病毒与类病毒精选PPT.ppt

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1、关于病毒与类病毒第1页,讲稿共81张,创作于星期二非细胞型微生物包括(真)病毒和亚病毒,非细胞型微生物包括(真)病毒和亚病毒,后者又后者又包括类病毒、拟病毒和朊病毒。包括类病毒、拟病毒和朊病毒。(真)病毒(真)病毒(virus):至少含有核酸和蛋白质两种至少含有核酸和蛋白质两种 组分组分.亚病毒亚病毒:类病毒类病毒(viroid):只含单独具侵染性的:只含单独具侵染性的RNA组分组分.拟病毒拟病毒(virusoid):只含不具单独侵染性的:只含不具单独侵染性的RNA 组分组分.朊病毒朊病毒(prion):只含蛋白质一种组分:只含蛋白质一种组分.病毒和亚病毒病毒和亚病毒非细胞生物的种类非细胞生物

2、的种类第2页,讲稿共81张,创作于星期二第三章第三章 病毒与亚病毒病毒与亚病毒第一节第一节 病毒病毒第二节第二节 亚病毒亚病毒第三节第三节 病毒与实践病毒与实践第3页,讲稿共81张,创作于星期二第一节第一节 病毒病毒一、概述一、概述二、病毒(二、病毒(virus)的形态构造和化学成分)的形态构造和化学成分三、四类病毒及其繁殖方式三、四类病毒及其繁殖方式第4页,讲稿共81张,创作于星期二一、概述一、概述 病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超 显微显微“非细胞型生物非细胞型生物”,其本质是一种只含,其本质是一种只含DNA或或RNA 的遗传因子

3、,能以感染态和非感染态两种状态存在。的遗传因子,能以感染态和非感染态两种状态存在。病毒病毒(virus),拉丁语的原意是,拉丁语的原意是“毒素毒素”。病毒和病毒颗粒、病毒粒、病毒体病毒和病毒颗粒、病毒粒、病毒体(virijon)是其同义词。是其同义词。第5页,讲稿共81张,创作于星期二1、形态极其微小、形态极其微小,必须在电镜下观察必须在电镜下观察,一般具过滤性一般具过滤性;2、没有细胞构造、没有细胞构造,其主要成分仅是核酸和蛋白质两种,故称其主要成分仅是核酸和蛋白质两种,故称分子生物分子生物;3、每一种病毒只含一种核酸、每一种病毒只含一种核酸,不是不是DNA就是就是RNA;4、既无产能酶系、

4、既无产能酶系,也无蛋白质和核酸酶合成系统,只能活细胞内也无蛋白质和核酸酶合成系统,只能活细胞内专性寄生,专性寄生,5、靠其宿主代谢系统的协助来复制核酸、合成蛋白质等组、靠其宿主代谢系统的协助来复制核酸、合成蛋白质等组分,然后再进行装配而得以增殖,形成子代;分,然后再进行装配而得以增殖,形成子代;6、在离体条件下、在离体条件下,能以无生命的化学大分子状态存在能以无生命的化学大分子状态存在,并可并可长期长期保持其侵染活力保持其侵染活力;7、对一般抗生素不敏感、对一般抗生素不敏感,但对干扰素敏感。但对干扰素敏感。8、有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中,并诱发潜、有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因

5、组中,并诱发潜伏性感染。伏性感染。(二)病毒特征(二)病毒特征第6页,讲稿共81张,创作于星期二(三)宿主范围(分布)及重要性(三)宿主范围(分布)及重要性病毒在自然界分布广、数量多。几乎可以感染所病毒在自然界分布广、数量多。几乎可以感染所有的生物,包括各类微生物、植物、昆虫、鱼类、有的生物,包括各类微生物、植物、昆虫、鱼类、禽类、哺乳动物和人类。禽类、哺乳动物和人类。根据宿主可以分为:根据宿主可以分为:动物病毒动物病毒 植物病毒植物病毒 细菌病毒(或称噬菌体)等细菌病毒(或称噬菌体)等第7页,讲稿共81张,创作于星期二二、病毒(二、病毒(virus)的形态构造)的形态构造 和化学成分和化学成

