《高中生物专题一基因工程详细知识点人教版选修.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高中生物专题一基因工程详细知识点人教版选修.doc（7页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、.1.基因工程DNA重组技巧/基因拼接技巧基因工程是指依照人们的欲望，进展严厉的计划，并经过体外DNA重组跟转基因等技巧，给予生物以新的遗传特征，从而制造出更契合人们需求的新的生物范例跟生物产品。因为基因工程是在DNA分子程度长进展计划跟施工的，因而又叫做DNA重组技巧或基因拼接技巧。2.DNA重组技巧的根本东西、“分子手术刀限度性核酸内切酶限度酶A、感化限度性核酸内切酶能识不双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并在使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开B、限度性内切酶的切割方法：在核心轴线两侧将DNA切开，瘦语是黏性末了。沿着核心轴线切开DNA，瘦语是平末了。年夜肠杆菌的一种
2、限度酶EcoR)能识不GAATTC序列，SmaI识不CCCGGG序列:他们识不的核苷酸序列差别,然而切点基本上在GC之间。C、比拟有关的DNA酶1DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸，完全水解成膦酸、脱氧核糖跟含氮碱基2DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，感化的部位是碱基跟碱基之间的氢键。留意：使DNA解成两条长链的办法除用解旋酶以外，在恰当的高温如94、重金属盐的感化下，也可使DNA解旋。3DNA聚合酶：能将单个的核苷酸经过磷酸二酯键衔接成DNA长链。word范文.4DNA衔接酶：是经过磷酸二酯键衔接双链DNA的缺口。留意比拟DNA聚合酶跟DNA衔接酶的异同点。
3、.DNA衔接酶“分子缝合针1DNA衔接酶的分类：E.coliDNA年夜肠杆菌衔接酶跟T4DNAT4噬菌体连接酶。2感化及感化部位：E.coliDNA衔接酶感化于黏性末了被切开的磷酸二酯键，T4DNA衔接酶感化于黏性末了战争末了被切开的磷酸二酯键平末了较弱。.基因进入受体细胞的载体“分子运输车1分子运载车的分类：质粒：常存在于原核细胞跟酵母菌中，是一种分子品质较小的环状的暴露的DNA分子，独破于拟核之外。病毒：常用的病毒有噬菌体、动动物病毒等。2运载体运用的目标：是用它做运载东西，将目标基因转运到宿主细胞中去。是应用它在受体细胞内对目标基因进展少量复制。3作为运载体必需具有的前提：在宿主细胞中保
4、管上去并少量复制有多个限度性内切酶切点有必定的标记基因，便于挑选3.基因工程的根本操纵顺序目标基因的猎取基因表白载体的构建将目标基因导入受体细胞目标基因的检测与判定一、基因的构造：基因是有遗传效应的DNA片断(注：RNA病毒为RNA)，分为编码区跟非编码区。非编码区编码区非编码区编码区卑鄙编码区卑鄙编码区：能转录出mRNA，原核生物中也确实是能编码卵白质的区段非编码区：不克不及转录出mRNA，也不克不及编码卵白质的区段原核细胞基因的构造word范文.非编码区编码区非编码区启动子停止子RNA聚合酶联合位点非编码区中存在调控遗传信息表白的核苷酸序列:编码区卑鄙的RNA聚合酶联合位点，即启动子，可操
