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1、自学考试复习题一、名词解释血清学反应、益生素、菌群失调症、抗生素、佐 剂、真 菌、干扰素、病毒的复制、质 粒、变态反应、单细胞蛋白质饲料、反硝化作用、灭 菌、传 染、益生素、肉的成熟、SPF动物 、抗原表位、 传 染、细菌的呼吸、消 毒、好气性败坏、接 合、抗 原、抗 体、免疫应答、拮 抗、细胞因子、毒力、抗生素、细菌素、肉的成熟、病毒的复制、干扰素、菌 落、巴氏消毒法、败血症病原微生物从局部进人血流，并在血流和全身各组织器官中生长繁殖，进而危害全身。单克隆抗体指一个杂交瘤B细胞，受一种B细胞决定簇作用后， 分化、增殖的浆细胞分泌的高度均一、特异的抗体，常用于疾病的免疫学诊断、预防和治疗。细菌
2、性食物中毒因食品中含有病原菌或其毒素而引起人体中毒的现象，即称为细菌性食物中毒。细菌性食物中毒按病因学不同，又可分为传染性食物中毒和毒素性食物中毒两大类。细菌的呼吸凡是由细菌引起，使代谢基质发生氧化-还原作用，以释放能量，供细菌生命活动利用的生物化学过程，称为细菌的呼吸。朊病毒是一类感染人类与哺乳动物、引起亚急性海绵状脑病的感染因子，它们的结构主要是蛋白质，尚未证实是否含有核酸，故称朊病毒，又称蛋白侵染因子抗原表位又称抗原决定簇，是指位于抗原分子表面具有特殊立体构型和免疫活性、能决定抗原与抗体发生特异性结合能力的化学基团。霉菌总数:霉菌总数是指1g或1ml检验样品于恒温培养箱内25-28培养1
3、周(培养3d后开始观察)，能在高盐察氏培养基上长出的霉菌菌落总数。细菌总数细菌总数指单位（g、ml、cm2或m3）被检样品于固体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌菌落总数。包涵体:包涵体某些病毒感染细胞后在胞浆或胞核内形成的具有一定形态、染色特性的结构，普通光镜下可见，常用于相应疾病的诊断。毒素性食物中毒:毒素性食物中毒是指某些细菌在食物中生长繁殖产生的外毒素污染食物后所引起的细菌性食物中毒，如肉毒中毒是由肉毒梭菌在食物中生长繁殖产生外毒素而引起的。传染性食物中毒:传染性食物中毒是指某些病原菌随着污染的食物进入人体肠道内，由活菌和内毒素的协同作用引起的细菌性食物中毒。基因转移:基因转移是
4、指体细菌细胞间接或直接地将部分遗传物质单向传递给受体细菌，从而导致受体细菌发生基因重组的现象，称为基因转移，其形式主要有转化、转导、接合、原生质融合及转染。二、简答题1.什么是益生素？其有何作用？2.反刍兽与其瘤胃微生物间的共生关系体现在哪些方面？3.何谓灭活疫苗？简述其优缺点。4.简述病毒复制的过程。5.简述细菌生长曲线各期的特点。6.简述病毒与其它微生物的主要区别。7.何谓传染？其发生的条件有哪些？8.简述自然界中氮素的循环转化作用。9.简述弱毒疫苗的特点（优缺点）。10.简述革兰氏染色法的基本过程。11.什么是干扰素？有哪些特性及作用？12.简述保证鲜乳安全和提高鲜乳品质的微生物学措施。
5、13.简述反刍动物瘤胃微生物的主要作用。14.选择消毒剂时应注意哪些问题？15简述微生物的分类并举例。16简述革兰氏阳性菌和阴性菌细胞壁结构的异同点。17简述影响消毒剂作用的因素。18什么是青贮饲料？青贮的原理是什么？19简述鲜乳的巴氏消毒法及其目的。20简述内、外毒素的区别。21.简述T细胞免疫应答的作用。22 简述人工培养病毒的方法。 23为什么湿热灭菌比干热灭菌的温度较低，时间较短？24.简述消化道微生物菌群的平衡及其意义。（消化道正常菌群的生理意义是什么？）25.简述原核细胞与真核细胞的主要区别。答：1)原核细胞没有真正的细胞核，其核物质称为拟核或核体，没有核膜、核仁的分化；能进行二分
