查免疫n n二、血清补体检查二、血清补体检查n n 补体(补体(C C)是血清中一组具有酶原活)是血清中一组具有酶原活性的糖蛋白,由传统途径的性的糖蛋白,由传统途径的9 9种成分种成分C1C1(C1qC1q、C1rC1r、C1sC1s)C9 C9组成。补体、组成。补体、体液因子或免疫细胞共同参与灭活病原体体液因子或免疫细胞共同参与灭活病原体的免疫反应,也参与破坏自身组织或自身的免疫反应,也参与破坏自身组织或自身细胞而造成的免疫损伤。细胞而造成的免疫损伤。n n(一)总补体溶血活性测定(一)总补体溶血活性测定n n 总补体溶血活性总补体溶血活性(CH(CH5050)所反映的主要是补体

2、所反映的主要是补体9 9种成分的综合水平。一般以种成分的综合水平。一般以50%50%的溶血率(的溶血率(CHCH5050 )作为判别点。)作为判别点。n n 临床意义临床意义 n n (1 1)CH50CH50增高增高 见于急性炎症、组织损伤、见于急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤。恶性肿瘤。n n (2 2)CH50CH50减低减低 见于肾小球肾炎、自身免疫见于肾小球肾炎、自身免疫性疾病、感染性疾病、慢性肝病等。性疾病、感染性疾病、慢性肝病等。n n(二)血清补体(二)血清补体C3C3测定测定n n 血清补体血清补体C3C3测定测定(C3)(C3)是血清中含量最高是血清中含量最高的补体成分,在补体

3、经典激活途径与旁路途径的补体成分,在补体经典激活途径与旁路途径中均发挥重要作用。补体中均发挥重要作用。补体C3C3是急性时相反应蛋是急性时相反应蛋白。白。n n临床意义临床意义 n n (1 1)增高)增高 见于急性炎症、传染病早期、见于急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、排异反应。急性组织损伤、恶性肿瘤、排异反应。n n (2 2)减低)减低 见于见于急性肾小球肾炎急性肾小球肾炎、狼疮性、狼疮性肾炎、系统性红斑狼疮活动期、肝硬化等。肾炎、系统性红斑狼疮活动期、肝硬化等。n n(三)血清补体(三)血清补体C4C4测定测定n n (1 1)增高)增高 见于急性风湿热、皮肌炎、见于急性风

4、湿热、皮肌炎、关节炎等。关节炎等。n n (2 2)减低)减低 见于狼疮性肾炎、自身免疫见于狼疮性肾炎、自身免疫性肝炎、胰腺癌、多发性硬化症、类风湿性性肝炎、胰腺癌、多发性硬化症、类风湿性关节炎等。关节炎等。n n 三、病毒性肝炎血清标志物检查三、病毒性肝炎血清标志物检查n n 病毒性肝炎主要有病毒性肝炎主要有5 5型,相应的肝炎的型,相应的肝炎的病原体有甲型肝炎病毒(病原体有甲型肝炎病毒(HAVHAV)、乙型肝炎)、乙型肝炎病毒(病毒(HBVHBV)、丙型肝炎病毒()、丙型肝炎病毒(HCVHCV)、丁)、丁型肝炎病毒(型肝炎病毒(HDVHDV)和戊型肝炎病毒)和戊型肝炎病毒(HEVHEV)。

5、除乙型肝炎病毒为双链)。除乙型肝炎病毒为双链DNADNA病毒病毒外,其余均为单链外,其余均为单链RNARNA病毒。由于各种肝炎病毒。由于各种肝炎病毒的血清标志物有其特异性,检测中无病毒的血清标志物有其特异性,检测中无交叉反应,故具有重要的临床诊断意义。交叉反应,故具有重要的临床诊断意义。n n(一)(一)(一)(一)甲型肝炎病毒抗体检查甲型肝炎病毒抗体检查n n 1.1.参考值参考值 ELISA ELISA法:阴性法:阴性n n 2.2.临床意义临床意义 n n (1 1)抗)抗HAVIgMHAVIgM阳性:是早期诊断甲型病毒阳性:是早期诊断甲型病毒性肝炎的特异性指标,于发病后性肝炎的特异性指

6、标,于发病后1 1 2 2周内出周内出现,现,3 3个月后滴度减低,个月后滴度减低,6 6个月后不易检出。个月后不易检出。n n (2 2)抗)抗HAVIgGHAVIgG阳性:提示既往感染,可作阳性:提示既往感染,可作为甲型病毒性肝炎的流行病学调查的指标。为甲型病毒性肝炎的流行病学调查的指标。n n(二)乙型肝炎病毒血清标志物检查(二)乙型肝炎病毒血清标志物检查n n (1 1)HBsAg HBsAgHBsAg HBsAg阳性,常作为感染阳性,常作为感染性标志之一。性标志之一。HBsAgHBsAg阳性见于:阳性见于:乙型肝炎乙型肝炎潜伏期和急性期;潜伏期和急性期;慢性迁延性肝炎、慢慢性迁延性肝

