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1、菌种保藏的原理菌种保藏的原理选择优良的纯种，最好是它们的休眠体，根据菌种的生理生化特性，利用低温、冷冻、干选择优良的纯种，最好是它们的休眠体，根据菌种的生理生化特性，利用低温、冷冻、干燥、隔氧等手段和方法，降低菌种的代谢速率，终止菌种的生长繁殖，使菌种处于休眠状燥、隔氧等手段和方法，降低菌种的代谢速率，终止菌种的生长繁殖，使菌种处于休眠状态，延长菌种的保藏期。态，延长菌种的保藏期。保藏的目的保藏的目的选择不同发酵菌种所适宜的保藏方法，保持菌种较高的存活率，避免菌种死亡和生产性能选择不同发酵菌种所适宜的保藏方法，保持菌种较高的存活率，避免菌种死亡和生产性能的下降，防止杂菌污染，在适宜条件下，菌种
2、可重新恢复活性进行生长繁殖。的下降，防止杂菌污染，在适宜条件下，菌种可重新恢复活性进行生长繁殖。保藏方法保藏方法蒸馏水悬浮法、斜面传代保藏、矿物油中浸没保藏、干燥蒸馏水悬浮法、斜面传代保藏、矿物油中浸没保藏、干燥-载体保藏、冷冻保藏、真空冻干载体保藏、冷冻保藏、真空冻干保藏、寄主保藏、基因工程菌保藏、菌种保藏机构保藏、寄主保藏、基因工程菌保藏、菌种保藏机构菌种的退化菌种的退化菌株生长性状的劣化或有些遗传标记的丢失称为菌种的退化。菌株生长性状的劣化或有些遗传标记的丢失称为菌种的退化。菌种衰退的现象菌种衰退的现象（1 1）菌落形态、细胞形态和生理等多方面的改变；）菌落形态、细胞形态和生理等多方面的
3、改变；（2 2）菌株生长繁殖能力的改变；）菌株生长繁殖能力的改变；（3 3）发酵及代谢活力的改变；）发酵及代谢活力的改变；（4 4）致病菌对宿主侵染力的下降；）致病菌对宿主侵染力的下降；（5 5）对外界不良条件抵抗力的下降。）对外界不良条件抵抗力的下降。衰退的原因衰退的原因主要与基因的负突变有关，导致有关基因负突变的原因：主要与基因的负突变有关，导致有关基因负突变的原因：（1 1）菌种保藏的不妥；）菌种保藏的不妥；（2 2）菌种的生长要求没有得到满足，或是遇到某些不利条件，或是失去某些需要的条件；）菌种的生长要求没有得到满足，或是遇到某些不利条件，或是失去某些需要的条件；（3 3）经过诱变得来
4、的新菌株发生回复突变。）经过诱变得来的新菌株发生回复突变。防止衰退的措施防止衰退的措施（1 1）合理的育种；）合理的育种；（2 2）选用合适的培养基；）选用合适的培养基；（3 3）创造良好的培养条件；）创造良好的培养条件；（4 4）控制传代次数；）控制传代次数；（5 5）用不同类型的细胞进行移种传代；）用不同类型的细胞进行移种传代；（6 6）采用有效的菌种保藏方法。）采用有效的菌种保藏方法。噬菌体的生长周期噬菌体的生长周期吸附：噬菌体与敏感的寄主细胞接触，在寄主细胞的特异性受点上结合的过程。吸附：噬菌体与敏感的寄主细胞接触，在寄主细胞的特异性受点上结合的过程。侵入：核酸注入细胞的过程。侵入：核
5、酸注入细胞的过程。复制：大量复制噬菌体核酸，合成病毒所需的蛋白质。复制：大量复制噬菌体核酸，合成病毒所需的蛋白质。装配：寄主细胞合成噬菌体壳体，并组装成完整的噬菌体粒子。装配：寄主细胞合成噬菌体壳体，并组装成完整的噬菌体粒子。释放：寄主细胞裂解，释放出病毒粒子。释放：寄主细胞裂解，释放出病毒粒子。霉菌的繁殖：无性和有性繁殖霉菌的繁殖：无性和有性繁殖无性无性节孢子节孢子：由菌丝断裂而成：由菌丝断裂而成它的形成过程是菌丝生长到一定阶段，菌丝上出现许多横隔，它的形成过程是菌丝生长到一定阶段，菌丝上出现许多横隔，然后从横隔处断裂，产生许多形如短柱状、筒状的节孢子。然后从横隔处断裂，产生许多形如短柱状、
6、筒状的节孢子。游动孢子：游动孢子：在由菌丝膨大而成的游动孢子囊内产生，为圆形、洋梨形或肾形，具有一根或在由菌丝膨大而成的游动孢子囊内产生，为圆形、洋梨形或肾形，具有一根或两根鞭毛，能游动，产生游动孢子的真菌多为水生真菌。两根鞭毛，能游动，产生游动孢子的真菌多为水生真菌。厚垣孢子厚垣孢子：由菌丝中间个别细胞膨大，原生质浓缩和细胞壁便后而形成的休眠孢子，呈圆：由菌丝中间个别细胞膨大，原生质浓缩和细胞壁便后而形成的休眠孢子，呈圆形，纺锤形或长方形，对干燥、热、不良环境抵抗力强。形，纺锤形或长方形，对干燥、热、不良环境抵抗力强。孢囊孢子孢囊孢子：生在孢子囊内的孢子：生在孢子囊内的孢子孢子形成时，气生菌
