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1、名师归纳总结 精品学习资料 - - - - - - - - - - - - - - -优秀教案 欢迎下载教 案课题 DNA 的粗提取与鉴定本试验既是对组成细胞化合物的验证,也是加强同学对细胞中化合物 的提取原理、方法、技巧的懂得把握,同时仍是历年来各种考核的热点；教材分析教材第一介绍了该试验的“ 试验原理”；教材接着说明白DNA 的粗提取与鉴定的目的要求；教材第三部分清晰地列出了该试验的材料用具；教材第 四部分更为具体地介绍了该试验的方法和步骤；学情分析通过必修 2遗传与进化的学习,同学已经明白了证明DNA 是主要的遗传物质的试验证据,知道生物体的外形之所以能够遗传给后代,是由 于生物体内具有
2、 DNA 或 RNA 这些遗传物质；通过本课题的学习,使同学对 DNA 有肯定的感性熟悉；1、学问目标 懂得 DNA 的理化特性及依据其理化特性而提取和鉴定的原理；教学目标2、才能目标（1）初步把握 DNA 的粗提取和鉴定的方法；（2）在对试验原理、步骤的懂得和分析过程中进展同学的科学思维；3、情感、态度、价值观 在科学试验过程中培育同学严谨比较细致、实事求是的科学态度；教学重点 DNA 的粗提取与鉴定方法及其相关原理教学难点 DNA 的粗提取与鉴定方法及其相关原理教学资源 相关图片、视频教学过程教学阶段老师活动同学活动设计意图时间这节课,我们一起学习 “ DNA 的粗提取引入与鉴定” 技术；
3、倾听开门见山,板书： DNA 的粗提取与鉴定DNA 的提取技术是整个基因工程技术使同学明基础；基本上,不论是出于何种目的的白 DNA 提分子生物学试验,大到被称为“ 人类阿取技术的波罗方案” 的人类基因组方案,小到今重要性,引天已经被我们熟知的亲子鉴定, DNA 提发同学的取技术都是其中基础的基础；而其他诸学习爱好如 RNA 的提取,质粒的提取等试验,都可以说是参考这一技术改进,或者重新设计出来的；细心整理归纳 精选学习资料 DNA试验这节课,我们一起学习DNA 的粗提取 第 1 页,共 7 页 的粗材料与鉴定技术；提取的选第一,我们应当选取合适的试验材料； - - - - - - - - -
4、 - - - - - - - - - - - - - - - 名师归纳总结 精品学习资料 - - - - - - - - - - - - - - -与鉴择优秀教案欢迎下载摸索、回答问题：教材中列举了许多中材料,请你定从中选出 2-3 种；原就：凡是含有DNA 的生物材料都可使 学 生 明 白 为 什 么 要 选 用 鸡 血 细 胞 液 为材料以考虑,但是,选用DNA 含量相对较高的生物组织,胜利的可能性更大；那么教材中挑选鸡血细胞液作为试验材 料,而相对于其他材料鸡血细胞液,有什么优点呢？1.鸡是真核生物,真核生物的 DNA 都在 染色体上；2.鸟类的血细胞核大,DNA 多（从核 DNA 数目
5、来看, 猪 38 条,鸡 78 条,哺 乳动物血 0 条,猕猴桃 58 条,洋葱 16 条,豌豆 14 条,菠菜 12 条,大肠杆菌 1 条）3.不需要破除细胞壁选用鸡血细胞液仍有一个好处鸡血 比较简单获得,那么我们为什么不用哺乳动物的红细胞呢？哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核问题：鸡血细胞液可以直接用吗？柠檬酸钠抗凝问题：鸡血细胞虽然没有细胞壁,但是摸索、回答使 学 生 知依旧有细胞膜,以你所学的学问,有什道 破 碎 动么比较简便但是可行的方法可以破裂细物 细 胞 的胞膜？方 法 和 原生物会考的试验是质壁分别,你仍记得理方法和原理吗 . 所以为了破裂鸡血细胞,我们可以反其破裂 细 胞,释放
6、DNA 道而行之,在鸡血细胞液中加入肯定量 的蒸馏水,使其吸水胀破,达到破裂细 胞的目的；加入蒸馏水的同时,要用玻璃棒进行搅 拌 方法：单向,快速, 5min,速度力气不要过于猛烈,防治打碎DNA ；目的：加速血细胞破裂问题：这是我们获得的将是含有细胞膜、细胞器的碎片液体,我们如何初步获得 含有 DNA 的液体 . 过滤细心整理归纳 精选学习资料 - - - - - - - - - - - - - - - 第 2 页,共 7 页 - - - - - - - - - 名师归纳总结 精品学习资料 - - - - - - - - - - - - - - -优秀教案可以用滤纸过滤吗？不行以,孔径太小；
