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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载高中生物选修一生物技术实践学问点总结专题一 传统发酵技术的应用 课题一 果酒和果醋的制作 1、果酒菌种：附在葡萄皮上的野生型酵母菌（真菌,兼性厌氧,主要出芽生殖仍有 孢子生殖）2、在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁衍；在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵；3、制酒条件：温度（1825）,发酵液缺氧呈酸性（酵母菌可以生长繁衍,而其他微生物无法适应这一环境）；4、葡萄酒出现深红色的缘由：红葡萄皮的色素进入发酵液；5、果醋菌种：醋酸菌（原核生物）,代谢类型异养需氧型；6、有两条途径生成醋酸：当氧气、糖源 都充分时,醋酸菌将葡萄汁
2、中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸；C2H5OH O2CH3COOHH2O 7、制醋条件：深层发酵时,短时间不通氧,醋酸菌死亡；温度：3035；8、流程：选择葡萄冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵果酒 果醋9、装置：充气口制酒时关闭；制醋时,连续输入氧气；排气口长而弯曲的胶管目的是防止空气中微生物的污染；开口 向下的目的是排出酒精发酵时产生的二氧化碳；出料口是用来 取样检测；葡萄汁只装 2/3,留 1/3 空间的目的是让酵母菌先有氧呼 吸进行繁衍；10、如用瓶子做装置：制酒时,要每天拧松瓶盖 时,将瓶口打开,盖上纱布；24 次,目的是排二氧化碳；制醋名师归纳总结 -
3、- - - - - -第 1 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载11、全部用具清洗后晾干或清洗后用 70%的酒精消毒；先冲洗葡萄再除去枝梗,以防止除去枝梗时引起葡萄破旧,增加被杂菌污染的机会；12、酒精检验：酸性（3mol/L 的 H2SO4）重铬酸钾灰绿色；醋酸检验：嗅味和品尝（比较 pH）13、从哪些方面防止发酵液被污染？70%的酒精消毒,或用 榨汁机要清洗洁净,并晾干；发酵瓶要清洗洁净,用体积分数 洗洁精洗涤；装入葡萄汁后,封闭充气口；课题二 腐乳的制作1、菌种：多种微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,主要是毛霉 （真菌,代谢类型是异养需氧
4、型；孢子生殖；）传统制作毛霉来自空气；现代生产将优质毛霉菌种直接接 种在豆腐上；2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基 酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸；3、试验流程：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制（加盐之前为 前期发酵,目的是制造条件让毛霉生长,使毛霉形成菌膜包住豆腐使腐乳成型；后期发 酵主要是酶与微生物协同作用,生成腐乳的香气；）70左右,水分过多就腐乳不易成形；豆腐生长的白毛是毛霉 4、所用豆腐的含水量为 的白色菌丝；5、温度： 1518；6、加盐：逐层加盐,随着层数的加高而增加盐量,接近瓶口表面的盐要铺厚一些；控 制盐的用量（豆腐：盐
5、 =5:1 ）：盐的浓度过低,不足以抑制微生物的生长,可能导致豆 腐腐败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味；食盐的作用： 1. 抑制微生物生长,防止腐败变质2. 析出水分,是豆腐变硬 3.调味7、卤汤：由酒及各种香辛料配制而成的；8、卤汤中酒的含量：12%左右；作用：1. 防止杂菌污染 2.给予腐乳风味3. 酒精含量过高,对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长；酒精含量过低,不足以抑制 微生物生长,导致豆腐腐败；9、香辛料的作用：1. 调味 2.杀菌10、防止杂菌污染的措施：玻璃瓶,洗净后用沸水消毒；加卤汤后,用胶条将 瓶口密封；封瓶时,将瓶口通过酒精灯的火焰；11、影响腐乳风味的因素：盐
6、、酒、香辛料、豆腐含水量；12、腐乳外部致密的“ 皮” 是前期发酵时在豆腐表面上生长的毛霉菌丝,它能形成名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载腐乳的“ 体” ,使腐乳成形；课题三 制作泡菜1、菌种：乳酸菌（代谢类型异养厌氧,包括乳酸链球菌和乳酸杆菌；乳酸杆菌常用 于生产酸奶；2、流程原料加工修整、洗涤条状或片状加入调味晾晒、切分料,加盐配制盐水泡菜盐水并装坛发酵测定亚硝酸盐含量 成品3、配制盐水：水：盐 =4:1 ；煮沸冷却（杀菌和去除溶解氧）4、用水封闭坛口起什么作用？（保证发酵的无氧环境）不封闭有