6、裂；细胞浆内缺乏细胞器； 2)真核细胞有真正的细胞核，有核膜、核仁的分化；能进行有丝分裂和减数分裂；细胞浆内富含多种细胞器。26.简述马立克病病毒在鸡体组织内的存在形式及其特点。答：马立克病病毒在鸡体组织内的存在形式有两种：1)裸露的MDV(不完全病毒)：存在于血液、白细胞及及肿瘤组织细胞中，直径85100nm，无囊膜，与细胞结合紧密，又称细胞结合型病毒；传染性及抵抗力不强；2) 有囊膜的MDV(完全病毒)：存在于病鸡羽毛囊上皮细胞中，直径150160nm，也有直径达273400nm，呈不规则的无定形结构。 有囊膜，脱离细胞单独可具传染性，传染性及抵抗力较强27.叙述肉类腌制贮藏的原理及目的。
7、答：肉类的腌制是肉类的一种加工方法，也是一种防腐的方法。其原理主要是依靠一定浓度的盐水形成高渗环境，使微生物处于生理干燥二不能繁殖。此外，还依靠食盐离解时的氯离子的作用，以及高浓度的盐分对蛋白质分解酶具有破坏作用来实现防腐的。肉的腌制可分为干腌法和湿腌法，通过腌制的防腐作用以达到长期保存肉制品的目的。28.简述细菌生长繁殖所需的条件。答：细菌生长繁殖所需的条件如下：1) 营养；要有足够的水分，适合利用的碳素营养、氮素营养、灰分元素营养、生长因子等。2) 温度及渗透压；多数细菌，包括动物病原菌，最适温度在20-38；细菌要在等渗透压的环境中才能正常地生长发育，低渗透压和高渗透压对细菌都有不利影响
8、；3) 氢离子浓度（PH）；大多数细菌，适宜于中性和微碱性的环境（PH值7-7.6）；4) 需氧性或厌氧性呼吸环境；有些细菌需要在环境中加入一定量的CO2或N2才能生长或生长的旺盛。29.简述制备细菌抹片的步骤。答：1)玻片的准备：载玻片用洁净的纱布擦拭干净，如有油污，可滴2-3滴95%酒精擦拭干净；(1分) 2)抹片：对于液体材料，可直接用灭菌接种环取一环材料，于玻片中央均匀涂布成适当大小的薄层；对于固体材料，则先取一滴蒸馏水于玻片中央，再用灭菌接种环取少量材料，在水滴中混匀，均匀涂布成适当大小的薄层；组织脏器材料可先用镊子夹持局部，以灭菌的剪刀剪取一小块，夹出后以其新鲜切面在薄片上压印或涂
9、抹成一薄层；(2分)3)干燥：涂好的抹片，应让其自然干燥或在酒精灯火焰上拖过以适当加温（以不烫手为度），促其干燥；(1分)4)固定：载玻片涂抹面向上，背面在酒精灯火焰上通过数次，感烫手为度。(1分)30.简述病毒的分离培养方法。答：病毒分离培养的方法有鸡胚培养法、细胞培养法（包括器官、组织和单层细胞培养法等）和易感的实验动物法等。1)鸡胚培养法 即将病毒接种于发育的鸡胚中。用鸡胚培养法可进行病毒分离、鉴定，也可复制大量的病毒，制备抗原或疫苗。不同病毒在鸡胚的不同部位的膜上产生不同的病变效应可以作为检测病毒的方法。2)细胞培养法 此法用于多种病毒的分离、增殖、病毒抗原制备、中和试验、病毒空斑（数
10、量）测定及克隆纯化等，比鸡胚法和实验动物法更经济、效果更好、用途更广。用于培养病毒的细胞有原代细胞、二倍体细胞株和传代细胞系。常用的细胞培养方法有静置培养法和旋转培养法。细胞培养的标本主要以细胞病变作为病毒感染的指标。大多数动物病毒感染敏感细胞培养都能引起其显微表现的改变，即产生致细胞病变效应。3)实验动物法 可用于病毒病原性的测定、疫苗效力试验、疫苗生产、抗血清制造及病毒性传染病的诊断等。实验时多用敏感、适龄、体重合格的动物，并且尽量采用无特定病原动物或无菌动物。31.从微生物学角度说明如何调制优质青贮饲料？答：从青贮料中各种微生物的特性及其发酵过程中的作用来分析，制作出优良青贮料的主要环节
11、，就是提供乳酸菌能够旺盛地生长繁殖的条件，使它们迅速、大量地产生乳酸，并在青贮期间维持厌氧环境，才能长期保存，保证青贮料质优味美。按照这个原则，在实际中常采用如下措施：1）选择适当的植物：应含有适当（1-1.5）的糖类、含水量应在65-75之间用作青贮的植物，可以混合两种或多种不同的饲料，以调节糖类和水分的含量。喷洒水分，也可以调整饲料的含水量；2）堆放时压紧，堆好后密封：饲料适当切碎以利汁液流出和堆压紧密，可以更早地形成厌氧环境，以抑制需氧性腐败菌和霉菌的生长，有利于乳酸菌的生长繁殖和有机酸的积累，使青贮料酸化得较快。饲料堆好后即应严加密封。堆顶及青贮害（塔）的周壁，要加盖或堵塞保护物以隔绝
