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1、向兄弟单位向兄弟单位学习学习干化学、尿流式仪及显微镜尿沉渣检查的关系三零一医院丛玉隆尿液沉查镜检历史FIsmail（1000年前），宏观在对尿液进行分析FBright（1827年）首次发现管型FBird（1854年）Purdy（1900年）进一步证明了尿沉渣检查的临床价值FAddis（1948年）建立了尿沉渣物定量检查法F美国NCCLS（1991年）提出了“尿常规分析”的推荐标准（GP16-P）；经过四年实践以提出了“尿液分析和尿液标本采集、转运和保存”（2019年）的标准文件（GP-16A）F日本JCCLS（2019年）制定了“尿沉渣检查标准）F中华医学会第一次全国临床检验学术会议（1983
2、年会议）提出了尿常规检查标准化问题F中华医学会检验分会临床血液学检验与尿液分析专题研讨会提出了我国尿沉渣的推荐标准（2019年武夷山会议）。尿常规检查的重要意义泌尿系统疾病的诊断和疗效观察其它系统疾病的诊断职业病的辅助诊断安全用药的监护尿液常规检查项目2沉渣显微镜检2化学成份分析2外观检查尿液沉渣显微镜检查/尿沉渣显微镜检的重要意义/尿沉渣检查标准化/标准化尿沉渣检查方法标准化尿沉渣检查方法-标准沉渣检查系统-自动充液仪检查-倒置显微镜检查法-Censide 检查系统干化学红、白细胞检测与镜检的关系干化学尿红、白细胞检查与镜检关系F 尿沉渣显微镜检查是诊断泌尿系统疾病的金标准，对诊断、鉴别、予
3、后分析具有重要的意义，迄今为止，尚无一台仪器能完全替代显微镜检查。八一9解放军总医院 10解放军总医院 干化学尿红、白细胞检查与镜检关系F 尿沉渣的标准化、规范化F 操作规程为：尿液10ml，离心5分钟，相对离心力（RCF）为400 g，剩余沉淀为0.2ml，混匀后吸沉淀物约20l，滴入玻片上，用18mm18mm盖玻片覆盖后镜检。先用低倍镜（1010）观察全片，高倍镜（1040）仔细观察，细胞检查10个高倍视野（HP），管型检查20个低倍视野（LP）。报告方式：个细胞/HP，个管型/LP。F 美国NCCLS文件，推荐使用一次性尿检测板，并用XXul报告，国内专家亦认为应逐步在我国施行个/ul的
4、报告。 八一干化学尿红、白细胞检查与镜检关系F规范的尿沉渣镜检在常规工作的可行性与筛选F规范的尿沉渣镜检是保证尿液分析结果准确的基础，原则上每个尿液标本都采用这种方法检查，原则上每个尿液标本都采用这种方法检查，但目前化验室人员少，工作量大，每天有几十甚至于几百个标本需要及时报告，要使用规范的镜检及时地发出报告是困难的，最好寻找一个简单、快速的方法进行过筛，即将完全正常的标本筛去后，对异常的标本进行规范性检查。干化学尿液分析仪提供了干化学尿液分析仪提供了过筛的手段。过筛的手段。八一11解放军总医院 干化学尿红、白细胞检查与镜检关系F干化学尿红、白细胞筛选的概念与原则F 所谓过筛就是在仪器、试带符
5、合实验要求，检验人员相对稳定的条件下制定的一个标准，达到此标准可视为尿沉渣成份在正常范围内，可免去进一步显微镜检查。如果一个标本经过干化学、镜检两种方法检查，干化学结果符合过筛标准，镜检结果在正常范围内，说明过筛是正确的。干化学结果不符合过筛标准，镜检结果也异常，也说明过筛标准是正确的。干化学结果异常，镜检结果正常视为假阳性，反之干化学结果正常，镜检结果异常视为假阴性。 八一12解放军总医院 镜检与试条同时检测尿RBC对比试条镜检 0 03 35 610 1120 2140 40 (个/ul) (个/ul)Neg 1409 81 10 1124 577 425 94 671 198 8850