5、纵RNA聚合酶的联合。RNA聚合酶是一种卵白质，能识不并联合调控序列中的联合位点，能催化DNA转录为RNA编码区卑鄙有停止子，可操纵RNA聚合酶的停顿、零落。2真核细胞基因的构造非编码区编码区非编码区启动子编码区卑鄙外显子内含子(能编码卵白质)(不克不及编码卵白质)调控遗传信息的表白(调控序列)二基因工程的根本操纵顺序1、目标基因的猎取：A目标基因要紧是指编码卵白质的构造基因，现在被普遍提取运用的目标基因有：苏云金杆菌抗虫基因、动物抗病基因抗病毒、抗细菌B取得目标基因的办法)、人胰岛素基因等。1从基因文库中猎取目标基因：根本观点的了解：将含有某种生物差别基因的很多DNA片断，导入受体菌的群体中
6、贮存，各个受体菌分不含有这种生物的差其余基因，称为基因文库。word范文.将某种生物体内的DNA全体提掏出来，选用恰当的限度酶，将DNA切成必定范畴巨细的DNA片断，而后将这些片断分不与载体衔接起来，导入受体菌的群体中贮存，每个受体菌都含有了一段差其余DNA片断。那个群体包括了这种生物的一切基因。这种基因文库叫基因组文库。有些基因文库比拟小，只包括了一种生物的一部分基因，这种基因文库叫做部分基因文库，如cDNA文库用某种生物发育的某个时代的mRNA反转录发生的多种互补DNA也叫cDNA片断，与载体衔接后贮存在一个受体菌群中，那个受体菌群体叫做这种生物cDNA文库。怎么样提取：依照目标基因有关信
7、息，比方，依照基因的核苷酸序列，基因的功用，基因在染色体的地位，基因的转录产品mRNA以及基因的表白产品卵白质等特征来猎取目标基因。应用PCR技巧扩增目标基因：道理：DNA双链复制的根来源根基理前提：一段曾经明白目标基因的核苷酸序列，依照这一序列分解引物。前提：a.四种脱氧核苷酸b.DNA的两条链为模板c.热波动DNA聚合酶(Taq酶d.一对引物一小段单链DNA或RNA，普通2030个碱基，能与DNA母链的一段碱基序列互补配对e.温度操纵弛缓冲液PCR技巧扩增进程:a、DNA变性90-95：双链DNA模板在热感化下，氢键断裂，形成单链DNAb、复性55-60：零碎温度落低，引物与DNA模板联合
8、，形成部分双链c、延长70-75：在Taq酶的感化下，分解与模板互补的DNA链人工分解:反转录法：以目标基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的感化下分解双链DNA，从而取得所需的基因。word范文.目标基因转录成的mRNA因单链DNA双链DNA目标基依照曾经明白的氨基酸序列分解DNA法:卵白质中氨基酸的序列mRNA中的碱基序列DNA碱基序列目标基因目标基因2.基因表白载体的构建:基因工程的核心目标：使目标基因在受体细胞中波动存在；能够遗传给下一代；使目标基因能够表白跟发扬感化。：基因表白载体的形成：目标基因启动子：位于基因首端，RNA聚合酶识不跟联合的部位，驱动转录
9、基因停止子：位于基因尾端，使转录在所需求的地点停上去标记基因：鉴不受体细胞中能否含有目标基因办法：同种限度酶分不切割载体跟目标基因，再用目标基因与运载体联合以质粒为运载体DNA衔接酶把两者衔接。word范文.前提：同种限度酶、DNA衔接酶、目标基因、启动子、停止子、标记基因3.将目标基因导入受体细胞：1将目标基因导入受体细胞的道理：自创细菌或病毒侵染细胞的道路。2常用的受体细胞：动动物细胞受精卵、年夜肠杆菌、泥土农杆菌、枯草杆菌等3办法：农杆菌转化法导入动物细胞基因枪法花粉管通道法办法导入动物细胞显微打针法导入微生物细胞感触态细胞接收DNA分子4.目标基因的检测与判定：word范文.检测转基因生物染色体的上能否拔出了目标基因DNA办法DNA分子杂交分子检测检测目标基因能否转录出了mRNA办法分子杂交检测目标基因能否翻译成卵白质办法抗原-抗体杂交集体判定：抗虫判定、抗病判定、活性判定等基因工程的运用：1.动物基因工程：动物感触器乳腺反响器、膀胱反响器2.动物基因工程：抗虫棉Bt毒卵白基因苏云金芽孢杆菌3.基因诊断4.基因医治卵白质工程：消费天然界中不的卵白质预期卵白质功用计划卵白质分子构造揣测氨基酸序列揣测脱氧核苷酸序列分解DNA表白响应卵白质word范文