12、空气和雨水的进入。3）加入某些物质，改善发酵条件：a.对于一些含糖分较低的饲料，可加入0.1-0.5%食盐，能使植物细胞内的可溶性营养更快更易渗出为乳酸菌利用，对增进昧道亦有好处；b.还可加入适当的废糖蜜，直接增加含糖量。c.此外还可添加植物乳杆菌等乳酸菌制剂，使得乳酸菌很快占优势地位，有利于进行同型乳酸发酵；d.还可添加甲酸等青贮添加剂来抑制不利于青贮发酵的微生物；这都有利于乳酸菌的发酵和更快更多地产生乳酸。4）减少杂菌的污染 原料应保持新鲜，无腐烂变质现象；尽量避免混入泥土和粪便，更要防止病原微生物污染，原料需掺水时，水质应清洁，禁用污水。 总之，通过上述各方面的调控，为制作优质青贮创造良
13、好的条件。32.举例说明污染有病原微生物的肉类对人类的危害。答：1）引起人畜传染病爆发和散播：未经彻底灭菌处理或没有充分煮熟的带病原微生物的肉类、一旦被人畜误食，就可能感染相应的传染病。在加工、运送过程中，也有散播人畜传染病病原的危险，它们是一种传染媒介。经常因此而招致畜禽爆发相应的流行病，严重影响人畜健康。常见的病原微生物有炭疽杆菌、结核杆菌、布氏杆菌沙门氏菌、猪链球菌2型、口蹄疫病毒等； 2）引起人的细菌性食物中毒： 因食品中含有病原菌或其毒素而引起人体中毒的现象，即称为细菌性食物中毒。细菌性食物中毒按病因学不同，又可分为两大类。一类是传染性食物中毒：病原菌随食物进入体内，在肠道内一方面大
14、量繁殖，侵入机体引起全身感染，活菌和内毒紊的协同作用，造成了食物中毒的临床症状：一方面却发生死亡裂解，释放出毒素，对机体呈现中毒作用。这种食物中毒称为传染性食物中毒。最常见的有沙门氏菌、大肠杆菌、变形杆菌等病原菌引起； 一类是毒素性食物中毒：某些病原菌污染食品后，在其中生长繁殖的过程中能产生肠毒素等外毒素，人食用后引起中毒。这种由细菌外毒素引起的食物中毒呈毒素性食物中毒，常见的有金黄色葡萄球菌产生的肠毒素、肉毒梭菌产生的肉毒毒素等。33.写出抗体产生的一般规律及其实际意义。答：1)抗体产生的一般规律如下： a.初次应答：机体初次接触抗原物质后，需要经过一定的潜伏期（诱导期），潜伏期之后，开始产
15、生抗体，最早出现的抗体是IgM，几天内达到高峰，接着才开始产生IgG，最后是IgA。初次反应产生的抗体量较少，因此持续的时间不长； b.再次应答：机体再次接触相同抗原时，起初原有抗体因为和新进入的抗原反应，导致水平略有下降，接着抗体水平很快上升，主要是IgG，并达到较高水平，持续很长一段时间。 c.回忆反应：抗原刺激机体产生的抗体经一定时间后，在体内逐渐消失，此时若机体再次接触相同抗原，在记忆性的T细胞分化而成的TH细胞的辅助下，由记忆性的B细胞介导更为强烈的回忆反应，产生大量的各种免疫球蛋白，并持续相当长的时间。2)实际意义：了解抗体产生的一般规律后，首先，有助于在给畜禽预防接种及制备免疫血
16、清时,指导我们制订最佳免疫方案； 其次，在对传染病作临床血清学诊断时，可动态观察抗体种类和含量, 结合病程作出正确评估；最后，可通过检出血清中IgM的存在作为传染病早期诊断或宫内感染诊断指标之一。34.简述免疫的概念及其功能。答：免疫是指机体识别和排除抗原性异物的一种特异性生理反应，其作用是，以维持机体的生理平衡和稳定的保护性反应。免疫的功能体现在对抗原性异物的识别和清除。可归纳为三个功能：1)免疫防御：指机体抵抗病原微生物的侵袭或清除其它外来异物的功能。过高或过低都不利。过高可引起变态反应；过低则导致免疫功能低下或免疫缺陷，可引起机体微生物的机会感染。2)免疫稳定：指机体清除衰老或损伤的细胞
17、，进行自身调节，维持体内生理平衡的功能。如此功能失调 则可导致自身免疫性疾病。 3)免疫监视:机体内的细胞常因物理、化学和病毒等致癌因素的作用变为肿瘤细胞。机体免疫功能正常时，即可对这些细胞加以识别然后清除，以防止发生肿瘤。这种功能即为免疫监视。如此功能低下或失调，则可导致肿瘤的发生。36.简述病毒的基本特征。37.试述灭活疫苗与弱毒疫苗的优缺点。38.简述免疫应答的基本过程。39.简述微生物的概念及分类。40.简述细菌生长曲线的分期和特点。41.简述自然界中氮素的循环转化过程。42.简述单胃动物肠道微生物的主要作用。43.选择消毒剂时应注意哪些问题？44简述青饲料青贮中微生物发酵过程。45.
