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1、关于微生物的显微镜直接计数法第一张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验目的实验目的学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。微镜下测定微生物大小的方法。学习使用血球记数板测定微生物数量的学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。方法。第二张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验材料实验材料显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球记数板、酵母菌悬液、盖玻片、血球记数板、酵母菌悬液、盖玻片、无菌滴管、吸水纸、擦镜纸。无菌滴管、吸水纸、擦镜纸。第三张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验步骤实验步骤测定酵母
2、菌细胞的大小测定酵母菌细胞的大小测定的工具:目镜测微尺测定的工具:目镜测微尺 镜台测微尺镜台测微尺目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍数而改变,也会因使用不同的显微镜而产生误差,因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。目镜测微尺的每格长度(m)=镜台测微尺10/目镜测微尺第四张,PPT共十一页,创作于2022年6月酵母菌酵母菌显微直接计数显微直接计数 方法:活菌计数法方法:活菌计数法平板菌落计数法;总菌计数法平板菌落计数法;总菌计数法血球计数板或霍瑟(血球计数板或霍瑟(Peroff Hausser)细菌计数板(二者原)细菌计数板(二者原理和部件相同,只是厚薄不同而已)。理和部件相同,只是厚
3、薄不同而已)。细胞数/ml=100小格内细胞总数100400101000稀释倍数细胞数/ml=80小格内细胞总数80400101000稀释倍数第五张,PPT共十一页,创作于2022年6月1.取清洁无油的血球计数板,在计数室上面加盖取清洁无油的血球计数板,在计数室上面加盖血盖片。血盖片。2.取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴一小滴,取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴一小滴,使菌液自行渗入,计数室内不得有气泡。使菌液自行渗入,计数室内不得有气泡。3.用用4镜观察并将计数室移至视野中央。镜观察并将计数室移至视野中央。4.在在4镜下计数:计数镜下计数:计数4个(或个(或5个)中格的平均值,个)
4、中格的平均值,然后求得每个中格的平均值。乘上然后求得每个中格的平均值。乘上16(或(或25)就得)就得出计数区总菌数,最后再换算到每出计数区总菌数,最后再换算到每mL菌液中的含菌液中的含菌数。菌数。5.注意事项:注意事项:计上不计下,计左不计右。出芽计一计上不计下,计左不计右。出芽计一半半第六张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验结果实验结果目镜测微尺标定结果:目镜下倍物镜目镜测微尺每格长度是 m。菌号酵母的直径大小测定结果目镜测微尺格数实际直径/m12345均值第七张,PPT共十一页,创作于2022年6月将显微计数结果记录于下表中。T表示五个中方格中的总菌数;D表示菌液稀释倍数。各中格中菌数TD二室平均值个/ml12345第一室第二室第八张,PPT共十一页,创作于2022年6月问题与讨论问题与讨论为什么目镜测微尺必须用镜台测微尺来为什么目镜测微尺必须用镜台测微尺来校正?校正?在显微镜下直接测定微生物数量有什么在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点?优缺点?第九张,PPT共十一页,创作于2022年6月本次实验课结束请确保血球计数板清洗干净!请值日生同学留下值日下周再见!第十张,PPT共十一页,创作于2022年6月感感谢谢大大家家观观看看第十一张,PPT共十一页,创作于2022年6月