7、炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌;性活动性肝炎、肝硬化、肝癌;慢性慢性HBsAgHBsAg携带者。携带者。n n (2 2)抗)抗-HBs-HBs抗体抗体 在在HBsAgHBsAg消失后数消失后数周血清中才出现抗周血清中才出现抗-HBs-HBs,阳性时表示对乙,阳性时表示对乙型肝炎病毒具有保护性免疫作用。抗型肝炎病毒具有保护性免疫作用。抗-HBs-HBs阳性见于:阳性见于:既往曾感染过既往曾感染过HBVHBV,现已有一,现已有一定的免疫力;定的免疫力;接种乙肝疫苗后,血中可接种乙肝疫苗后,血中可出现抗出现抗-HBs-HBs阳性;阳性;被动性获得抗被动性获得抗-HBs-HBs,如输血治疗。如输血

8、治疗。n n (3 3)HBeAg HBeAg 是是HBVHBV核心颗粒中的一种可核心颗粒中的一种可溶性蛋白质。溶性蛋白质。HBsAg HBsAg阳性是病毒复制、传染阳性是病毒复制、传染性强的标志;孕妇血清性强的标志;孕妇血清HbeAgHbeAg阳性可引起垂阳性可引起垂直传播;直传播;HBeAgHBeAg若持续阳性提示肝细胞损害若持续阳性提示肝细胞损害严重,可能转为慢性乙型肝炎。严重,可能转为慢性乙型肝炎。n n (4 4)抗)抗-HBe-HBe抗体抗体 多出现于急性肝炎多出现于急性肝炎恢复期的病人血清中,抗恢复期的病人血清中,抗-HBe-HBe阳性见于:阳性见于:HBeAgHBeAg转阴的患

9、者,提示病毒复制减少,传转阴的患者,提示病毒复制减少,传染性减低;染性减低;部分慢性乙型肝炎、肝硬化、部分慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者。肝癌患者。n n (5 5)HBcAgHBcAg和抗和抗-HBc-HBc抗体抗体 抗抗-HBc-HBc包包括括IgMIgM和和IgGIgG两种。两种。抗抗-HBc IgM-HBc IgM:是感染:是感染HBVHBV后血液中最早出现的特异性抗体,在急后血液中最早出现的特异性抗体,在急性期滴度高,是诊断急性乙型肝炎和判断性期滴度高,是诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制、传染性强的重要指标;阳性还病毒复制、传染性强的重要指标;阳性还见于慢性活动性肝炎;见于慢性活动性肝

10、炎;抗抗-HBc IgG-HBc IgG:在:在感染感染HBVHBV后后1 1个月左右开始增高,高滴度表个月左右开始增高,高滴度表明患者正在感染;低滴度表示既往感染过明患者正在感染;低滴度表示既往感染过HBVHBV;在体内持续时间长,具有流行病学的;在体内持续时间长,具有流行病学的意义。意义。n n(三)丙型肝炎病毒血清标志物检查(三)丙型肝炎病毒血清标志物检查n n 1.1.丙型肝炎病毒抗体测定丙型肝炎病毒抗体测定n n (1 1)参考值)参考值 ELISA ELISA法为阴性法为阴性n n (3 3)临床意义)临床意义 抗抗-HCV IgM-HCV IgM阳性:阳性:诊断丙型肝炎的早期敏感

11、指标,可见于丙诊断丙型肝炎的早期敏感指标,可见于丙型肝炎急性感染、病变活动期和传染期;型肝炎急性感染、病变活动期和传染期;抗抗-HCV IgG-HCV IgG阳性:提示体内存在丙型肝阳性:提示体内存在丙型肝炎病毒感染。炎病毒感染。n n四、肿瘤标志物检测四、肿瘤标志物检测n n 肿瘤标志物肿瘤标志物(tumor marker(tumor marker,TM)TM)是是指在肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞指在肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。检测反应而产生的一类物质。检测TMTM对肿瘤的对肿瘤的诊断、鉴别

12、诊断、疗效和预后判断具有一诊断、鉴别诊断、疗效和预后判断具有一定的临床价值。肿瘤标志物动态测定有助定的临床价值。肿瘤标志物动态测定有助于良、恶性疾患的鉴别,还可提示肿瘤是于良、恶性疾患的鉴别,还可提示肿瘤是否复发和转移。否复发和转移。n n(一)血清甲胎蛋白测定(一)血清甲胎蛋白测定n n 1.1.原理原理 甲胎蛋白甲胎蛋白(AFP)(AFP)是胎儿发育是胎儿发育早期由肝脏和卵黄囊合成的一种糖蛋白。早期由肝脏和卵黄囊合成的一种糖蛋白。出生后,出生后,AFPAFP逐渐消失。当肝细胞或生殖腺逐渐消失。当肝细胞或生殖腺胚胎组织发生恶变时,原已丧失合成胚胎组织发生恶变时,原已丧失合成AFPAFP能能力