18、简述消化道微生物菌群的平衡及其意义。46.简述保证鲜乳安全和提高鲜乳品质的微生物学措施。46.简述制备细菌抹片的步骤。答：细菌抹片的制备过程如下：1)抹片：取洁净载玻片，对于液体材料，可直接用灭菌接种环取一环菌液，于玻片中央均匀涂布成适当大小的薄层；对于固体材料，则先取一滴蒸馏水于玻片中央，再用灭菌接种环取少量菌体，在水滴中混匀，均匀涂布成适当大小的薄层； v2)干燥：涂好的抹片，应让其自然干燥或在酒精灯火焰上拖过以适当加温（以不烫手为度），促其干燥； w3)固定：采用火焰固定法，将载玻片涂抹面向上，背面在酒精灯火焰上通过数次，感烫手为度。固定好的抹片，即可进行各种染色。三、问答题1.试述感染
19、的微生物学诊断过程。答：感染微生物学诊断，是畜禽传染病诊断的重要环节，有时甚至是决定性环节。在拟定检验方案和分析检验结果时，必须结合传染病的流行病学、临床症状、病理剖检变化等进行全面的分析判定，并尽可能以简便、迅速的方法获得诊断结果。微生物学诊断内容和步骤，包括以下各方面：1）检验材料的采取 采取检验材料和送检是进行微生物学诊断的第一步，必须十分恰当，否则将影响诊断工作，不能获得正确结果。2）涂片、染色镜检 用被检材料或纯培养物作涂片，一般用革兰氏染色和瑞特氏染色，根据不同需要也可作特殊染色以观察病原菌形态特征，或者有无病原细菌或病毒包涵体存在。病毒性病料还可制超薄切片，电子显微镜检查其形态结
20、构。3）分离培养 将细菌性疾病的病料接种在适宜的培养基上。病毒性的病料，可经细菌滤器滤过或不经滤过，选择适合的禽胚胎或细胞培养或试验动物进行分离。有细菌并发或污染时，则应先经滤过除菌或用适当抗菌素抑菌杀菌，再作分离。4）培养特性、生化特性的检查 分离得到的培养物，细菌可接种各种培养基，以观察其培养恃性和生化特性，病毒则接种适当的禽胚胎或细胞培养物，观察其病理变化或空斑形成等。5）动物试验 用被检材料（有时也用纯培养物）接种实验动物，以观察病原物的致病性。常用的有家兔、小白鼠、豚鼠等，亦可按具体情况选择同种动物、接种后观察体温、症状等反应，死亡后观察病理剖检变化。也可采取病料进行有关的检查和试验
21、，以进一步确定其致病性。6）血清学试验 有些畜禽传染病，可作血清学诊断，如凝集试验、沉淀试验、补体结合试验、中和试验、琼脂扩散试验等；有些传染病（如大肠杆菌和沙门氏菌）可用纯培养物以因子血清作定型鉴定。还有少数传染病可以应用变态反应试验作诊断；亦可将检验材料或分离培养物进行标记（荧光、酶标、同位素等）抗体技术试验，以判定抗原。一些病毒培养物还常作血凝和血凝抑制试验。2.试述青贮发酵过程中各种微生物的活动特点。3.试述反刍动物瘤胃微生物种群关系及其作用。4.举例说明细菌的代谢产物及其在生产实践中的应用意义。答：细菌的代谢产物 细菌在营养、呼吸及其他生命活动过程中，通过分解和合成作用，往往产生多种
22、多样的代谢产物，有些属于分泌物，有些属于排泄物，有些则属于中间产物。这些产物，有的对细菌本身有利，有的无利无害，有的则甚有害处。对人类来说，情况也是如此，所以才引起人类对细菌进行广泛的研究，利用有益的细菌，抑制和扑灭有害的细菌。常见的细菌代谢产物及其在人类生产实践中的意义略述如下：1)无机酸、有机酸和氨基酸 无机酸如硫酸和硝酸等，对土壤肥沃性有着很大关系；有机酸和乳酸、醋酸、丙酸、丁酸等，则与农、畜产品的加工利用有关，亦可作工业原料来生产。氨基酸如谷氨酸和赖氨酸，前看是制造味精的主要成分，后者是优良饲料添加剂的原料。2)醇类、酯类和其他芳香物质 这类物质与工业和农、畜产品加工利用有关。例如乙醇
23、、丁醇等是工业原料，而一些酯类和芳香物质却是酿酒业、乳品加工业中影响产品质量的物质，可以利用这类物质的产主，以使食物具有芳香的气味。青贮饲料中的芳香气味，也是由于微生物的作用而产主的醇类、酯类和其他芳香物质发出的。3)气体 气体是细菌新陈代谢的废物，最常见的有二氧化碳、氢、甲烷（沼气）、氨、氮、硫化氢等。沼气可以被利用为发电、照明和用做燃料，氨则对土壤肥力很有好处，是植物氮素肥料来源之一。4)维生素及其他主长刺激素 有些微生物能产生大量的维主素（主要是日族维主素）和一些复杂的生长刺激素，可以利用于畜牧业和工业生产中。人畜胃肠道内，特别是反刍兽瘤胃内的细菌，有合成各种维生素日和维生素K的能力。5