6、分(一)病毒大小(一)病毒大小(二)病毒的形态构造(二)病毒的形态构造(三)化学组成(三)化学组成第8页,讲稿共81张,创作于星期二 病毒粒子病毒粒子(virus particle):指成熟的、结构完:指成熟的、结构完整的、有感染性的病毒个体。整的、有感染性的病毒个体。在电子显微镜下呈特定的形态。在电子显微镜下呈特定的形态。第9页,讲稿共81张,创作于星期二(一)病毒大小(一)病毒大小测定病毒大小的单位是纳米(测定病毒大小的单位是纳米(109),多数病毒的直,多数病毒的直径在径在100nm以下以下:150nm 大型病毒(最大大型病毒(最大300 nm)绝大多数病毒是能通过细菌滤器绝大多数病毒是

7、能通过细菌滤器,须用电镜才能观察须用电镜才能观察到其具体形态和大小。到其具体形态和大小。第10页,讲稿共81张,创作于星期二 病病 毒毒 大大 小小牛痘苗病毒牛痘苗病毒传染性浓泡皮炎病毒传染性浓泡皮炎病毒腮腺炎病毒腮腺炎病毒T T偶数病毒偶数病毒疱疹病毒疱疹病毒大蚊病毒大蚊病毒流感病毒流感病毒烟草花叶病毒烟草花叶病毒腺病毒腺病毒多瘤病毒多瘤病毒脊髓灰质炎病毒脊髓灰质炎病毒1微米微米第11页,讲稿共81张,创作于星期二(二)病毒的形态(二)病毒的形态多数病毒呈球形或近似球形,杆状,丝状,少数可为子弹状、多数病毒呈球形或近似球形,杆状,丝状,少数可为子弹状、砖块状,噬菌体可呈蝌蚪状。砖块状,噬菌体

8、可呈蝌蚪状。第12页,讲稿共81张,创作于星期二1、病毒粒子的基本结构、病毒粒子的基本结构 衣壳衣壳 核心核心包膜包膜刺突刺突核衣壳核衣壳衣壳粒衣壳粒第13页,讲稿共81张,创作于星期二病毒粒子结构模式图病毒粒子结构模式图A 结构简单的病毒粒子;结构简单的病毒粒子;B 结构复杂的病毒粒子结构复杂的病毒粒子第14页,讲稿共81张,创作于星期二2、病毒的对称体制、病毒的对称体制三类典型形态的病毒:三类典型形态的病毒:廿面体对称的结构廿面体对称的结构(球状球状)螺旋对称的结构螺旋对称的结构(杆状杆状)复合对称的结构复合对称的结构(蝌蚪状蝌蚪状)大肠杆菌的大肠杆菌的T T偶数噬菌体是由椭圆偶数噬菌体是

9、由椭圆形的二十面体头部和螺旋对称的尾形的二十面体头部和螺旋对称的尾部组合而成,是病毒中复合对称的部组合而成,是病毒中复合对称的代表。代表。第15页,讲稿共81张,创作于星期二病毒粒子的对称体制病毒粒子的对称体制螺旋对称螺旋对称二十面体对称二十面体对称复合对称复合对称(A)Filamentous(B)Complex(C)Eicosahedral(D)EnvelopedRNA or DNAProtein Coat(Capsomers)Lipid envelope第16页,讲稿共81张,创作于星期二3、三类典型形态的病毒及其代表、三类典型形态的病毒及其代表二十面体对称的代表二十面体对称的代表-腺病毒

10、腺病毒复合对称的代表复合对称的代表-T-T偶数噬菌体偶数噬菌体螺旋对称的代表螺旋对称的代表-烟草花叶病毒烟草花叶病毒(TMV)(TMV)第17页,讲稿共81张,创作于星期二(1)螺旋对称的代表)螺旋对称的代表-烟草花叶病毒烟草花叶病毒 (tobaco mosaicvirus,TMV)有三种类型:纤维状、直杆状和弯曲杆状。衣壳形似一中空柱,内包核有三种类型:纤维状、直杆状和弯曲杆状。衣壳形似一中空柱,内包核酸,衣壳粒和核酸呈螺旋对称形排列。由酸,衣壳粒和核酸呈螺旋对称形排列。由95衣壳衣壳Pr和和5SSRNA组成。组成。蛋白质衣壳由衣壳粒(蛋白质衣壳由衣壳粒(2130个)一个紧挨一个地呈螺旋排列

11、而成,个)一个紧挨一个地呈螺旋排列而成,ssRNA位于衣壳内侧螺旋状沟中。位于衣壳内侧螺旋状沟中。第18页,讲稿共81张,创作于星期二(2)二十面体对称的代表腺病毒)二十面体对称的代表腺病毒(Adenovirus)具有具有20个面,个面,30条边和条边和12个顶角。核衣壳由不同个顶角。核衣壳由不同数量的衣壳粒按一定方式排列成对称体。腺病数量的衣壳粒按一定方式排列成对称体。腺病毒粒子共由毒粒子共由252个球形的衣壳粒排列成一个具有廿个球形的衣壳粒排列成一个具有廿面的对称体,线状面的对称体,线状dsDNA。噬菌体噬菌体 X174只有只有12个衣壳粒,最大的廿面体是由个衣壳粒,最大的廿面体是由1,4