13、的细胞又重新开始合成,使血力的细胞又重新开始合成,使血AFPAFP增高。增高。n n 2.2.参考值参考值 定性:阴性;定量:定性:阴性;定量:20g/L300g/LAFP300g/L有诊断意义。有诊断意义。n n(2 2)其他:生殖腺胚胎瘤(如睾丸癌、)其他:生殖腺胚胎瘤(如睾丸癌、畸胎瘤、卵巢癌等);病毒性肝炎、畸胎瘤、卵巢癌等);病毒性肝炎、肝硬化;妊娠肝硬化;妊娠3 3个月后,个月后,AFPAFP开始增高,开始增高,分娩后分娩后3 3周恢复正常。周恢复正常。n n(二)血清癌胚抗原测定(二)血清癌胚抗原测定n n 1.1.原理原理 癌胚抗原癌胚抗原(CEA)(CEA)是一种富含是一种富

14、含多糖的蛋白复合物。出生后含量极低。但在多糖的蛋白复合物。出生后含量极低。但在部分恶性肿瘤患者血清中部分恶性肿瘤患者血清中CEACEA含量可异常增含量可异常增高。高。n n 2.2.参考值参考值 ELISA ELISA法:法:15g/L10g/LPSA10g/L时作为诊断界限值时作为诊断界限值;定期随访定期随访PSAPSA有助于前列有助于前列腺癌治疗疗效、复发的判断,良性前列腺增腺癌治疗疗效、复发的判断,良性前列腺增生患者血清生患者血清PSAPSA亦可升高,大多小于亦可升高,大多小于20g/L20g/L。n n(四)癌抗原(四)癌抗原125125测定测定n n 卵巢癌明显增高,阳性率达卵巢癌明

15、显增高,阳性率达97%97%。n n(五)癌抗原(五)癌抗原15-315-3测定测定n n CA15-3 CA15-3 是一种乳腺癌相关抗原,对乳是一种乳腺癌相关抗原,对乳腺癌的诊断和术后随访监测有一定的价值。腺癌的诊断和术后随访监测有一定的价值。n n(六)癌抗原(六)癌抗原19-919-9测定测定n n 胰腺癌、肝胆和胃肠道癌时血中胰腺癌、肝胆和胃肠道癌时血中CA19-9CA19-9的水平可明显升高。的水平可明显升高。n n 五、感染免疫检测感染免疫检测n n(一)抗链球菌溶血素(一)抗链球菌溶血素“O”(anti-“O”(anti-streptolysinO,ASO)streptolys

16、inO,ASO)测定测定n n 临床意义临床意义 ASO ASO增高见于增高见于A A群溶血性链群溶血性链球菌感染引起的疾病,如感染性心内膜球菌感染引起的疾病,如感染性心内膜炎、扁桃体炎、风湿热、链球菌感染后炎、扁桃体炎、风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎等。肾小球肾炎等。n n(二)肥达反应(二)肥达反应(Widal reactin,WR)(Widal reactin,WR)n n 1.1.原理原理 肥达反应是以伤寒、副肥达反应是以伤寒、副伤寒沙门菌液为抗原,检测患者血清伤寒沙门菌液为抗原,检测患者血清中有无相应抗体的一种凝集试验。中有无相应抗体的一种凝集试验。n n 2.2.参考值参考值 伤寒

17、伤寒“O”“O”凝集价凝集价11:8080;伤寒;伤寒“H”“H”凝集价凝集价11:160160;副;副伤寒伤寒A A、B B、C C凝集价凝集价11:8080n n n n4.4.临床意义临床意义 WR WR阳性一般出现在伤寒发阳性一般出现在伤寒发病后一周,第二周为病后一周,第二周为60%60%70%70%;第四;第四周可达周可达90%90%以上。单份血清抗体效价以上。单份血清抗体效价“O”“O”大于大于1 1:8080及及“H”“H”大于大于1 1:160160者者有诊断意义;若动态观察,有诊断意义;若动态观察,WRWR持续超过持续超过参考值或较原效价升高参考值或较原效价升高4 4倍以上更