7、丝或孢囊梗顶端膨大，并在下方生孢子形成时，气生菌丝或孢囊梗顶端膨大，并在下方生出横隔与菌丝分开形成孢子囊，孢子囊长大形成核，并产生孢子壁即孢囊子。出横隔与菌丝分开形成孢子囊，孢子囊长大形成核，并产生孢子壁即孢囊子。分生孢子：分生孢子：是生于菌丝细胞外的孢子。是生于菌丝细胞外的孢子。有性有性卵孢子：卵孢子：由两个大小不同的配子囊结合发育而成。由两个大小不同的配子囊结合发育而成。结合孢子：结合孢子：由菌丝生出的形态相同或略有不同的配子囊结合而成。由菌丝生出的形态相同或略有不同的配子囊结合而成。子囊孢子：子囊孢子：两性细胞接触以后形成的囊状结构。两性细胞接触以后形成的囊状结构。担孢子：担孢子：担子菌
8、所特有，经两性细胞核配后产生的外生孢子。担子菌所特有，经两性细胞核配后产生的外生孢子。革兰氏染色法革兰氏染色法过程过程：固定结晶紫初染碘液媒燃：固定结晶紫初染碘液媒燃95%95%乙醇脱色番红复染乙醇脱色番红复染原理：原理：G+G+细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联紧密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联紧密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫和碘复合物网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫和碘复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。牢牢留在壁内，使其保持紫色。G-G-细胞壁薄、
9、外膜层类脂含量多，肽聚糖网层薄交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主细胞壁薄、外膜层类脂含量多，肽聚糖网层薄交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫和碘复合物的溶出，因此细胞的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫和碘复合物的溶出，因此细胞退成无色。退成无色。环境对微生物生长的影响环境对微生物生长的影响1 1）温度）温度：不同的微生物生长的温度范围不同，根据微生物生长与温度的关系，微生物的生：不同的微生物生长的温度范围不同，根据微生物生长与温度的关系，微生物的生长有三个温度基点，即最低、最适、最高生长温度。根据微生物的最适生长温度的不同
10、，长有三个温度基点，即最低、最适、最高生长温度。根据微生物的最适生长温度的不同，可将微生物分为：低温微生物、中温微生物、高温微生物可将微生物分为：低温微生物、中温微生物、高温微生物.2 2）干燥）干燥：水分约占微生物细胞组成的：水分约占微生物细胞组成的70-85%70-85%，环境中缺水时（干燥的环境）引起微生物细，环境中缺水时（干燥的环境）引起微生物细胞内蛋白质的变性和盐类浓度的增高，抑制微生物的生长，甚至造成微生物的死亡。干燥胞内蛋白质的变性和盐类浓度的增高，抑制微生物的生长，甚至造成微生物的死亡。干燥对微生物的作用受环境温度、失水速度、菌龄、微生物所处基质等条件的影响。对微生物的作用受环
11、境温度、失水速度、菌龄、微生物所处基质等条件的影响。3 3）渗透压）渗透压：高渗透压和低渗透压环境中都会导致微生物死亡。：高渗透压和低渗透压环境中都会导致微生物死亡。4 4）pHpH 值值：不同的微生物最适生长的不同的微生物最适生长的 pHpH 值不同，值不同，同一种微生物在不同的生理阶段对同一种微生物在不同的生理阶段对 pHpH 值的值的要求也不同。要求也不同。5 5）氧气）氧气：氧气对微生物的生命活力具有着重要的影响，按照微生物与氧气的关系可分为好：氧气对微生物的生命活力具有着重要的影响，按照微生物与氧气的关系可分为好氧菌和压氧菌。氧菌和压氧菌。好氧菌又分为专性好氧菌好氧菌又分为专性好氧菌（必须在有氧的条件下才能生长）（必须在有氧的条件下才能生长）、兼性厌氧菌兼性厌氧菌（在（在有氧和无氧条件下都能生长，有氧时生长的更好）有氧和无氧条件下都能生长，有氧时生长的更好）、微好氧菌（较低氧分压）、微好氧菌（较低氧分压）；厌氧菌又分；厌氧菌又分为耐氧菌（可在氧分子存在下进行无氧呼吸，氧对其无毒害）厌氧菌（氧对其有毒害）为耐氧菌（可在氧分子存在下进行无氧呼吸，氧对其无毒害）厌氧菌（氧对其有毒害）。