24、)抗生素 很多种微生物都能产生抗生素，以放线菌和霉菌为主，一些细菌也能产生抗生素，如杆菌肽、大肠菌素等。抗生素可以防治某些动、植物的传染病。有些还具有刺激畜禽和植物生长的作用。6)毒素 病原细菌能产生对动物有毒的物质，即毒素。7)热 产热可引起环境的温度上升，在堆肥和发酵饲料中可达6070以上的温度；处理不当的干草堆，有时还因此而发生自燃的现象。堆肥的制作、生物热消毒的运用、植物温床、温室的热源以及土壤温度的维持等，都是与细菌产热有关的。8)热源质 许多细菌，特别是革兰氏阴性菌，能产生一种多糖物，注入人和动物体内，会引起发热反应，称为热源质。9)色素和光 多种微生物能产生色素，少数细菌能借发光
25、以散发部分能量，大多数发光菌存在于海洋中。一定种类的细菌，能否自某种营养物产生特定的代谢产物，常被用于鉴定细菌。5.举例说明动物机体的抗传染免疫的类型。答：动物机体的抗传染免疫可分为先天性免疫（非特异性免疫）和获得性免疫（特异性免疫）两种(1分)。1）先天性免疫（非特异性免疫）：是机体生来就具有的对抗原异物的抵抗能力。具有可遗传性和非特异性，免疫力持久(1分)，包括a.种免疫，如马不得猪瘟，牛也不会患马立克病等； b.品种免疫，如某些品种的小白鼠先天不会感染肠炎沙门氏菌，但其他品种则对其具有易感性； c.个体免疫(1分)，同种动物的不同个体因存在个体差异性，则对同一种病原微生物的感受性不同，有
26、的个体易感，有的则不易感； 2）获得性免疫（特异性免疫）：是指动物生后获得的对某种病原微生物及其有毒产物的不感受性。是由动物机体的防御机能在特殊刺激物的作用下发生反应而形成的,是抗御传染的重要因素，具有特异性和非遗传性，有一定的免疫期(1分)；又可分为a.天然自动免疫：如猪耐过猪瘟后可获得坚强的免疫力(1分)；b.人工自动免疫：如健康人注射乙肝疫苗而获得对乙肝病毒的免疫力(1分)；c.天然被动免疫：如婴儿通过吃母乳获得母源抗体(1分)；d.人工被动免疫：如为预防破伤风毒素中毒而注射破伤风抗毒素血清(1分)。6.何谓青贮饲料？试述青贮的原理及青贮饲料发酵过程。7.试述影响动物机体特异性免疫应答的
27、因素。答：影响机体免疫反应的因素很多，现仅从免疫预防的角度分抗原和机体两方面加以叙述。1)抗原方面的因素a.抗原的性质：抗原的性质对免疫应答的影响是多方面的。例如注射类毒素主要引起体液免疫，而细胞内慢性病毒感染则主要激发细胞免疫；可溶性抗原如类毒素的免疫潜伏期较长而颗粒性抗原如细菌免疫潜伏期则较短；活苗产生的保护力及免疫应答的持续时间都较死苗优越。此外，许多病毒和细胞内寄生菌虽然可同时引起体液和细胞免疫，但究其免疫效应，则是细胞免疫在抗感染中起主要作用。b.抗原剂量：在一定限度内，抗体的产量随抗原用量的增加而相应地增加，但超过了一定限度，抗体的形成反应而受到抑制，这种现象称为“免疫麻痹”。剂量
28、过小，不足以刺激机体产生抗体。所以在进行预防接种时，疫（菌）苗的剂量必须严格按照规定，不能随意增减。c.注射次数和间隔时间：仅注射一次的动物，不但抗体出现慢，而且效价低，持续时间短、如要建立坚强免疫力，应经一天间隔时间连续注射-次。一般菌苗需要间隔-天，注射-次；类毒素至少间隔周，注射次；但注射弱毒活苗，由于活微生物可以在局部适当繁殖，能较长久地在机体内存在，对机体刺激较强，一次注射便可达到目的。d.免疫途径：由于注射途径的不同，抗原在体内的停留时间和接触的组织也不同。在实践中，接种途径的选择应以能刺激机体产生良好的免疫反应为原则，接种途径不一定是自然感染的侵入门户，主要应根据各种不同感染的免
29、疫机制加以考虑，多数抗原需要非经口途径接种，如肌肉、皮下等途径。但某些有活性的弱毒苗，能通过消化道侵入机体，因此可以经口免疫，某些禽出败弱毒株用于水禽的饮水免疫效果也较好。一般认为经口（如饮水）或粘膜（如气雾）途径容易诱导产生分泌型。e.佐剂：与抗原合并使用能增强抗原免疫原性的物质称为佐剂。佐剂的种类很多，兽医上大部分死苗都用氢氧化铝、明矾和弗氏完全佐剂（将抗原悬液混加于石腊油、羊毛脂和杀死的卡介苗或其他分歧杆菌，即成为弗氏完全佐剂），以加强免疫。2)机体方面的因素a.年龄因素：初生或出生不久的动物对许多抗原的刺激常不能激起有效的免疫反应。其原因：一是机体免疫应答的能力差；二是从母体获得的母源
