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1、超临界流体萃取活本讲稿第一页，共十七页文章来源及作者本讲稿第二页，共十七页主要内容结论实验流程实验结果研究背景及目的本讲稿第三页，共十七页研究背景 活性污泥是微生物群体及它们所依附的有机物质和无机物质的总称。微生物群体主要包括细菌，原生动物和藻类等。活性污泥主要用来处理污废水。磷脂脂肪酸(PLFA)是微生物细胞膜主要成分，是由甘油酸第三位羟基被磷酸、其它羟基为脂肪酸酯化而成，其磷酸基部分称为极性头部，两条碳氢链称为非极性尾部。本讲稿第四页，共十七页研究目的：微生物群落特征对环境卫生至关重要，而分析磷脂脂肪酸的组成是研究微生物种群最常用的免培养工具之一。本实验主要探究超临界流体萃取对于活性污泥中
2、提取磷脂脂肪酸的适用性和最佳实验条件。本讲稿第五页，共十七页实验流程萃取PLFA超临界流体萃取（SFE）液体溶剂萃取（LSE）单因素实验（调节剂、萃取时间、温度、压力）衍生化气相色谱-质谱联用分析PLFA样品制备从曝气池中获取活性污泥真空冷冻干燥24h碾碎、筛选收集500m的粒子储存在-20PLFA+0.5N氯化氢的甲醇溶液水浴与3mL正己烷混合离心转到琥珀瓶蒸发、干燥0.1g样品与CO2和调节剂混合萃取收集脂质干燥单因素实验0.1g样品+氯仿、甲醇、磷酸缓冲液萃取总脂质氯仿、丙酮、甲醇的硅酸柱分离出磷脂蒸发、干燥本讲稿第六页，共十七页实验结果一、两种方法萃取的磷脂脂肪酸色谱图C14:0C15
3、:0C16:0C16:1C17:0C18:0C18:19cC18:26cC23:0C24:0液体溶剂萃取超临界流体萃取本讲稿第七页，共十七页二、单因素实验结果1、调节剂对提取率的影响25MPa，80，2.7mL/min，10%的甲醇，萃取15min本讲稿第八页，共十七页本讲稿第九页，共十七页2、萃取压力对提取率的影响本讲稿第十页，共十七页3、萃取温度对提取率的影响本讲稿第十一页，共十七页4、萃取时间对提取率的影响本讲稿第十二页，共十七页三、两种方法得到的磷脂脂肪酸的组成与提取率的比较（超临界流体萃取）（超临界流体萃取）（液体溶剂萃取）（液体溶剂萃取）本讲稿第十三页，共十七页超临界流体萃取液体溶
4、剂萃取香农多样性指数1.9291.940均匀性指数0.8380.809本讲稿第十四页，共十七页结论1、磷脂脂肪酸的最佳萃取条件：温度：80、压力：25MPa、CO2 流速：2.7mL/min、10%(v/v)甲醇提取15min。2、超临界流体萃取可节省时间并使用更少的有机溶剂。3、通过磷脂脂肪酸的组成来分析微生物群落结构，超临界流体萃取是一种可替代、有效的方法。本讲稿第十五页，共十七页参考文献nZhen B,HongBo H,Wei Z,et al.PLFAs technique and its application in the study of soil microbiologyN.ACTA ECOLOGICA SINICA,Vol.26,No.7Jul,2006.n袁海龙,李仙逸,张纯,等.超临界流体萃取-高效液相色谱法测定何首乌中磷脂成分N.药学学报,1999,34(9)：702 705.本讲稿第十六页，共十七页请老师同学批评指正！本讲稿第十七页，共十七页