《实验一无菌技术及培养基的配制.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验一无菌技术及培养基的配制.ppt（24页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验实验一无菌技术及培养基的配制 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验主要参考资料微生物学实验指导：黄秀梨微生物学实验指导：黄秀梨，高等教育出版社，高等教育出版社，2002微生物学实验教程：杨革微生物学实验教程：杨革，科学出版社，科学出版社微生物学教程（第微生物学教程（第2版）：周德庆版）：周德庆，高等教育出版社，高等教育出版社，200
2、0工业微生物实验操作手册，诸葛健，轻工出版社，工业微生物实验操作手册，诸葛健，轻工出版社，1997。伯杰士细菌系统发育手册、真菌鉴定手册、伯杰士细菌系统发育手册、真菌鉴定手册、酵母鉴定手册、放线菌鉴定手册等工具书酵母鉴定手册、放线菌鉴定手册等工具书 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验成绩评定单独设课，作为一门独立课程严格进行成绩考核。本门单独设课，作为一门独立课程严格进行成绩考核。本门课程成绩评定由平时成绩（课程成绩评定由平时成绩（80%）+实验理论考试实验理论考试（20%）组成。）组成。平时成绩包括下列项目：平时成绩包括下列项目：实验纪律及准备（实验纪律及准备（20
3、）平时实验操作和技能（平时实验操作和技能（25）实验报告（实验报告（20）实验设计创新能力及其它能力（实验设计创新能力及其它能力（15）宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验实验考试为理论与实践结合的考试，随机从题库中抽取实验考试为理论与实践结合的考试，随机从题库中抽取题目，分为：题目，分为：(1)微生物学实验的基本操作技能，包括根据菌落形态鉴别所微生物学实验的基本操作技能，包括根据菌落形态鉴别所属菌类，制片镜检，选择相应的配方，配制斜面、平板培养基，属菌类，制片镜检，选择相应的配方，配制斜面、平板培养基，包扎灭菌，在培养基上进行分离接种操作等；包扎灭菌，在培养基上进行分
4、离接种操作等；(2)设计一个大型综合实验的具体实验方案。设计一个大型综合实验的具体实验方案。相对应的考核方法为：相对应的考核方法为：(1)由学生从题库中随机抽取由学生从题库中随机抽取5道题，现场口头回答，每题道题，现场口头回答，每题2分分力，教师根据其回答情况评分，一共力，教师根据其回答情况评分，一共10分；分；(2)开卷，在大型综合实验，即实验四进行之前完成，占开卷，在大型综合实验，即实验四进行之前完成，占10分。分。宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验实验安排实验安排模块实验项目学时备注I培养基的制备6必做微生物的分离纯化8必做微生物显微技术6必做II曲药中高温芽孢
5、菌的分离及初步鉴定12选做酿酒微生物生产特性的检测12选做窖（曲）房空气微生物的检测12选做酿酒酵母的诱变及高乙醇耐受性菌株的筛选12选做四大类型菌DNA的提取及PCR扩增12选做 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验实验报告内容实验报告内容目的要求目的要求实验原理实验原理实验材料实验材料实验步骤实验步骤结果与讨论结果与讨论 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验1.1 无菌技术与培养基的制备无菌技术与培养基的制备（1）微生物培养的常用器具及其灭菌（2）培养基配置的一般过程（3）选择培养基 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验
6、验1、Petri dish（1）微生物培养的常用器具及其灭菌）微生物培养的常用器具及其灭菌 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验（2）培养基制备的一般程序）培养基制备的一般程序调配调配 过滤过滤 矫正矫正pH 分装过滤分装过滤 灭菌（一般灭菌（一般121.3，20-30min）鉴定是否有菌鉴定是否有菌 放入冰箱冷藏备用放入冰箱冷藏备用鉴定是否有菌可将培养基置于鉴定是否有菌可将培养基置于3
7、7 培养培养24小时，然小时，然后观察后观察 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验培养基：培养基：液体培养基；液体培养基；固体培养基；固体培养基；半固体培养基；半固体培养基；宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验固体培养基；固体培养基；半固体培养基；半固体培养基；琼脂琼脂 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验实验室常用培养基实验室常用培养基肉膏蛋白胨培养基：肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏牛肉膏3g3g，蛋白胨，蛋白胨10g10g，NaCl5gNaCl5g，琼脂，琼脂15-20g15-20g，水，水1000ml1000ml，pH7.
8、0-7.2pH7.0-7.2；淀粉琼脂培养基（高氏淀粉琼脂培养基（高氏1 1号培养基）：号培养基）：可溶性淀粉可溶性淀粉20g20g，KNOKNO3 31g1g，NaCl0.5gNaCl0.5g，K K2 2HPOHPO4 40.5g0.5g，FeSOFeSO4 40.01g0.01g，琼脂，琼脂20g20g，水，水1000ml1000ml，pH7.0-7.2;pH7.0-7.2;PDAPDA培养基：培养基：马铃薯（去皮）马铃薯（去皮）200g200g，蔗糖或葡萄糖，蔗糖或葡萄糖15g15g，琼脂，琼脂15-20g15-20g，水，水1000ml;1000ml;宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生
9、物物与与育育种种学学实实验验因高压之后因高压之后pH值会下降值会下降0.1左右，所以矫正左右，所以矫正pH时应比所需的时应比所需的pH高高 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验 e.加棉塞，包装。加棉塞，包装。宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制t 高温下培养：分离嗜热细菌；t 培养基中不含N：分离固氮菌；t 培养基加抗生素：分离抗性菌；（3）选择培养基 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验 宜宜宾宾学学院院工工业业微微
10、生生物物与与育育种种学学实实验验 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验富集培养从自然界中分离到所需的特定微生物特定的环境条件仅适应于该条件的微生物旺盛生长待分离微生物在群落中的数量大大增加 宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验营养和生理条件几乎可无穷尽组合营养和生理条件几乎可无穷尽组合根据微生物的特殊要求，分离特定已知微生物种类；根据微生物的特殊要求，分离特定已知微生物种类；分离培养在特定环境中能生长的微生物；分离培养在特定环境中能生长的微生物；宜宜宾宾学学院院工工业业微微生生物物与与育育种种学学实实验验二元培养物t 病毒和宿主细胞；t 纤毛虫、变形虫和粘细菌捕食细菌等；蛭弧蛭弧菌菌