7、什么结果？（有 氧会抑制无氧呼吸,杂菌污染）5、泡菜腌制过程中,要留意掌握腌制时间、温度和食盐用量；温度过高、食盐用量 过低、腌制时间过短,易造成细菌大量繁衍,亚硝酸盐含量增加；一般在腌制 10 天后 10天之后食用最好；亚硝酸盐含量开头降低,故在 6、亚硝酸盐：白色粉末,易溶于水,用作食品添加剂；膳食中的绝大部分亚硝酸盐随尿排出,只有在特定的条件（相宜的 pH、温度和一 定的微生物作用）,才会转变成致癌物亚硝胺,它对动物仍具有致畸和致突变作 用；7、测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重 N-1- 萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料,与已知浓度的标准显色 氮
8、化反应后,与 液目测比较,估算泡菜中亚硝酸盐含量；提取剂：氯化镉、氯化钡；氢氧化铝乳液：吸附泡菜汁中杂质,使泡菜汁透亮澄清；氢氧化钠：中和过多的酸,制造弱碱性环境 8、含抗生素牛奶不能生产酸奶的缘由是抗生素杀死乳酸菌；9、醋瓶或啤酒瓶内形成的白膜是醋酸菌；泡菜坛内的白膜是酵母菌；专题二 微生物的培育与应用名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载课题一 微生物的试验室培育1、培育基：人们依据微生物对养分物质的不同需求,配制出供其生长繁衍的养分基质；培育基依据 物理性质 可分为 液体培育基 脂, 在其表面可
9、形成菌落）；半固体培育基 和固体培育基 （加入凝固剂 琼 依据 用途 ,可分为 选择培育基 和鉴定培育基 ；选择培育基是指答应特定种类的微生物 生长,同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基；鉴别培育基是依据微生物的特 点,在培育基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同类别的微生物；2、培育基的化学成分：水、无机盐、碳源、氮源；仍要满意微生物生长对 PH、特别 养分物质以及氧气的要求；碳源：供应碳元素；如CO2（自养生物用）、糖类（异养微生物用）；N2（固氮菌）、NH3（硝化细菌）、NO3- 、NH4+（自养微生氮源：供应氮元素；如物）、牛肉膏、蛋白胨（异养微生物）等；特例：培育乳酸杆菌加维
10、生素,培育霉菌须将pH 调至酸性,培育细菌将pH 调至中性或微碱性,培育厌氧型微生物需供应无氧条件；3、无菌技术获得纯洁培育物的关键是防止外来杂菌的入侵,有效防止操作者自 身被微生物感染；4、消毒 指使用较为温顺的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包 括芽孢和孢子）；分为煮沸消毒法,巴氏消毒法（不耐高温的液体）、化学药剂（如酒 精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒；5、灭菌 是指使用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物,包括芽孢和孢子；分 为灼烧灭菌（接种环、接种针等金属工具、试管口）、干热灭菌（吸管、培育皿等玻璃 器皿、金属用具,所用器械是干热灭菌箱）、高压蒸汽灭菌（培育基、
11、无菌水等,所用 器械是高压蒸汽灭菌锅）；灭菌时物品不能摆得太挤,目的是防止阻碍热气流通；6、制作牛肉膏蛋白胨固体培育基方法步骤：运算、称量、溶化（包括定容和调 pH）、灭菌、倒平板；【培育基在锥形瓶中就是先分装再灭菌】7、倒平板操作的步骤：拔棉塞瓶口快速通过火焰将培育皿打开一条缝,倒培育 基（培育皿的皿盖始终在手中）冷却凝固倒置平板（从今以后始终倒置）8、平板冷凝后,为什么要将平板倒置？答：既可以使培育基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育 基,造成污染；名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备
12、欢迎下载9、平板划线法只能得到单个的菌落,不能计数；划线时不要将最终一区的与第一区 相连；操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培育物；每次 划线之前都要灼烧接种环是为了杀死上次划线终止后,接种环上残留的菌种,使每次划 线时菌种的数目逐步削减；划线操作终止时,仍旧需要灼烧接种环是为了杀死接种环上 残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操作者；在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开头划线？答：划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开 始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁衍而来 的菌落；10、稀