6、73 163 273 263 35 1150 1 46 68 173 282 59 17 250 1 20 33 67 139 223 25613解放总医院 13解放军总医院 不同正常筛选标准的RBC测定结果对比分析仪筛选标准镜检异常 镜检正常RBC35/HP RBC02/HP敏感性(%) 特异性(%) 假阳性(%) 假阴性(%) 正常(RBC阴性) 0 1490 100 35.8 55.1 0 异常(RBCu/l) 2183 2676 正常(RBC10u/l) 4 3191 99.8 76.6 30.9 0.13 异常(RBC25u/l 2179 975 正常(RBC25u/l) 294 3
7、862 86.5 92.7 13.8 7.1 异常(RBC50u/l)1889 30414解放军总医院 镜检与试 条同时检测尿 WBC对比八一15解放军总医院 镜检 0 0-3 0-5 3-5 6-10 11-20 20Neg 2638 614 112 51 25 346 1070 244 249 132 43 15100 5* 32 30 85 104 129 49 500 0 8* 5* 7 42 82 23423(蛋白阳性)9（RBC阳性）7（Nit阳性）3（单核,淋巴）9(蛋白阳性)3(Nit阳性)5(RBC阳性)2(淋巴)2(蛋白阳性)1(Nit阳性)203(个/ul)(个/ul)试
8、 条以试条WBC neg为筛选标准 镜 检 异常(WBC510/HP) 正常(WBC为05/HP)试条正常(WBC为阴性)74(10) 3364 异常(WBC25/ul）1171 174016解放军总医院 以WBC25/ul为标准筛选镜下管型WBC阴性WBC25/ul 01 25 610 10 01 25 610 10（个/LP） 透明管型108 40 8 11 53 15 5 8颗粒管型 15 21 3 6 14 11 2 1细胞管型 11 5 12 4 腊样管型 6 1 17解放军总医院 八一以RBC25/ul为标准筛选镜下管型RBC10/ulRBC025/ul 01 25 610 10
9、01 25 610 10（个/LP） 透明管型 83 28 3 2 78 27 10 17颗粒管型 9 7 2 20 25 5 5细胞管型 5 2 18 7腊样管型 2 4 118解放军总医院 八一以蛋白75mg/dl为标准筛选镜下管型蛋白25mg/dl蛋白75mg/dl 01 25 610 10 01 25 610 10（个/LP） 透明管型106 13 4 55 42 9 19颗粒管型 9 6 2 20 26 3 7细胞管型 7 5 16 4腊样管型 19解放军总医院 八一以WBC25/ul RBC25/ul 蛋白75mg/dl为标准筛选镜下管型WBC阴性蛋白25mg/dl 01 25 6
10、10 10（个/LP） 透明管型 29 0 0 0颗粒管型 0 0 0 0细胞管型 0 0 0 0腊样管型 0 0 0 0RBC10/ul20解放军总医院 八一干化学法检测白细胞红细胞存在的问题u干化学法检查尿内白细胞的原理是基于粒细胞浆内有酯酶可作用于试带中的吲哚酚酯，释放吲哚酚与重氮盐反应形成缩合物，其颜色与细胞的多少成比例。此法只能测定粒细胞，不与淋巴细胞反应。尿液中污染甲醛或高浓度胆红质或使用某些药物（如呋喃咀啶），可产生假阳性；尿蛋白5g/L或尿液中含有大剂量先锋或庆大霉素等药物时，可使结果出现假阴性。u 引起红细胞试验假阳性：肌红蛋白，易热酶u 引起红细胞试验假阴性：维生素C八一2
