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1、培养基与设备灭菌第1页，本讲稿共10页3.1 培养基的灭菌培养基的灭菌3.1.1 消毒与灭菌消毒与灭菌灭菌灭菌：用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。工业规模的液体培养基灭菌，杀灭杂菌比除去杂菌更容易实现，因而最为常用。消毒消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。第2页，本讲稿共10页3.1.2 培养基灭菌的目的培养基灭菌的目的 1.如果不对培养基进行灭菌会产生什么后果？生产菌和杂菌同时生长，生产菌丧失生产能力；在连续发酵过程中，杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快，结果使发酵罐中以杂菌为主；杂菌及其产生的物质，使提取精制发生困难杂菌会
2、降解目的产物；杂菌会污染最终产品，杂菌会污染最终产品；发酵时如污染噬菌体，可使生产菌发生溶菌现象；因此，灭菌的目的：杀灭培养基中的微生物，为后续发酵过程创造无菌的条件。第3页，本讲稿共10页怎样保证“无菌条件”？2工业上具体措施包括：工业上具体措施包括：（1）使用的培养基和设备须经灭菌使用的培养基和设备须经灭菌；（2）好氧培养中使用的空气应经除菌处理；（3）设备应严密，发酵罐维持正压环境；（4）培养过程中加入的物料应经过灭菌培养过程中加入的物料应经过灭菌；（5）使用无污染的纯粹种子。第4页，本讲稿共10页3培养基灭菌的要求培养基灭菌的要求（1）达到要求的无菌程度（10-3）（2）尽量减少营养成
3、分的破坏，在灭菌过程中，培养基组分的破坏，是由两个基本类型的反应引起的：培养基中不同营养成分间的相互作用；对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解。第5页，本讲稿共10页4灭灭菌的方法菌的方法（1）化学法 化学药品灭菌法（2）物理法 干热灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法射线灭菌法 过滤除菌第6页，本讲稿共10页5湿湿热灭热灭菌的原理菌的原理 每一种微生物都有一定的最适生长温度范围。当微生物处于最低温度以下时，代谢作用几乎停止而处于休眠状态。当温度超过最高限度时，微生物细胞中的原生质胶体和酶起了不可逆的凝固变性，使微生物在很短时间内死亡，加热灭菌即是根据微生物这一特性而进行的。第7页，本讲稿共10页6湿湿热灭热灭菌中的基本概念菌中的基本概念杀死微生物的极限温度称为致死温度致死温度。在致死温度下，杀死全部微生物所需的时间称为致死时间致死时间；在致死温度以上，温度愈高，致死时间愈短。微生物的热阻微生物的热阻：是指微生物在某一特定条件（主要是温度和加热方式）下的致死时间。相对热阻是指某一微生物在某条件下的致死时间与另一微生物在相同条件下的致死时间的比值。第8页，本讲稿共10页第9页，本讲稿共10页8湿热灭菌的优点蒸汽来源容易，操作费用低，本身无毒；蒸汽有强的穿透力，灭菌易于彻底；蒸汽有很大的潜热；操作方便，易管理。第10页，本讲稿共10页