7、需要用到欢迎下载3-4 层纱布,除去一些颗粒较大的杂质,获得含 有 DNA 的滤液；这时 DNA 在哪里？滤液里；板书： 破裂细胞,释放 DNA 对于动物细胞我们可以利用细胞的渗透 压来破裂细胞,但是许多情形下,人们 不得不面对植物材料,那么我们是不是 仍可以通过加入肯定量的蒸馏水来涨破 细胞呢？植物细胞有细胞壁的支持和爱护,因此 吸水不会涨破；我们通常通过研磨来破裂植物细胞的细 胞壁；在研磨的过程中,一般仍会加入 洗涤剂和食盐；洗涤剂的作用：洗涤剂也分为亲水基团和亲脂基团,可 以与细胞膜中的蛋白质结合, 使之溶解,进而瓦解细胞膜；食盐的作用：食盐中主要含有 NaCl,有利于 DNA 的 溶解
8、；问题：这时的滤液可能含有哪些细胞成 分？主要有 RNA 、核蛋白、多糖等 那么我们应当如何将 DNA 单独分别出 来？板书： 去除滤液中的杂质 提取生物大分子的基本思路是选用肯定 的物理或化学方法分别具有不同物理或 化学性质的生物大分子；对于 DNA 的 去除 滤液 粗提取而言,就是要利用 DNA 与 RNA、中的 蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面 杂质 的差异,提取 DNA ,去除其他成分；背景介绍 ;DNA 的溶解性图片： DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲摸索、分析、使 学 生 掌线回答握 盐 析 法问题：的 原 理 与在什么浓度下, DNA 的溶解度最小？方法DNA 在 NaC
9、l 溶液中的溶解度是如何变 化的？在 NaCl 溶液浓度低于 0.14 mol/L 时,细心整理归纳 精选学习资料 - - - - - - - - - - - - - - - 第 3 页,共 7 页 - - - - - - - - - 名师归纳总结 精品学习资料 - - - - - - - - - - - - - - -优秀教案 欢迎下载DNA 的溶解度随 NaCl 溶液浓度的增加 而逐步降低； 在 0.14 mol/L 时,DNA 溶解度最小；当 NaCl 溶液浓度连续增加时,DNA 的溶解度又逐步增大；如何通过掌握 NaCl 溶液的浓度使 DNA在盐溶液中溶解或析出？当氯化钠的物质的量浓度
10、为 2 molL 时,DNA 的溶解度最大, 浓度为 014 molL 时, DNA 的溶解度最低；利用这一原理,可以使 解或析出DNA 在盐溶液中溶为什么反复地溶解与析出 DNA ,能够去 除杂质？用高浓度的盐溶液溶解 DNA ,能除去在 高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA 析出,能除去溶解在低盐溶液中的 杂质；第一步：在浓度较高的 NaCl 溶液溶液中核蛋白 简单解聚,游离出的 DNA 溶解在溶液 中；方法：在溶液中加入两倍体积的浓度为 2mol/L 的 NaCl 溶液,用玻璃棒沿一个 方向搅拌 1min,使 DNA 充分溶解；板书：（1）溶解细胞核内的 DNA 其次步：加蒸馏水降低
11、 NaCl 溶液浓度,使 DNA 析出；方法：缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地 沿一个方向不停地匀称搅拌,以利于DNA 分子的附着和缠绕； 同时应留意控 制加水量,使 NaCl 溶液的终浓度为 0.14mol/L,直到溶液中丝状物不再增加 时为止；板书：（2）DNA 的析出细心整理归纳 精选学习资料 在刚才试验中我们利用DNA 在不同浓摸索、分析、通过对,其他 两 种 方度 NaCl 溶液中溶解度不同的特性,去案的分析,除杂质；回答使 学 生 深那么课本中仍给出了其他两种方案,请入 理 解 纯你阅读教材P56,摸索这两个方案的原化 DNA 的理；方 法 和 原 第 4 页,共 7 页 - - -
12、- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师归纳总结 精品学习资料 - - - - - - - - - - - - - - -优秀教案欢迎下载理方案二：直接在滤液中加入嫩肉粉,反 应 10-15min 嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶,利用 蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的 DNA 与蛋白质分开 方案三：将滤液放在 60-75的恒温水 浴箱中保温 10-15min；利用的是 DNA 和蛋白质对高温耐受性 DNA 的不同,从而使蛋白质变性,与 分别；过滤：用 34 层纱布对 DNA 稀释液进 行过滤,滤过蛋白质,收集 DNA 的粘 稠物；我们刚才说了 DN