30、抗体。母源抗体方面可保护幼龄动物免于感染但同时也能抑制或中和相应抗原，使其对机体的刺激强度大为减弱，从而削弱了机体对该抗原的反应能力。因此，在应用鸡新城疫、猪瘟、猪丹毒等弱毒苗，给雏鸡、幼畜初次免疫时，必须考虑到母源抗体的影响。b.其他因素：遗传因素、营养状况、某些内分泌激素以及疾病等均可影响机体的免疫应答，例如某些先天性体液免疫缺陷症动物，不能产生体液免疫，也无抗体产生；患传染性腔上囊炎的雏鸡，导致雏鸡的体液免疫能力大大下降。总之，由于免疫是机体的一种生理功能，因此，凡是影响机体生理功能状态的因素，均能或多或少地影响机体的免疫能力。8.试述炭疽杆菌的微生物学诊断过程。答：1）病料采集：(疑似
31、)死于炭疽的病畜尸体严禁剖检；要在动物尸体末梢循环处采血或切开肋间采集脾脏，切口烙封或用浸泡消毒药水的纱布填塞；2）细菌学检查 a.形态学检查:上述病料涂(触)片，干燥、固定后，以碱性美兰或瑞氏或姬姆萨染色法结合革兰氏染色，如发现有荚膜的竹节状链杆菌，革兰氏染色呈阳性的两端平截的链杆菌时，结合流行病学、临床症状即可做出初步诊断；b.病料分离培养:可选用普通琼脂平板、血琼脂平板及普通肉汤对上述病料进行分离培养。如在普通平板上分离出扁平、灰白色不透明、干燥、无光泽、边缘不整齐，低倍镜或放大镜观察边缘呈卷发状的大菌落时，则为疑似菌落。挑取此疑似菌落接种于营养肉汤中进行培养，观察其是否具有炭疽杆菌肉汤
32、培养物的生长性状。必要时还可用分离菌的纯培养物做串珠试验及明胶穿刺培养。c.动物接种试验:取上述分离菌的肉汤培养物或将病料用灭菌生理盐水制成1:5悬液，皮下注射小鼠，小鼠常于注射后24-36h死于败血症，剖检可见注射部位胶样浸润，脾肿大等病变；取血液、脏器等涂片、镜检，如发现竹节状有荚膜的链杆菌，结合上述各项检查结果，即可做出确诊。3）血清学检查 对于不能进行细菌学检验的病料如皮毛等可进行血清学诊断。a.阿(Ascoli)氏热沉淀试验:将病兽皮革或尸体组织切碎后，加水煮沸过滤，取滤液滴加于小管内的免疫血清面上，室温或37放置十分钟后，如见两液接触面出现白色沉淀环，即为阳性，证明滤液中有炭疽杆菌
33、的多糖质抗原。b.琼扩试验 也可用上述待检抗原及标准免疫血清做琼扩试验，若观察到免疫血清孔和待检抗原孔之见出现白色沉淀线，即为阳性，证明滤液中有炭疽杆菌抗原。 4）确诊报告 根据上述各项诊断结果，判定该动物感染了炭疽或此兽皮中污染了炭疽杆菌。9.试述致病性大肠杆菌的微生物学诊断内容和步骤。答：致病性大肠杆菌的微生物学诊断的内容和步骤分述如下；1)病料采集、处理及分离培养: 对败血症病例，可无菌采集其病变的内脏组织；直接接种在血琼脂或麦康凯培养基平板中分离细菌；对幼畜腹泻及猪水肿病病例应采集器肠内容物或黏膜刮取物以及相应肠段的肠系膜淋巴结，分别接种于麦康凯琼脂及血琼脂培养基中于37培养24-48
34、h后，如观察到在麦康凯培养基中长出红色菌落或在血平板上菌落周围呈溶血(仔猪黄痢与水肿病菌株)，则视为可疑菌落。2)可疑菌落接种三糖铁培养基：挑取上述可疑菌落在普通琼脂斜面做纯培养，并同时在三糖铁培养基斜面和底层穿刺，37培养24h，做初步生化鉴定。如观察到在三糖铁琼脂底层呈黄色，斜面上为黄色或红色，则进一步判定疑似为大肠杆菌；3）纯培养物的形态学检查和系统生化项目鉴定：将上述三糖铁反应模式符合大肠杆菌的培养物或其纯培养涂片，经革兰氏染色，镜检；同时接种于各种生化培养基中培养，以鉴定其生化特性；4)分离菌株的毒力因子鉴定：对幼畜腹泻及猪水肿病病例分离菌要分别鉴定其肠毒素、水肿毒素及黏附素抗原等毒
35、力因子；5)纯培养物的血清学鉴定（属和型）:同时可将分离菌株的培养物与大肠杆菌标准抗O、K及H因子血清做玻板凝集试验，以鉴定其O、K及H抗原,以鉴定出其血清型；6）确诊报告：综合上述各项检测结果对此病例做出确诊。10.试述沙门氏杆菌的微生物学诊断内容和步骤。.答：沙门氏菌的微生物学诊断过程分述如下：1）病料采集、处理: 未污染病料 直接接种普通琼脂、血琼脂或鉴别培养基平板分离细菌；污染材料 如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败坏组织等，常需要增菌培养基如亮绿-胆盐-四硫磺酸钠肉汤等增菌后再行分离。这些培养基能抑制其他杂菌生长而有利于沙门氏菌大量繁殖。接种后于37培养12-24-48h。(2分)2