13、释涂布平板法不仅能得到单个的菌落,仍能计数；稀释涂布的全部操作都应在火焰邻近进行；涂布器浸在酒精中,然后灼烧；11、菌种储存频繁使用：暂时保藏（接种到试管的固体斜面培育基上,4冰箱,每36 个月,要重新将菌种从旧的培育基上转移到新奇的培育基上；）长期储存：甘油管藏（20的冷冻箱中）；课题二 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数1、尿素：只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用；土壤中的细 菌之所以能分解尿素,是由于他们能合成脲酶；2、微生物的选择应用的原理：人为供应有利于目的菌株生长的条件（包括养分、温 度、 pH等）,同时抑制或阻挡其他微生物生长；3、测定微生物数量的常用方法：稀释涂
14、布平板法（一般设置 35 个平板,选择菌 落数在 30300 的平板进行计数,并取平均值；统计的菌落数往往比活菌的实际数目 低,）和显微镜直接计数、滤膜法；4、流程：土壤取样（在距地表约38cm 的土壤层取样,取样用具需灭菌）样品的稀释（稀释程度细菌放线菌 真菌）微生物的培育与观看（细菌303712 天；放线菌 252857 天；霉菌 252834 天）5、菌落特点：外形、大小、隆起程度、颜色；6、运算公式：每克样品中的菌落数 =（C/V ）*M 其中, C 代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数, V 代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml）, M 代表稀释倍数名师归纳总结 7、鉴别方法：加
15、酚红指示剂,变红（细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,pH上升）第 5 页,共 13 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载课题三 分解纤维素的微生物的分别1、棉花是自然界中纤维素含量最高的自然产物,商品纤维素：水溶性的羧甲基纤维素钠（ CMC Na）、不溶于水的微晶纤维素（Avicel ）；2、纤维素酶是一种复合酶,包括C1 酶、 CX 酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖；3、选择方法刚果红（CR）染色法；刚果红与纤维素等多糖物质形成红色复合物,但并不和纤维二糖和葡萄糖发生这 种反应；当纤维素被纤
16、维素酶分解后,刚果红纤维素的复合物就无法形成,培育基中 会显现以纤维素分解菌为中心的透亮圈；这样,我们就可以通过是否产生透亮圈来选择 纤维素分解菌；一种是先培育微生物,再加入刚果红进行颜色反应（先加CR,倒去CR 后再加Nacl ,目的是洗去结合不牢的 入 CR,混匀后倒平板）；CR）；另一种是在倒平板时就加入刚果红（在培育基中加方法一缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是显示出 的颜色反应的就是纤维素分解菌；方法二的优点是操作简便,不存在菌落混杂问题,缺 点是显示出的颜色反应的可能是纤维素分解菌或淀粉分解菌；另一缺点是：有些微生物 具有降解色素的才能,它们在长时间培育过
17、程中会降解刚果红形成明显的透亮圈,使纤 维素分解菌不易区分；4、分别分解纤维素的微生物的试验流程土壤取样（可将滤纸埋在土壤） 选择培育（此步可省略） 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上选择产生透亮圈的菌落5、对分解纤维素的微生物进行了初步的选择后,只是分别纯化的第一步,为确定得 到的是纤维素分解菌,仍需要进行发酵产纤维素酶的试验,纤维素酶的发酵方法有液体 发酵和固体发酵两种；纤维素酶的测定方法,一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所 产生的葡萄糖进行定量的测定；专题三 植物的组织培育技术课题一 菊花的组织培育1、愈伤组织：细胞排列疏松而无规章,是一种高度液泡化的呈无定外形态的薄壁细