13、A 提取技术是分子生 物学技术的基础,但假如提取的 DNA 量不够且其中含有较多杂质,是无法用 于其它操作的；所以我们必需对 DNA 进行进一步的纯化；原理也是 DNA 的 溶解性；背景介绍：DNA 不溶于酒精溶液, 但是细胞中的某摸索、分析使 学 生 知些蛋白质就溶于酒精；在试验中,我们道 DNA 纯可以使用预冷的酒精,使DNA 能够更化 的 原 理好地凝聚和方法方法：DNA 的初 步纯 化将 DNA 粘稠物再溶解,连续用2mol/L的 NaCl 溶液 20mL 溶解 DNA 黏稠物,仍然沿一个方向不停搅拌3min,使 DNA充分溶解；过滤:用 34 层纱布进行过滤,滤去杂 质,收集含有 D
14、NA 的滤液；纯化：向滤液中贴壁缓慢加入 50mL 预 冷的体积份数为 95%乙醇,并用玻璃棒 朝一个方向缓慢、匀称地搅拌,溶液中 会显现 DNA 丝状物；板书： DNA 的初步纯化 预冷的酒精具有以下优点：1.抑制核酸水解酶活性, 防止 DNA 降解 2.降低分子运动,易于形成沉淀析出 3.低温有利于增加 DNA 分子柔韧性,减 少断裂细心整理归纳 精选学习资料 DNA原理介绍：二苯胺法DNA 遇二苯胺变 第 5 页,共 7 页 的鉴在沸水浴的条件下, - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师归纳总结 精品学习资料 - - - -
15、- - - - - - - - - - -定蓝；优秀教案欢迎下载方法：溶解：在物质的量浓度为 2mol/L 的 NaCl溶液 5mL,放入丝状物,用玻璃棒搅拌,摸索、分析、使 学 生 知使之溶解；显色：加入 4mL 的二苯胺试剂； 混合均回答道 DNA 鉴匀后,将试管置于沸水中加热5min；定 的 原 理问题：假如溶液变蓝是否能说明DNA和方法的存在 . 设置对比组：在 5mL 体积的 2mol/L 的 NaCl 溶液中加入 4mL 的二苯胺试剂,置于沸水中加热 5min；对比：除了可以使用二苯胺法,仍有什 么方法可以鉴定 DNA ？DNA 丝状物 用甲基绿溶液直接滴在有 的载玻片或玻棒上,呈
16、蓝绿色反应；只用一种即可,不混合用；前者要加热,后者不加热 板书： DNA 的鉴定我们依据所需分别物质与其他物质物理 或者化学性质的不同,来提取生物大分 子物质；而通过今日的学习,我们知道DNA 有以下物理或者化学的特性是与 其他生物大分子物质不同的：在 NaCl 溶液浓度低于 0.14 mol/L 时,DNA 的溶解度随 NaCl 溶液浓度的增加 而逐步降低； 在 0.14 mol/L 时,DNA 溶 解度最小；当 NaCl 溶液浓度连续增加 时,DNA 的溶解度又逐步增大；小结DNA 不溶于酒精溶液, 但是细胞中的某小结小结些物质就可以溶于酒精； 利用这一原理,可以将 DNA 与蛋白质进一
17、步分别蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA 没有影响 大多数蛋白质不能忍耐 6080 C 的高 温,而 DNA 在 80 C 以上才会变性 洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜,去除脂 质和蛋白质 ,但对 DNA 没有影响在沸水浴的条件下,蓝；DNA 遇二苯胺变因此,我们可以设计试验,通过破裂细细心整理归纳 精选学习资料 - - - - - - - - - - - - - - - 第 6 页,共 7 页 - - - - - - - - - 名师归纳总结 精品学习资料 - - - - - - - - - - - - - - -优秀教案 欢迎下载胞,释放 DNA 溶解细胞核内的 DNADNA 的析出 DNA 的初步纯化DNA 的鉴定 完成 DNA 的粗提取与鉴定 视频： DNA 的粗提取与鉴定板书设计1.破裂细胞,释放 DNA DNA 的粗提取与鉴定2.去除滤液中的杂质（1）溶解细胞核内的DNA （2）DNA 的析出 3. DNA 的初步纯化 4.DNA 的鉴定 教学反思细心整理归纳 精选学习资料 - - - - - - - - - - - - - - - 第 7 页,共 7 页 - - - - - - - - -