36、）肠道菌鉴别培养基中的培养: 蘸取上述增菌培养物在SS培养基中划线分离，经37培养24h。若观察到其中长出黑色或黄色菌落，则视为可疑菌落；(2分)3）可疑菌落接种三糖铁培养基：挑取上述SS平板中的可疑菌落作成纯培养，病同时在三糖铁培养基斜面和底层穿刺，37培养24h。如观察到在三糖铁琼脂底层呈黄色，或黑色，斜面上为红色，则进一步判定疑似为沙门氏菌；(2分)4)纯培养物的形态学检查和系统生化项目鉴定：将上述疑为沙门氏菌的培养物涂片，经革兰氏染色，镜检；同时接种于各种生化培养基中培养，以鉴定其生化特性；(1分)5)纯培养物的血清学鉴定（属和型）:同时可将三糖铁上的培养物与沙门氏菌A-F组多价抗0血
37、清及各单因子血清做玻板凝集试验，以鉴定其属、型抗原；(2分)6）确诊报告：综合上述各项检测结果对此病例做出确诊。(1分)11.试述青贮的发酵过程中各种微生物的活动特点。12.试述单胃动物及反刍动物胃肠道微生物的主要作用。13.试述细菌内、外毒素的区别。14.分离培养细菌时如何满足其生长繁殖的条件？答：细菌生长繁殖的条件要有适宜的营养物质、温度条件、酸碱度范围、一定的渗透压以及适宜的气体环境等条件。分离培养细菌时：1)首先要制作适合细菌生长的培养基，要向其中加入由牛肉浸膏、蛋白胨、NaCl、磷酸盐、葡萄糖、血液、血清等物质以便为细菌提供其生长所需的水份、碳素、氮素、无机盐以及生长因子；同时，这些
38、物质的加入还能使培养基的渗透压与细菌细胞处于等渗的状态，否则细菌将会处于高渗或低渗的环境，发生质壁分离或生理干燥；如果目的菌要求在高渗环境中生长，则需配制其所需的培养基；2)其次，在制作培养基时要注意调节培养基的pH值，使其达到适于大多数细菌生长的pH6-8范围，病原菌则在pH7.0-7.6之间生长较好；如所培养细菌适于的酸碱度范围特殊，则需做相应的调节。培养基经灭菌后才能使用，以防止杂菌污染干扰目的菌的生长；3)再次，接种好的细菌要放入适宜温度的培养箱中进行培养，以便使细菌开始增殖，细菌有各自的可适温度范围即最适温度。可根据所培养的目的菌适宜的温度范围调节温箱的温度。病原菌均为嗜温菌，最适温
39、度为37。4）最后，在培养细菌时还需根据目的菌对气体环境的嗜好性，给其提供适宜的需氧或厌氧或其它类型的气体环境。兼性厌氧菌在有、无氧的环境均能生长，通常在有氧条件比无氧环境生长更好，故需氧培养即可。综上，只有从营养物质、温度、酸碱度、渗透压以及气体环境等方面均满足所培养细菌的需要，才能保证分离培养的成功。15.细菌革兰氏染色的原理和步骤是什么？举例说明其染色结果。答：1)革兰氏染色原理一般认为是：细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透
40、性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。 2)革兰氏染色步骤如下：a.初 染：在已干燥固定好的涂片、抹片上滴加草酸铵结晶紫溶液于涂、抹面上，染色2-3min，水洗。 b.媒 染：滴加革兰氏碘液作用2-3min，水洗。 c.脱 色：滴加95酒精于抹片上，脱色时间根据涂抹面的厚度灵活掌握，多在20-60s之间，水洗。 d.复 染：加沙黄水溶液数滴，染色1min，水洗。吸干或自然
41、干燥，镜 检。3)染色结果：例如：金黄色葡萄球菌经革兰氏染色镜检呈蓝紫色，故为革兰氏阳性菌；大肠杆菌经革兰氏染色镜检呈红色，故为革兰氏阴性菌。16.有一群鸡被怀疑感染了沙门氏菌，如何对此病例进行微生物学诊断？答：因怀疑病鸡感染沙门氏菌，故应采集相应病料做如下诊断： 1）病料采集、处理: 未污染病料，如新鲜血液或脏器，可直接接种普通琼脂、血琼脂或鉴别培养基平板分离细菌；污染材料 如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败坏组织等，常需要增菌培养基如亮绿-胆盐-四硫磺酸钠肉汤等增菌后再行分离。这些培养基能抑制其他杂菌生长而有利于沙门氏菌大量繁殖。接种后于37培养12-24-48h。2）肠道菌鉴别培养基中的
42、培养: 蘸取上述增菌培养物在SS培养基中划线分离，经37培养24h。若观察到其中长出黑色或黄色菌落，则视为可疑菌落；3）可疑菌落接种三糖铁培养基：挑取上述SS平板中的可疑菌落作成纯培养，病同时在三糖铁培养基斜面和底层穿刺，37培养24h。如观察到在三糖铁琼脂底层呈黄色，或黑色，斜面上为红色，则进一步判定疑似为沙门氏菌；4)纯培养物的形态学检查和系统生化项目鉴定：将上述疑为沙门氏菌的培养物涂片，经革兰氏染色，镜检；同时接种于各种生化培养基中培养，以鉴定其生化特性；5)纯培养物的血清学鉴定（属和型）:同时可将三糖铁上的培养物与沙门氏菌A-F组多价抗0血清及各单因子血清做玻板凝集试验，以鉴定其属、型