11、1解放军总医院 干化学尿红、白细胞检查与镜检关系u细胞破坏造成的“假阳性”现象：u所谓所谓“假阳性假阳性”、“假阴性假阴性”是以显微镜检查为基是以显微镜检查为基础的。础的。由于干化学是检测细胞胞浆内涵物来确定细胞的有无.在实际工作中可能存在下列问题：由于尿液在膀胱贮存时间过长，导致白细胞破坏，酯酶释放到尿液中，造成干化学阳性，镜检阴性的所谓镜检阴性的所谓“假阳性假阳性”现象现象。肾病患者，红细胞在肾脏或泌尿道破坏，或尿比重过低、尿PH偏高均易造成经细胞破坏血红蛋白释放尿中，造成所谓红细胞干化学检查的所谓红细胞干化学检查的“假阳性假阳性”现象现象。八一22解放军总医院 690例标本尿干化学红细胞
12、检查与统检结果分析八一23解放军总医院 镜检镜检干化学检查单克隆潜血板阳性105例(细胞破坏引起“假阳性”)加热煮沸后干化学检查全部为阴性(易热酶引起假阳性)690690例例阳性360例阴性330例阴性330例(符合)阳性0例阳性142例(符合)阴性218例 阴性113例干化学过筛应用范围的局限性(1)F肾科及泌尿科病人尿液不适合于干化学过筛显微镜检查。即无论干化学结果如何，均应做显微镜检查。F镜检结石、结晶、肿瘤细胞作为诊断依据或观察疗效时，不宜用干化学方法过筛。F由于干化学分析干扰因素较多，且不可避免的有一定的假阴性率，因此要结合临床表现判断结果，决不可只看干化学分析，忽视镜检。F尿液的外
13、观（特别是颜色、浊度）与尿沉渣有一定相关关系，当尿液外观异常时，应注意显微镜检查。八一24解放军总医院 干化学过筛应用范围的局限性(2)F干化学试带的质量、稳定性及质量控制与过筛的准确性密切相关。F仪器及干化学试带一定要符合要求：仪器的正常运转和试带质量合格取得是实验结果的基本保证。笔者制定上述标准使用的是BM公司的Midiitron尿液分析仪及Combur10TestM配套试带.每个实验室使用过筛标准时，首先必须做对照观察（所用干化学试带与显微镜对比），确认仪器试带的敏感性与特异性是否符合过筛标准的要求。八一25解放军总医院 尿流式细胞仪 与镜检关系流式细胞仪的原理与分类 流式细胞仪通用型专
14、用型科研型临床型网织红细胞分析仪血细胞分析仪尿沉渣分析仪导电率尿导电率前向散射光流式细胞测定法荧光电阻抗测定电阻抗信号前向散射光强度荧光脉冲宽度荧光强度前向散射光脉冲宽度细胞体积细胞长度染色部分长度染色强度细胞大小电阻抗红细胞散射图酵母细胞结晶小圆上皮病理管型细菌白细胞上皮细胞管型前向散射光直方图前向散射光直方图红细胞参数白细胞参数氩激光尿样品电极电阻信号放大器稀释导电率感应器荧光信号放大器染色鞘液前向散射光信号放大器流式细胞仪测定原理简图流式细胞仪原理FscFlFlwFscwFlFl2Fscw250ch250chRBCWBCFscFsc尿流式细胞仪与镜检的关系FUF可提供客观的形态学指标，尤
15、其对球性血尿和非球性血尿的鉴别FUF可直接进行定量检测，简单、快速* 尿流式细胞仪红、白细胞检查仍是镜检筛选* 干化学尿与流式“筛选”之比较* 尿流式较镜检的优势与局限性再 见尿沉渣检查的重要意义F检查内容：上皮细胞、血细胞、管型及结晶F临床意义：上皮细胞扁平上皮大圆上皮尾型上皮小圆上皮血细胞白细胞及脓细胞红细胞尿沉渣检查的重要意义F临床意义：管型透明管型细胞管型颗粒管型蜡样管型白细胞管型红细胞管型上皮细胞管型细粒管型粗粒管型脂肪管型肾衰竭管型尿沉渣检查的重要意义F临床意义：结晶磺胺结晶碱性结晶酸性结晶亮氨酸及络氨酸结晶三价磷酸盐尿酸铵结晶非晶型磷酸盐尿酸结晶草酸钙结晶非晶型磷酸盐尿沉渣镜检进
16、展1.采用干涉、相差、偏振光、扫描及透射电镜鉴别管型2.有用活体染色及细胞化学染色识别各种管型3.应用单克隆抗体技术识别各种细胞尿沉渣镜检进展尿中红细胞形态尿中白细胞形态尿沉渣镜检进展S 染色各种上皮细胞形态尿沉渣镜检进展S 染色各种管型形态尿沉渣镜检进展S 染色各种管型形态复检条件一 REVIEW 标记F计数错误总数 40,000F电导率错误电导率 5ms/cm或 38ms/cmF界标错误RBC-Fl-DWSD 40 ch 或红细胞数 2.5/l且其 Fsc 200ch 或红细胞数 15 /l时未溶解的RBC% 20%二 菌尿UF在鉴别血尿来源中的应用 301医院用此仪器对随机95例肾小球性
