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1、尿液干化学与沉渣 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望一、尿液检验目的尿液检验是临床上最常用的重要检测项目之一，主要用于泌尿生殖系统疾病、肝胆疾病、代谢性疾病（如糖尿病等）及其他系统疾病的诊断和鉴别诊断、治疗监测及健康普查。二、尿干化学分析仪化学分析仪又称尿液分析仪（urineanalyzer）,是用干化学方法检测尿中某些成分，有半自动和全自动两大类。1.尿液分析仪的试剂带试剂带采用多层膜结构，第一层尼龙膜起保护作用，防止大分子物质对反应的污染；第二层绒
2、制层，包括碘酸盐层和试剂层，碘酸盐层可破坏维生素C等干扰物质，试剂层主要与尿液中所测定物质发生化学反应，产生颜色变化；第三层是吸水层，可使尿液均匀快速地浸入，并能抑制尿液流到相邻反应区；最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。尿液分析仪工作原理尿液分析仪工作原理分析仪采用专用的试纸带，通过测定试带颜色变化，求得尿液中各种成份的浓度。尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变化。测定波长：它是被测试剂块的敏感特征波长；参比波长：是被测试剂块不敏感的波长，用于消除背景光和其它杂散光的影响。各种试剂块都有相应的测定波长，其NIT、KET、BIL、URO原的测定波长为550nm，pH、GLU、PR
3、O、VitC、BLD的测定波长为620nm。各试剂块所选用的参考波长为720nm。2.仪器结构与组成尿液分析仪一般由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。（二）检测参数：目前常用的检测参数包括酸碱度、蛋白质、葡萄糖、酮体、胆红素、尿胆原、红细胞或血红蛋白（或隐血）、亚硝酸盐、白细胞、比重、维生素C等（下图）方法学评价主要优点：标本用料少；速度快、项目多；重复性好、准确性高；适于大批量标本筛检。主要不足：不能替代病理性尿标本检查，对白细胞、管型、结晶的检测属于间接检测。不利判断红细胞的形态特征。蛋白质在PH3.2条件下，四溴酚蓝产生的阴离子与带阳离子的蛋白质结合使颜色发生改变，这种现象称指示剂
4、蛋白误差法。测尿蛋白以清蛋白为主，对球蛋白、血红蛋白、本周蛋白和黏蛋白不够灵敏，故“阴性”不能排除这些蛋白的存在。对于高缓冲的碱性尿可能得到假阳性结果。如果尿液被季铵盐类化合物及某些防腐剂或清洗剂污染也会导致假阳性。葡萄糖是在过氧化物酶的作用下生产葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶作用下释放新生态氧O,O氧化KI发生颜色改变。酮体尿酮体包括乙酰乙酸、丙酮、-羟丁酸三种。尿中乙酰乙酸在碱性条件下与亚硝基铁氰化钠反应，不与丙酮或-羟丁酸反应。白细胞白细胞试块主要与粒细胞中的酯酶反应，而单核细胞、淋巴细胞中无酯酶，故需结合显微镜检查。VitC该项目并非用于人体内VitC的定量，而是用于判断试带
5、法其它检测项目的结果是否可靠，高浓度的VitC对葡萄糖、胆红素、血、亚硝酸盐会产生严重的负干扰。三、尿液有形成分分析仪检查 传统的尿有形成分检查是在显微镜下检查离心沉淀后的尿有形成分，费时费力、误差大、重复性差、不能定量、受人为因素影响、无统一质控物、难以进行室内质控。1988年，美国国际遥控影响系统有限公司研制生产了世界上第一台高速摄影机式尿有形成分自动分析仪。随着现代科技的进步，目前，有形成分分析仪主要有2大类：尿有形成分直接镜检影像分析仪流式细胞术和电阻抗检测相结合的全自动尿有形成分分析仪。（一）影像式尿有形成分分析仪：其原理与人工显微镜镜检原理基本相似，都是直观地观察有形成分的形态，在
6、相差显微镜下数码摄影系统对每个层流经过的标本摄像，计算机进行图像分析，提取有形成分的大小、对比度、质地、形状特征，运用形态识别软件自动识别和分类尿液有形成分。与普通显微镜法相比，具有无污染、定量、简便等优点。但对杂质多的标本可导致图像模糊难以准确辨认，假阳性率高；有些结晶和真菌易被误认为红细胞，往往需要依靠传统显微镜检查。（二）全自动尿有形成分分析仪其设计思路与显微镜检测原理不同，应用了流式细胞术和电阻抗分析原理。下面以SysmexUF系列为例作简要介绍：1仪器组成：主要包括光学检测系统、液压系统、电阻抗检测系统等2尿液有形成分染色：其染料成分主要有9-氮杂菲:主要染色白细胞的核酸成分，在48
7、0nm光激发时产生610nm橙黄色光波，用于区别有核与无核细胞（白、红细胞，病理管型与透明管型等）.羧花氰:其穿透能力强，主要与细胞膜（红细胞膜、核膜线粒体等）的脂质成分发生非特异性结合，用于区别WBC体积大小（如上皮细胞与白细胞的区别）。3.尿液有形成分检测：定量稀释的尿标本经稀释、加温、染色后进入鞘液流动池，单个纵列的有形成分经氩激光光束照射，产生不同程度的荧光强度（荧光强度与有形成分和染料的结合程度成正比），结合前向散射光和侧向散射光的信号分析尿中有形成分。综合分析做出红细胞、白细胞、细菌、管型等的散点图及定量报告，最后得到每份尿标本的直方图和散点图。4方法学评价：全自动尿有形成分分析仪
8、较显微镜检查有明显优势：不需离心，可自动进样。标本用量少，快速、高效。方法程序统一，易于标准化和质量控制。SysmexUF系列尿沉渣分析仪目前在中国的仪器保有数量大约有800台左右，并且随着尿常规定量检查的不断的普及，数量仍呈一个上升的趋势。UF项目具有检测速度快、结果准确、重复性好、自动进样、自动混均、自动化程度高等优点，但是该项目的检测成本较高，原装试剂的每人份的检测成本大约平均在8元钱，仪器的平均购置成本大约在50万左右。按照五年的使用周期，一年的折旧费是十万元，若以一年4万个标本计算折旧成本为每一个标本2.5元。该项目收费全国平均水平为15元20元，所以从经济利益角度考虑，都认为该项目经济效益并不理想。国产试剂的市场供货价格要比原装试剂低30%左右，从成本的角度值得考虑。