18、 胞；2、脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,也叫去分化；3、再分化：脱分化产生的愈伤组织连续进行培育,又可以重新分化成根或芽等器官名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载的过程；4、植物组织培育的基本过程离 体 的 植 物 组组织培育愈伤组织组织培育根、芽织、器官或细胞脱分化再分化等器官人为使用植物激素掌握 移植试管苗完整的植物体 5、影响植物组织培育的因素 材料：植物的种类、材料的年龄和储存时间的长短等都会影响试验结果；菊花组 织培育一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝；培育无病
19、毒作物,选茎尖分生区细 胞；养分： MS 培育基（含有大量元素、微量元素、有机物）激素：使用次序试验结果生长素细胞分裂素比值与结果先生长素,有利于分裂比值高时促根分化,后细胞分裂素但不分化抑芽形成先细胞分裂素,细胞既分裂比值低时促芽分化,后生长素也分化抑根形成同时使用分化频率提比值适中促进愈伤组织生长高环境条件： PH、温度、光等；菊花的组织培育,日光灯照耀 12h；. 6、菊花组织培育的操作流程pH5.8,温度 1822,并且每日用配制 MS固体培育基（配制各种母液4储存,大量元素浓缩10 倍,微量元素浓缩 100 倍,使用时依据母液的浓缩倍数,运算用量；配制培育基,可以不添加植物激素；高压
20、蒸汽灭菌）外植体的消毒（流水冲洗洗衣粉 +软刷刷洗流水冲洗 20min无菌吸水纸吸干外植体表面体积分数为 70%的酒精中摇动 2 3 次,连续 67s无菌水清洗无菌吸水纸吸干外植体表面质量分数为 0.1 的氯化汞溶液中 12min 无菌水中至少清洗 3 次；既要考虑药剂的消毒成效,又要考虑植物的耐受才能）接种（无菌操作,外形学上端朝上）培育（无菌箱,1822,光照 12h）移栽（先打开培育瓶的封口膜,生长几日；然后用流水清洗根部培育基,移植到消过毒的蛭石或珍宝岩中进行壮苗；最终露天栽培）栽培名师归纳总结 7、微生物培育基以有 机养分为主, MS 培育基就需供应大量无机养分；第 7 页,共 13
21、 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载专题二 月季的花药培育1、花粉发育过程：小孢子母细胞（2n）2 个精子 n 有丝分裂减数分裂小孢子四分体时期（n）生殖细胞（ n）养分细胞（ n）单核居中期（ n）单核靠边期（ n）生殖细胞核（ n）花粉管细胞核（n）有丝分裂双核期2、产生花粉植株的两种途径：一种是花粉通过胚状体阶段发育为植物,另一种是花 粉在诱导培育基上先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株；这两种途径之间并没有绝 对的界限,主要取决于培育基中激素的种类及其浓度配比；先诱导生芽,再诱导生根；胚状体又称为细胞胚；3、影响花药培育的因
22、素：材料的选择与培育基的组成是主要的影响因素；亲本植株 的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导胜利率都有肯定影响 选初花期、完全未开放的花蕾、单核 靠边 期花粉；4、月季的花药培育过程：材料的选取材料的消毒接种和培育 选择花药用镜检法；最常用醋酸洋红法（紫红色）、焙花青- 铬矾法（蓝黑色）；材料的消毒：花70%酒精无菌水无菌吸水纸0.1%氯化汞无菌水蕾30s 清洗吸干水分24min 冲洗每瓶接种花药清洗 710 个, 温度 25,pH5.8 ,不需要光照 . 幼小植株形成后才需要光照；在剥离花药时,要尽量不损耗花药（否就接种后简单从受伤部位产生愈伤组织）,同时仍要完全去除花丝,由于与
23、花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成；花药开裂 , 如是长出愈伤组织,要将愈伤组织准时转移到分化培育基上,以便进一步 分化出再生植株；如是胚状体,就一个花药内就会产生大量幼小植株,须尽快将其分 开,分别移植到新的培育基上,否就这些植株将很难分开；专题四 酶的讨论与应用名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载课题一 果胶酶在果汁生产中的作用1、果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一；不溶于水,化学本质是半乳 糖醛酸聚合而成的高分子化合物；2、果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶；果
24、胶酶的作用是能够将 果胶分解成半乳糖醛酸；3、植物、霉菌、酵母菌、细菌均能产生果胶酶；霉菌发酵产生的果胶酶是食品工业 中使用量最大的酶制剂之一；课题 2 探讨加酶洗衣粉的洗涤成效1、加酶洗衣粉是指含酶制剂的洗衣粉,目前常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉 酶和纤维素酶四类；应用最广泛的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶；2、脂肪酶可以将脂肪分解成甘油和脂肪酸；蛋白酶可以将蛋白质分解成小分子肽和 氨基酸；课题 3 酵母细胞的固定化1、酶：对环境条件敏锐,易失活；溶液中的酶很难回收,不能再次利用,提高了生 产成本；反应后的酶会混合在产物中,影响产品质量；2、固定化酶优点：使酶既能与反应物接触,又能与产物分别；