12、72个衣壳粒组成的昆虫病毒粒子。个衣壳粒组成的昆虫病毒粒子。第19页,讲稿共81张,创作于星期二绝大多数噬菌体为蝌蚪形,现以绝大多数噬菌体为蝌蚪形,现以E.coli T4为例,介绍蝌蚪形为例,介绍蝌蚪形噬菌体的结构:噬菌体的结构:大肠杆菌大肠杆菌T4T4噬菌体构造噬菌体构造(3)复合对称的代表)复合对称的代表T偶数噬菌体偶数噬菌体95nm95nm65nm24环环颈环颈环第20页,讲稿共81张,创作于星期二3、病毒的群体形态、病毒的群体形态包涵体包涵体(inclusion body)噬菌斑噬菌斑(plaque)空斑空斑(plaque)枯斑枯斑(lesion)病毒的群体形态有:病毒的群体形态有:第

13、21页,讲稿共81张,创作于星期二(1)包涵体)包涵体(inclusion body)概念:感染病毒的宿主细胞内,出现在光学显微镜下可概念:感染病毒的宿主细胞内,出现在光学显微镜下可见的大小、形态、数量不等的小体,称为包涵体。见的大小、形态、数量不等的小体,称为包涵体。在宿主细胞内形成包涵体是病毒的特征,不同的病毒其形成在宿主细胞内形成包涵体是病毒的特征,不同的病毒其形成的包涵体具有不同的形态、结构、和特性。的包涵体具有不同的形态、结构、和特性。包涵体在细胞中的形成部位:包涵体在细胞中的形成部位:位于细胞核内位于细胞核内如包疹病毒如包疹病毒 位于细胞质内位于细胞质内如狂犬病毒等如狂犬病毒等 胞

14、核内胞质都有胞核内胞质都有麻疹病毒麻疹病毒 第22页,讲稿共81张,创作于星期二包涵体(包涵体(inclusion body)是病毒的聚集体是病毒的聚集体;是病毒的合成部位是病毒的合成部位;是病毒蛋白和与病毒感染有关的蛋白质是病毒蛋白和与病毒感染有关的蛋白质非病毒性包涵体非病毒性包涵体,由化学因子或细菌感染形成由化学因子或细菌感染形成包涵体的实践意义包涵体的实践意义-病毒鉴定、临床诊断依据。病毒鉴定、临床诊断依据。第23页,讲稿共81张,创作于星期二(2)噬菌斑噬菌斑(plaque)噬菌斑是指在宿主细菌的菌噬菌斑是指在宿主细菌的菌苔上,噬菌体使菌体裂解而苔上,噬菌体使菌体裂解而形成的空斑。形成

15、的空斑。应用:应用:1 1、噬菌体定量计数、噬菌体定量计数2 2、噬菌体的鉴定、噬菌体的鉴定第24页,讲稿共81张,创作于星期二空斑和病斑空斑和病斑 在动物细胞培养物上的与噬菌斑类似的空斑在动物细胞培养物上的与噬菌斑类似的空斑,称为病称为病斑斑.因为受肿瘤病毒感染。因为受肿瘤病毒感染。空斑和病斑用于动物病毒粒子的计数也可以采用噬菌空斑和病斑用于动物病毒粒子的计数也可以采用噬菌斑法类似的技术。斑法类似的技术。第25页,讲稿共81张,创作于星期二枯斑:枯斑:植物病毒在植物叶片上形成的群体植物病毒在植物叶片上形成的群体 称为枯斑。称为枯斑。第26页,讲稿共81张,创作于星期二(三)化学组成(三)化学

16、组成 病毒的主要成分为核酸(病毒的主要成分为核酸(DNA或或RNA)和蛋白质。有)和蛋白质。有的病毒还含有脂质、糖类等其他组分。的病毒还含有脂质、糖类等其他组分。第27页,讲稿共81张,创作于星期二1 1、病毒的核酸、病毒的核酸 v病毒核酸是病毒粒中最重要的成分,是病毒繁殖、遗病毒核酸是病毒粒中最重要的成分,是病毒繁殖、遗传变异与感染性的物质基础。核酸构成了病毒的基因传变异与感染性的物质基础。核酸构成了病毒的基因组。组。v病毒核酸的种类很多,是病毒分类鉴定中的重要指病毒核酸的种类很多,是病毒分类鉴定中的重要指标:标:是是DNA还是还是RNA;是单链还是双链;是单链还是双链;呈线状还是环状;呈线

