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1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。DNA重组技术的基本工具试题-专题1基因工程-同步检测（一）1在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指()A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶B.噬菌体、质粒、DNA连接酶C.DNA限制酶、RNA连接酶、质粒D.DNA限制酶、DNA连接酶、质粒2不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A能复制B.有多个限制酶切点C具有标记基因D它是环状DNA3关于限制酶的说法中，正确的是A限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列BEcoRI切割的是GA之间的氢键C限制酶一般不切割自身的DNA分子，
2、只切割外源DNAD限制酶只存在于原核生物中质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是能自主复制不能自主复制结构很小蛋白质环状RNA环状DNA能“友好”地“借居”ABCD有关基因工程的叙述中，错误的是（）ADNA连接酶将黏性未端的碱基对连接起来B限制性内切酶用于目的基因的获得C目的基因须由载体导入受体细胞D人工合成目的基因不用限制性内切酶实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，这是应用了酶的（）A高效性B.专一性C多样性D.催化活性受外界条件影响人们常选用的细菌质粒分子往往带有一
3、个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性B.有利于对目的基因是否导入进行检测C.增加质粒分子的分子量D便于与外源基因连接8下列属于基因运载体所必须具有的条件是（）A、可以不具有标志基因B、具有环状的DNA分子C、能够在宿主细胞内复制D、具有多种限制性内切酶9下列哪些可作为基因工程技术中常用的基因运载工具（）A大肠杆菌B质粒C染色体D线粒体10在重组DNA技术中，不常用到的酶是A、限制性内切酶B、DNA聚合酶C、DNA连接酶D、反转录酶11多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为A、平头末端B、3突出末端C、5突出末端D、粘性末端12在基因工程中通常所使用的质
4、粒是A、细菌的染色体DNAB、细菌染色体外的DNAC、病毒染色体DNAD、噬菌体DNA13研究人员想将生长激素基因通过质粒介导入大肠杆菌细胞内，以表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因不插入到基因A、B中，而大肠杆菌不带任何抗性基因，则筛选获得“工程菌”的培养基中的抗抗生素首先应该A、仅有链霉素B、仅有氨苄青霉素C、同时有链霉素和氨苄青霉素D、无链霉素和氨苄青霉素14镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是A.解旋酶B.DNA连接酶C.限制性内切酶D、RNA聚合酶15依右图有关基因工程
5、的工具酶功能的叙述，不正确的是A切断a处的酶为限制核酸性内切酶B连接a处的酶为DNA连接酶C切断b处的酶为解旋酶D切断b处的为限制性内切酶16不属于质粒被选为基因运载体的理由是A能复制B有多个限制酶切点C具有标记基因D它是环状DNA17.基因工程技术也称为DNA重组技术，其实施必须具备的四个必要条件是A.目的基因限制性内切酶运载体体细胞B.重组DNARNA聚合酶限制性内切酶连接酶C.工具酶目的基因运载体受体细胞D.模板DNA信使RNA质粒受体细胞18下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是ADNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接BRNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录C
6、一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因D胰蛋白酶能作用于离体的动物组织，使其分散成单个细胞19.下列关于限制酶的说法不正确的是A.限制酶广泛存在于各种生物中，尤其在微生物细胞中分布最多B.不同的限制酶识别不同的核苷酸序列C.限制酶能识别不同的核苷酸序列，体现了酶的专一性D.限制酶的作用只是用来提取目的基因20有关基因工程的叙述中，不正确的是A.DNA连接酶将黏性未端的碱基对连接起来B.限制性内切酶可用于目的基因的获得C.目的基因须由运载体导入受体细胞D.人工合成目的基因不用限制性内切酶22科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是A提高受体细胞在
7、自然环境中的耐热性B有利于检测目的基因否导入受体细胞C增加质粒分子的相对分子质量D便于与外源基因连接23下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步需用到的工具是ADNA连接酶和解旋酶BDNA聚合酶和限制性核酸内切酶C限制性核酸内切酶和DNA连接酶DDNA聚合酶和RNA聚合酶25.两个核酸片段在适宜的条件下，经X酶的作用，发生下述变化，则X酶是A.DNA连接酶B.RNA聚合酶C.DNA聚合酶D.限制酶26用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是()A常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒BDNA连接酶和DNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C可用含抗生素的培养基检测大
8、肠杆菌中是否导入了重组质粒D导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达27下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是ADNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键BDNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖CDNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖D同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端31基因工程中可用作载体的是质粒噬菌体病毒动物细胞核ABCD32下列黏性未端属于同一限制酶切割而成的是ABCD29在受体细胞中能检测出目的基因是因为A目的基因上有标记B质粒具有某些标记基因C重组质粒能够复制D以上都不正确30关于质粒的叙述正确的是A质粒是能够自我复制的环状DNA分子B质粒是唯一
9、的载体C重组质粒是目的基因D质粒可在宿主外单独复制33下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是ADNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接BRNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录C一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因D胰蛋白酶能作用于离体的动物组织，使其分散成单个细胞34、以下有关基因工程的叙述，正确的是（）A基因工程是细胞水平上的生物工程B基因工程的产物对人类都是有益的C基因工程产生的变异属于人工诱变D基因工程育种的优点之一是目的性强35、科学家通过基因工程的方法，使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白，此过程不涉及ADNA按照碱基互补配对原则自我复制BDNA以
10、其中一条链为模板合成RNACRNA以自身为模板自我复制D按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质36、基因工程的设计施工是在什么水平上进行的（）A细胞B细胞器C分子D原子37、细胞内合成DNA连接酶的场所是（）A细胞核B核区C核糖体D内质网38、某科学工作者把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中，在这个细胞的合成系统中能合成兔子的血红蛋白，这个事实说明（）A蛋白质合成是在核糖体上进行的B各种生物共用一套遗传密码C兔子和大肠杆菌的基因发生了重组D兔子的基因发生了突变39、能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是（）A单倍体育种B杂交育种C基因工程育种D多倍体育种40、下列不属于限制性内切酶
11、特点的是（）A识别特定的核苷酸序列B具有特定的酶切位点C具有专一性D识别黏性末端专题1基因工程-同步检测（二）1.2006四川高考基因工程技术可使大甩手杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是A.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达22006全国高考采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（）A人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基