25、固定在载体上的酶仍可以被反复利用；3、固定化细胞优点：成本低,操作更简单,对酶影响小,能同时进行一系列反应；4、固定化酶的应用实例高果糖浆是指果糖含量为 异构酶；42%左右的糖浆；能将葡萄糖转化为果糖的酶是葡萄糖固定化酶技术：将酶固定在一种载体上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱 子底端装上分布着很多小孔的筛板；酶颗粒无法通小孔,而反应溶液却可以自由出入；生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出；5、固定化酶及固定化细胞技术固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法,将酶或细胞固定在肯定空间内的技术,包括包埋法
26、、化学结合法和物理吸附法（对固定酶的作用影响小）；酶更适合采用后两种方法固定,而细胞多采纳包埋法固定化；这是由于细胞个大,而酶分子很小；名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶简单从包埋材料中漏出；包埋法固定化细胞即将微生物细胞匀称包埋在不溶于水的多孔性载体中；常用的 载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等；6、固定化酵母细胞的流程：制备固定化酵母细胞用固定化酵母细胞发酵 制备固定化酵母细胞的试验步骤酵母菌的活化配制 CaCl2 溶液配制海藻酸钠溶液
27、（小火间断加热并不断搅拌,防 止焦糊,是制作胜利的关键步骤）海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合（冷却后）固定 化酵母细胞（凝胶珠应黄色,如白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目 较少；如凝胶珠不是圆形或椭圆形,就说明海藻酸钠的浓度偏高；）用固定化酵母细胞发酵固定好的凝胶珠用蒸馏水冲洗2-3次凝胶珠加入葡萄糖溶液,温度25,时间24h；专题五 和蛋白质技术课题 2 多聚酶链式反应扩增 DNA片段1、PCR：（多聚酶链式反应）；3 个恒温水浴锅替代）；PCR 仪实质上是一台能够自动调控温度的仪器（可用2、原理： DNA的热变性、 DNA复制；3、PCR 与体内复制的区分无解旋酶；需耐高温（Ta
28、q）DNA聚合酶；用加热代替ATP；4、PCR的反应过程：变性（5、引物：90）复性（ 50）延长（ 72）DNA 的羟基（ OH）末端称为 3,而磷酸集团的末端称为 5；引物总是以自己的5端与模板的 3端配对, DNA的合成方向是从子链的 5端向 3端延长（即脱氧核苷酸从引物的 3端连接）；6、为防止污染,使用的仪器和试剂必需进行高压灭菌；7、PCR所用的缓冲液和酶应分成小份,在20储存；在冰块上缓慢融解；8、DNA在 260nm的紫外线波段有一剧烈的吸取峰；运算公式： DNA含量（ L/mL）= 50 （ 260nm的读数） 稀释倍数课题 3 血红蛋白的提取和分别名师归纳总结 - - -
29、- - - -第 10 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载1、凝胶色谱法（安排色谱法）：相对分子质量小的蛋白质简单进入凝胶内部的通 道,路程较长,移动速度较慢,而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通 道,只能在凝胶外内部移动,路程较短,移动速度较快,从而使相对分子质量不同的蛋 白质分子得以分别；2、凝胶：多糖类化合物构成的微小的多孔球体,如葡聚糖、琼脂糖；3、缓冲液：在肯定范畴内,抵制外界的酸和碱对溶液pH 的影响,维护pH 基本不变； H 2CO3NaHCO 3、NaH 2PO4Na2HPO4、醋酸醋酸钠；4、电泳：利用各种分子带电性
30、质的差异及分子本身的的大小、外形的不同,使带电分 子迁移速度不同,从而实现样品中各种分子的分别；5、常用的电泳方法有琼脂糖凝胶电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳；测定蛋白质分子量时通常使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS 所带负电荷量大,掩盖了蛋白质的电荷差别,使电泳迁移率只取决分子大小）；6、蛋白质的提取和分别流程：样品处理粗分别纯化纯度鉴定；7、样品处理：红细胞的洗涤（目的：去除杂蛋白；方法：血液生理盐水低速短时离心）血红蛋白的释放（加蒸馏水和40%体积的甲苯,搅拌）分别血红蛋白溶液（离心后,试管分 4 层：从上向下第 1 层无色透亮甲苯层,第 2 层为白色薄层固体脂溶性物质的沉淀层,第 3 层是