18、有价倍以上更有价值。值。n n(三)幽门螺杆菌抗体测定(三)幽门螺杆菌抗体测定n nHP-Ab阳性常见于胃、十二指肠幽门螺杆阳性常见于胃、十二指肠幽门螺杆菌感染,如慢性胃炎、胃溃疡和十二指肠菌感染,如慢性胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡等。溃疡等。六、性传播疾病的免疫检查六、性传播疾病的免疫检查n n(一)梅毒螺旋体抗体测定(一)梅毒螺旋体抗体测定 n n 1.1.参考值参考值 梅毒螺旋体血凝试验梅毒螺旋体血凝试验(TPTATPTA)和荧光螺旋体抗体吸收试验()和荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-FTA-ABSABS)均阴性)均阴性n n 2.2.临床意义临床意义 阳性可确定梅毒的诊断。阳性可确定梅毒

19、的诊断。n n(二)人获得性免疫缺陷病毒抗体测定(二)人获得性免疫缺陷病毒抗体测定n n 1.1.原理原理 人类免疫缺陷性病毒人类免疫缺陷性病毒(human(human immunodeficiency virus,HIV)immunodeficiency virus,HIV)是艾滋病的是艾滋病的病原体,机体感染病原体,机体感染HIVHIV后数周至半年后,多数后数周至半年后,多数患者体内可出现抗患者体内可出现抗-HIV-HIV抗体。抗体。n n 2.2.参考值参考值 阴性阴性n n 3.3.临床意义临床意义 筛选试验常用筛选试验常用ELISAELISA法,敏法,敏感性高,但有假阳性。筛选试验阳

20、性时,需做感性高,但有假阳性。筛选试验阳性时,需做确诊试验,确诊试验用蛋白印迹试验或确诊试验,确诊试验用蛋白印迹试验或RT-PCRRT-PCR法,阳性对肯定诊断有价值。法,阳性对肯定诊断有价值。n n七、自身免疫检测七、自身免疫检测n n (一)类风湿因子测定(一)类风湿因子测定n n 1.1.原理原理 类风湿因子类风湿因子(RF)(RF)是变性是变性IgGIgG刺刺激机体产生的一种自身抗体激机体产生的一种自身抗体,主要存在于类风湿主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。性关节炎患者的血清和关节液内。n n 2.2.临床意义临床意义 类风湿性关节炎的阳性率为类风湿性关节炎的阳性率为707

21、0;其他自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、;其他自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血等也可出现阳性;某些自身免疫性溶血性贫血等也可出现阳性;某些感染性疾病,如结核病、感染性心内膜炎等可感染性疾病,如结核病、感染性心内膜炎等可呈现阳性反应。呈现阳性反应。n n(二)抗核抗体检测(二)抗核抗体检测n n 1.1.原理原理 抗核抗体抗核抗体(ANA)(ANA)是以细胞的核是以细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称。成分为靶抗原的自身抗体的总称。n n 2.2.参考值参考值 间接荧光抗体法:阴性;间接荧光抗体法:阴性;n n 3.3.临床意义临床意义 是自身免疫性疾病的筛选是自身免疫性

22、疾病的筛选试验。系统性红斑狼疮、多发性肌炎、干燥试验。系统性红斑狼疮、多发性肌炎、干燥综合征、类风湿性关节等均可出现阳性。综合征、类风湿性关节等均可出现阳性。n n(三)抗脱氧核糖核酸抗体测定(三)抗脱氧核糖核酸抗体测定n n 1.1.原理原理 抗脱氧核糖核酸抗体抗脱氧核糖核酸抗体(抗抗-DNA-DNA)分为抗双链分为抗双链DNA(ds-DNA)DNA(ds-DNA)抗体、抗单链抗体、抗单链DNA(DNA(ss-DNA)ss-DNA)抗体。抗体。n n 2.2.参考值参考值 阴性阴性n n 3.3.临床意义临床意义 n n (1 1)抗)抗ds-DNAds-DNA抗体阳性抗体阳性 见于活动期系

23、统见于活动期系统红斑狼疮,阳性率红斑狼疮,阳性率70%70%90%90%,特异性达,特异性达95%95%,敏感性较低,对于系统性红斑狼疮的诊断和治敏感性较低,对于系统性红斑狼疮的诊断和治疗监测极为重要。疗监测极为重要。n n(四)抗可提取性核抗原抗体谱测定(四)抗可提取性核抗原抗体谱测定n n 1.1.原理原理 可提取的核抗原(可提取的核抗原(ENAENA)由)由多种相对分子质量不同的多肽构成,检测多种相对分子质量不同的多肽构成,检测这些抗原刺激产生的自身抗体,用来反应这些抗原刺激产生的自身抗体,用来反应某些自身免疫病的状况。某些自身免疫病的状况。n n 2.2.参考值参考值 免疫印迹试验(免疫印迹试验(IBTIBT):):阴性阴性n n 此课件下载可自行编辑修改,仅供参考!此课件下载可自行编辑修改,仅供参考!感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢

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