43、抗原；6）确诊报告：综合上述各项检测结果对此病例做出确诊。17.举例说明兽医生物制品的种类及其用途。答：兽医生物制品是利用微生物或其代谢产物 研制和生产的用于预防、诊断、治疗传染病的生物制剂。兽医生物制品主要包括疫苗、诊断液和免疫血清。1）疫苗：用于给动物进行人工主动免疫的生物制品总称为疫苗。习惯上又将细菌、螺旋体、霉形体制的疫苗称为菌苗，病毒制的苗称为疫苗，细菌外毒素制的苗称为类毒素。a.传统疫苗有弱毒活疫苗，如猪瘟兔化弱毒苗；死苗，又称灭活疫苗，因免疫原性较差，故要加佐剂，如猪丹毒甲醛菌苗；类毒素，细菌产生的外毒素经甲醒处理，使其失去毒性，仍保留免疫原性的制品称为类毒素，如白喉类毒素疫苗；
44、多价苗和联苗，如大肠杆菌多价苗、多杀性巴氏杆菌多价苗及猪瘟一猪丹毒一猪肺疫三联冻干苗；b.新型疫苗有亚单位苗、抗独特型抗体疫苗、基因疫苗及转基因植物口服疫苗等多种；2）诊断液:用于对传染病进行免疫学诊断的生物制品称为诊断液。诊断液主要有如下几类。a.诊断抗原:以细菌菌体、病毒或它们的抗原成分制成，用于检测感染动物血清中的特异抗体，或对感染动物作迟发型变态反应试验的生物制品，称为诊断抗原。前者如布氏杆菌玻板或试管凝集抗原，鸡白病凝集抗原，猪瘟病毒抗原等 ；后者如结核菌素。b.诊断抗体:诊断抗体是用已知细菌或病毒免疫试验动物制备的免疫血清，或制备的单克隆抗体，或它们的标记物等，用于检测或鉴定抗原的
45、生物制品。例如，沙门氏菌诊断血清、抗体致敏红细胞、荧光抗体、酶标抗体等。3）免疫血清：用已知病原免疫动物制备的高效价抗血清，称为免疫血清。免疫血清用于一些传染病的特异性治疗或被动免疫。常用的免疫血清有两类。a.抗毒素：以类毒素免疫马匹，制备的高效价免疫血清，提 取的免疫球蛋白称为抗毒素。抗毒素主要用于治疗细菌外毒素引起的疾病，例如，破伤风、气性坏瘟、肉毒中毒等。b.抗菌血清及抗病毒血清：用灭活的病原细菌免疫动物制备的免疫血清称为抗菌血清；用灭活病毒免疫动 物制备的免疫血清，则称抗病毒血清。例如，抗狂犬病血 清、抗小鹅瘟血清等。18.请你设计一个检验某牛场水源中细菌总数的实验方案（包括实验原理或
46、依据、方法、主要用具和实验安排等）。答：1)原理：样品经稀释成几种浓度后，各取1ml，倾注营养琼脂平板，37C培养48h，通常样品中一个活菌可长成一个菌落，计算菌落数，按相关要求处理数据即可得出样品中的细菌总数。2)主要用具：取样瓶、试管、吸管、平皿、生理盐水、营养琼脂培养基等。所有用具及培养基等均须灭菌。3)方法：a.取水样：将灭菌的带盖采样瓶潜入湖水10-15cm处，掀开瓶盖，待水盛满后，在水中盖好瓶盖，取出待检查。b.样品稀释：用灭菌生理盐水将样品稀释成10-1、10-2、10-3、10-4等一系列稀释度。c.倾注平板及培养：分别用灭菌吸管吸取1ml各稀释度的水样，注入已作好标记的灭菌平
47、皿中，再将已融化并冷却到45-50C的营养琼脂培养基于平皿内，旋转平皿，使水样与培养基充分混匀。每个稀释度做两个重复。待培养基凝固后，平板倒置入37C恒温箱中培养48h。d.菌落记数及结果报告。4)实验安排：第一步：用具的准备及样品的采集。第二步：样品的稀释、倾注及培养。第三步：菌落记数及结果报告。19.结合免疫学基础知识，叙述生产实践中如何进行免疫学预防？答：1）熟悉疫苗：疫苗种类多，各有优缺点，平时要注意了解、熟悉每种疫苗的适用动物，品种，年龄、保存条件，保存期，接种剂量，途径，免疫期，预防的疾病，针对的血清型等。2）选择疫苗：选择疫苗的原则是，第一，本群或本地区的动物已有过流行或受到威胁
48、，可能发生的流行性传染病，应选择相应疫苗，进行接种预防。对当地从未发生也不可能有流行的传染病，不必引来疫苗接种，尤其不要引入那些毒力较强的疫苗或强病毒苗。第二，对应该接种的疫苗也要根据动物品种，年龄，疾病流行情况，病原的血清型，选择合适的疫苗。3）免疫程序：是指一个群动物生长过程中应该接种的各种疫苗的最适接种计划，它包括每种疫苗的一免、二免、三免时间及各种疫苗接种的合理时间。4）检查免疫效果：若发现免疫失败，要分析原因，采取措施，即使补接种。免疫失败原因有如下可能a.动物方面：母源抗体或前次免疫的抗体水平还很高时接种疫苗；营养不良或处于应激状态；患过损失免疫系统的疾病；已潜伏感染强毒。b.疫苗方面：疫苗中残存或污染强毒：疫苗的血清型与现场病原