12、酸数目的3倍B可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵C在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中D人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA4.2005全国高考科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关该基因工程的叙述，错误的是（）A.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子B.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D.用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子52005江苏高考能够使植物体表达动物
13、蛋白的育种方法是（）A单倍体育种B杂交育种C基因工程育种D多倍体育种62004天津高考下列技术依据DNA分子杂交原理的是（）用DNA分子探针诊断疾病B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的杂交快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量目的基因与运载体结合形成重组DNA分子ABCD7.2003全国高考采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是将毒素蛋白注射到棉受精卵中将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉的受精卵中将编码毒素蛋白的DNA序列，导入细菌用该细菌感染棉的体细胞，在进行组织培养将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵（）A.B.C.D.8.2002广东、河南高考（多
14、选）科学家将含人的抗胰蛋白酶基因的DNA片段，注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的羊能分泌含抗胰蛋白酶的奶。这一过程不涉及A.DNA按照碱基互补配对原则自我复制B.DNA以其一条链为模板合成RNAC.RNA以自身为模板自我复制D.按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质9.（2014天津卷。4）为达到相应目的，必须通过分子检测的是A.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B.产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选C.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D.21三体综合征的诊断10.（2014广东卷。25）利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图14所示，下列叙述正确的是（）A、过程需使用逆转录酶
15、B、过程需使用解旋酶和PCR获取目的基因C、过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D、过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞11（2014重庆卷。4）下图是利用基因工程培育抗虫植物示意图。以下相关叙述，正确的是A的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到的染色体上C的染色体上若含抗虫基因，则就表现出抗虫性状D只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异12.（2014江苏卷。23）下列关于基因工程技术的叙述，正确的是A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C
16、.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达13（2012浙江卷.。6）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是A提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞14（2012四川卷.。2）将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细
17、胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是A.发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物B.大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传C.大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等D.生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶15（2014课标卷.。40）生物选修3：现代生物科技专题(15分)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题：（1）理论上，基因组文库含有生物的基因；而cDNA文库中含有生物的基因（2）若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中
18、出所需的耐旱基因。（3）将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的是否得到提高。（4）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时，则可推测该耐旱基因整合到了（填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）。16.（2014山东卷。36）（12分）【现代生物科技专题】人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：（1）htPA基因与载体用_切
19、割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_技术。（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其_。采集的精子需要经过_，才具备受精能力。（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是_。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的_。（4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到_，说明目的基因成功表达。专题1基因工程-同步检测（三）（2014海南卷）31生物选修3：现代生物科技专题（15分）下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意
20、图。请据图回答：获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的序列，再通过化学方法合成所需基因。利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有、4种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。由A和载体B拼接形成的C通常称为。在基因工程中，常用Ca2处理D，其目的是。【答案】（1）逆转录酶DNA聚合酶氨基酸脱氧核苷酸（2）引物（目的基因或A基因）模板（3）基因表达载体（4）使
21、其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子【解析】（1）利用逆转录法合成目的基因的过程是：以mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下，合成双链DNA分子；根据蛋白质工程合成目的基因的过程是：根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测DNA中脱氧核苷酸的排列顺序，通过化学方法合成。（2）PCR过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件。（3）目的基因和运载体结合，形成基因表达载体。（4）有利用大肠杆菌做受体细胞时，需要先用Ca2+处理，使之成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子专题1基因工程-同步检测（二）
22、15.（1）全部部分（2）筛选（3）乙表达产物耐旱性（4）同源染色体的一条上16.【答案】（1）同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）；DNA分子杂交（或核酸探针）（2）超数排卵；获能（处理）（3）显微注射法；性别鉴定；全能性（4）htPA（或人组织纤溶酶原激活物）【解析】（1）用同种限制酶切割质粒和含有htPA基因的DNA片段可产生相同的黏性末端，便于构建基因表达载体；通常采用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否已插入受体细胞DNA。（2） 为获得更多的卵母细胞，通常对供体母羊注射促性腺激素使其超数排卵；采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。（3） 通常用显微注射法将重组表达载体导入动物的受精卵；为了获得母羊，移植前需要对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定；早期胚胎细胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技术获得多个转基因个体。htPA基因的表达产物为人组织纤溶酶原激活物，若在转基因母羊的羊乳中检测到人组织纤溶酶原激活物，说明目的基因成功表达。-