17、状还是环状;是闭环还是开口环;是闭环还是开口环;基因组是单分子、双分子、三分子或多分子;基因组是单分子、双分子、三分子或多分子;核酸的碱基或碱基对数;核酸的碱基或碱基对数;核苷酸序列,等。核苷酸序列,等。第28页,讲稿共81张,创作于星期二一种病毒只含有一种核酸(一种病毒只含有一种核酸(DNA或或RNA)。)。植物病毒绝大多数含植物病毒绝大多数含DNA;少数含少数含RNA;动物病毒一部分含动物病毒一部分含DNA,一部分含,一部分含RNA;细菌病毒普遍含细菌病毒普遍含DNA,含,含RNA的极少。的极少。病毒的核酸类型极为多样化:病毒的核酸类型极为多样化:病毒的病毒的DNA与与RNA均有单链和双链

18、:均有单链和双链:dsDNA ssDNA dsRNA ssRNA 病毒核酸的种类病毒核酸的种类第29页,讲稿共81张,创作于星期二病毒病毒DNA分子有线装和环状之分。分子有线装和环状之分。第30页,讲稿共81张,创作于星期二2.2.病毒的蛋白质病毒的蛋白质有的病毒只有一种蛋白质,多数含有为数不多的几种有的病毒只有一种蛋白质,多数含有为数不多的几种蛋白质。蛋白质。病毒蛋白质的氨基酸组成与其他生物一样,但不同病病毒蛋白质的氨基酸组成与其他生物一样,但不同病毒蛋白质的氨基酸组成和含量各不相同。毒蛋白质的氨基酸组成和含量各不相同。病毒蛋白质主要在构成病毒结构、病毒的侵染与增殖病毒蛋白质主要在构成病毒结

19、构、病毒的侵染与增殖过程中发挥作用。过程中发挥作用。第31页,讲稿共81张,创作于星期二3.其他成分其他成分一些较复杂的病毒(如包膜病毒)除含有核酸和蛋白质一些较复杂的病毒(如包膜病毒)除含有核酸和蛋白质两种成分外,还含有脂类、多糖等其他成分。两种成分外,还含有脂类、多糖等其他成分。第32页,讲稿共81张,创作于星期二三、各类病毒及其繁殖方式三、各类病毒及其繁殖方式原核生物病毒原核生物病毒噬菌体噬菌体植物病毒植物病毒人类和脊椎动物病毒人类和脊椎动物病毒昆虫病毒昆虫病毒第33页,讲稿共81张,创作于星期二(一一)原核生物的病毒原核生物的病毒噬菌体噬菌体噬菌体:噬菌体:是病毒中的一种,一般把侵染细

20、菌、放线菌、是病毒中的一种,一般把侵染细菌、放线菌、蓝蓝细菌细菌的病毒叫噬菌体,包括噬细菌体、噬放线菌体、的病毒叫噬菌体,包括噬细菌体、噬放线菌体、噬蓝细菌体等。噬蓝细菌体等。把侵染真菌的病毒叫噬真菌体。把侵染真菌的病毒叫噬真菌体。噬菌体共有六类形态。噬菌体共有六类形态。第34页,讲稿共81张,创作于星期二噬菌体的六类形态:噬菌体的六类形态:T-系噬菌体系噬菌体T-系噬菌体是研究的最广泛而又深入的细菌噬系噬菌体是研究的最广泛而又深入的细菌噬菌体,按发现的先后顺序进行从菌体,按发现的先后顺序进行从T1-T7编号,后来发现其中偶编号,后来发现其中偶数者的形态都相同(蝌蚪形收缩性长尾),故统称数者的

21、形态都相同(蝌蚪形收缩性长尾),故统称T偶数噬菌偶数噬菌体体。第35页,讲稿共81张,创作于星期二噬菌体的类型噬菌体的类型温和噬菌体(温和噬菌体(temperate phrage)噬菌体感染细噬菌体感染细胞后,将其核酸整合(插入)到宿主的核胞后,将其核酸整合(插入)到宿主的核DNA上,并上,并且可以随宿主且可以随宿主DNA的复制而进行同步复制,在一般的复制而进行同步复制,在一般情况下,不引起寄主细胞裂解的噬菌体。情况下,不引起寄主细胞裂解的噬菌体。烈性噬菌体(烈性噬菌体(virulent phage)感染细胞后感染细胞后,能在能在寄主细胞内增殖,产生大量子代噬菌体并引起细菌裂解寄主细胞内增殖,