17、和非肾小球性出血病人的尿红细胞形态进行了观察，以临床诊断肾小球病变（肾活检）为标准，以此仪器检测尿非均一性红细胞为肾小球病变诊断依据，结果：敏感性：100，特异性：78.2UF在鉴别血尿来源中的应用急性肾小球性肾炎病人尿液测定结果UF在鉴别血尿来源中的应用慢性肾小球性肾炎病人尿液测定结果UF在鉴别血尿来源中的应用前列腺癌病人尿液测定结果UF在鉴别血尿来源中的应用肾结石病人尿液测定结果UF在鉴别血尿来源中的应用慢性膀胱炎病人尿液测定结果 尿沉渣成分 主要临床意义 红细胞 月经、过度运动、各种肾，泌尿系统如外伤 、 肾 小管炎症、结石、结核、肿瘤、急性肾小球肾炎 白细胞 各种肾损害、泌尿道感染、肾
18、盂肾炎 上皮细胞 肾小管上皮细胞 肾实质肾小管受损 鳞状上皮细胞 正常人或污染 管型 宽型 严重肾疾病 肾上皮细胞 肾小管退化、变性 脂肪 肾病综合征 颗粒或蜡样 肾实质损害 透明 酸性尿-含高盐，多为病理性 细菌 泌尿道感染 脂肪体(卵圆小体) 肾病综合征 各种尿沉渣成分主要临床意义尿沉渣染色的临床意义SM染色： 管型的鉴别巴氏染色： 识别细胞甲苯胺兰： 观察管型与核结构过氧化酶： 鉴别粒细胞与上皮细胞管型非特异酯酶：识别单核细胞油红O、苏丹：脂肪变性细胞酸性磷酸酶：区分肾上皮细胞与前列腺细胞 方法 白细胞 红细胞普通载玻片不加盖玻片法15.0 17.0载玻片加盖玻片法 12.0 15.0改
19、良Neubauer 10.2 9.9Fast-Read-10R定量板法 9.3 7.0四种常见尿沉渣检查法CV%值比较单克隆抗体免疫过氧化物酶染色检查特异细胞抗体名称 对应的特异细胞FMC 10 粒细胞FMC 32 单核细胞AMDT 4 辅助/支持T淋巴细胞Huly-m8 细胞毒/抑制T淋巴细胞URO 1 肾小球/输尿管上皮细胞URO 3 近曲小管上皮细胞URO 5 亨利襻/远曲小管/集合管/输尿管URO 7 亨利襻URO 9 输尿管急性肾小管坏死、急性间质性肾炎、新月形肾炎尿中各种细胞数量及鉴别 细胞数/ml 急性肾小管坏死 急性间质性肾炎 新月形肾炎总细胞数 425006000 63330
20、028800 13840061600粒细胞数 66001100 59670028700 4650025000单核细胞 1500800 6800600163008400CD4淋巴细胞 4030 2300120073004700CD8淋巴细胞 100100 2000110041001800肾小球上皮细胞 500400 1500900118003800近曲小管上皮细胞 177004200 1220062002980014000远曲小管/集合管上皮细胞 74001700 15200850084004200亨利襻 45002300 180090046003200输尿管上皮 3400700 3600160041001500 操作规程为：尿液10ml，离心5分钟，相对离心力（RCF）为400 g，剩余沉淀为0.2ml，混匀后吸沉淀物约20l，滴入玻片上，用18mm18mm盖玻片覆盖后镜检。先用低倍镜（1010）观察全片，高倍镜（1040）仔细观察，细胞检查10个高倍视野（HP），管型检查20个低倍视野（LP）。报告方式：个细胞/HP，个管型/LP。 美国NCCLS文件，推荐使用一次性尿检测板，并用XXul报告，国内专家亦认为应逐步在我国施行个/ul的报告。 尿沉渣的标准化、规范化