31、红色透亮液体血红蛋白,第 4 层为其他杂质的暗红色沉淀物；滤纸过滤,滤液于分液漏斗中静置,分出下层的红色透亮液体）8、粗分别：即透析,目的除去小分子杂质9、纯化：即凝胶色谱法分别蛋白质10、纯度鉴定：常用 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法；11、交联葡聚糖凝胶（SephadexG75）； G 表示凝胶的交联程度,膨胀程度及分别范畴, 75 表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水 7.5g；12、商品凝胶使用前需直接放在洗脱液中膨胀,并可用沸水浴加热；装填凝胶柱时不能有气泡存在；操作过程中不能发生洗脱液流干露出凝胶颗粒的现象；13、加样前,打开流出口,使缓冲液下降到与凝胶面平齐,关闭出口；用吸管围绕管壁
32、加样,不要破坏凝胶面；专题六 植物有效成分的提取课题一 植物芳香油的提取自然香料的来源：植物、动物（麝、灵猫、海狸、抹香鲸）、真菌；植物芳香油的组成：萜类化合物及其衍生物；芳香油的提取方法：蒸馏、压榨、萃取等；水蒸气蒸馏法：（玫瑰精油）原理：水蒸汽可将挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合物,冷却后水油分层；方法：水中蒸馏：原料放在沸水中加热蒸馏；（最简便易行）水上蒸馏：原料隔放在沸水上加热蒸馏；水汽蒸馏：利用外来高温水蒸气加热蒸馏；名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载试验流程：采集玫瑰花（盛花期
33、）,清水清洗沥干水蒸气蒸馏（花：水=1:4 ）油水混合物NaCl 分别油层无水 Na 2SO4除水过滤玫瑰油蒸馏装置：安装依据从左向右、自下到上次序；蒸馏完毕,先撤热源,然后停止通水,最终拆卸蒸馏装置,拆卸的次序与安装时相反；整套装置左 边：加热蒸馏,中部 将蒸馏物冷凝,右边 接收；安装次序：酒 精灯蒸馏瓶（加沸石,防止过度沸腾）蒸馏头冷凝管接液管接收瓶温度计（温度计水银球的上限与蒸馏头侧管的下限处在同一水平线上）油水混合物：乳白色；氯化钠作用：增加盐的浓度,使油水混合物分层；分别油层用具：分液漏斗 无水硫酸钠：吸取油层中的水分；留意事项：蒸馏时间不能过短（油没出来）,温度不能过高（糊了）；不
34、足：有些原料不相宜于水中蒸馏,如柑橘、柠檬；易焦糊,有效成分易水解；萃取法：原理：芳香油易溶于有机溶剂,溶剂挥发后得到芳香油；如石油醚、酒精、乙醚等；不足：有机溶剂中的杂质影响芳香油的品质 压榨法 （橘皮精油）橘皮精油：无色,主要成分柠檬烯,主要分布在橘皮中；流程：石灰水浸泡漂洗压榨过滤静置再次过滤橘皮油 的提取 石灰水：防止压榨时滑脱,提高出油率,降低压榨液黏稠度,过滤不堵塞筛眼；小苏打、硫酸钠：促进油和水的分别（用量分别为橘皮质量的0.25 和 5）；名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载试验步
35、骤：橘皮的处理：将新奇橘皮用清水清洗沥干；石灰水浸泡：用78石灰水浸泡橘皮10h；清水漂洗：浸泡好的橘皮用流水完全漂洗洁净,沥干；粉碎和压榨：将橘皮粉碎,加入小苏打和硫酸钠后,用压榨机压榨得到压榨液；过滤压榨液：用布袋过滤,滤液再高速离心处理,分别出上层橘皮油；静置处理：将橘皮油在510冰箱中静置57d,分别出上层澄清橘皮油；再次过滤：将下层橘皮油用滤纸过滤,滤液与上层橘皮油合并,得到橘皮精油；分析：静置处理目的：除去果蜡和水分；课题二 胡萝卜素的提取依据碳碳双键的数目胡萝卜素划分为三类；其中最主要的为 性质：橘黄色； - 胡萝卜素；提取 胡萝卜素的方法主要有三种：从植物中提取从大面积养殖的岩
36、藻中获得 利用微生物的发酵生产；试验流程：粉碎干燥萃取过滤浓缩 留意事项：粉碎：颗粒要小；干燥：温度太高,干燥时间太长会导致胡萝卜素分 解；萃取：、萃取剂的选择：具有较高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶；最好 是石油醚；、萃取时温度要高,时间要长；、装置：水浴加热,这是由于有机溶剂 都是易燃物,直接使用明火加热简单引起燃烧爆炸；为了防止加热时有机溶剂挥发,仍 要在加热瓶口安装回流冷凝装置；过滤：除去萃取液中的不溶物；浓缩：可直接使用蒸馏装置；蒸发出有机溶剂；鉴定：纸层析法 点样：萃取样品（上下 2 个点）和标准样品感谢 22 班赵思明友情校对名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页,共 13 页