22、产生大量子代噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体。的噬菌体。第36页,讲稿共81张,创作于星期二噬菌体的繁殖分为:吸附、侵入、增殖(复制与生物噬菌体的繁殖分为:吸附、侵入、增殖(复制与生物合成)、成熟(装配)和裂解(释放)合成)、成熟(装配)和裂解(释放)5个阶段。个阶段。(1 1)噬菌体的繁殖)噬菌体的繁殖裂解性周期(增殖性周期):烈性噬菌体的繁殖过程。裂解性周期(增殖性周期):烈性噬菌体的繁殖过程。第37页,讲稿共81张,创作于星期二 吸附吸附(adsorption)噬菌体对宿主细胞的吸附具高度的特异性。噬菌体对宿主细胞的吸附具高度的特异性。吸附的机理:尾丝尖端与受体发生共价结合吸附的机理:尾丝尖

23、端与受体发生共价结合。第38页,讲稿共81张,创作于星期二影响吸附的因素影响吸附的因素:噬菌体数量噬菌体数量;阳离子浓度阳离子浓度;温度温度;辅助因辅助因子(色子(色AA、生物素)等。、生物素)等。自外裂解:大量噬菌体吸附在同一细胞表面并释放众多的溶菌自外裂解:大量噬菌体吸附在同一细胞表面并释放众多的溶菌酶,最终因外在的原因导致细胞裂解。酶,最终因外在的原因导致细胞裂解。第39页,讲稿共81张,创作于星期二 侵入侵入(penetration)头部的核酸通过头部的核酸通过中空的尾髓压入中空的尾髓压入细胞内,而蛋白质细胞内,而蛋白质外壳则留在细胞外。外壳则留在细胞外。尾鞘的收缩性可尾鞘的收缩性可明

24、显提高噬菌体明显提高噬菌体核酸注入的速率。核酸注入的速率。第40页,讲稿共81张,创作于星期二 增殖增殖(replication)包括核酸的复制和蛋包括核酸的复制和蛋白质的生物合成。白质的生物合成。增殖是通过噬菌体基增殖是通过噬菌体基因表达实现的。因表达实现的。核酸的复制与病毒蛋白核酸的复制与病毒蛋白质的合成是分开进行的。质的合成是分开进行的。第41页,讲稿共81张,创作于星期二病毒核酸链接入寄主核酸链病毒核酸链接入寄主核酸链 病毒核酸复制病毒核酸复制病毒核酸的复制病毒核酸的复制第42页,讲稿共81张,创作于星期二 成熟(装配)成熟(装配)已合成的各部件进行自行装配成新的噬菌体的过程。已合成的

25、各部件进行自行装配成新的噬菌体的过程。T偶数噬菌体装配过程模式图偶数噬菌体装配过程模式图第43页,讲稿共81张,创作于星期二被感染细胞裂解,成熟的子代噬菌体转移到外界。被感染细胞裂解,成熟的子代噬菌体转移到外界。开始开始新的生活史。新的生活史。裂解(释放)裂解(释放)裂解量:平均每一宿主细胞裂解后所产生的裂解量:平均每一宿主细胞裂解后所产生的 子代噬菌体数。子代噬菌体数。第44页,讲稿共81张,创作于星期二有囊膜病毒以有囊膜病毒以“出芽出芽”方式释放方式释放第45页,讲稿共81张,创作于星期二2、噬菌体效价的测定、噬菌体效价的测定效价(噬菌斑形成单位数、感染中心数):每效价(噬菌斑形成单位数、

26、感染中心数):每ml样品中样品中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数。所含有的具侵染性的噬菌体粒子数。测定方法:测定方法:斑点试验法、液体稀释管法、单层平板法、斑点试验法、液体稀释管法、单层平板法、双层平板法、快速玻片法双层平板法、快速玻片法第46页,讲稿共81张,创作于星期二琼脂平板琼脂平板菌液菌液+噬菌体试样噬菌体试样+琼脂培养基琼脂培养基培养培养1010余小时余小时计数噬菌斑计数噬菌斑噬菌斑数噬菌斑数=试样中噬菌体数试样中噬菌体数双层平板法双层平板法第47页,讲稿共81张,创作于星期二3、噬菌体增殖规律的描述方法、噬菌体增殖规律的描述方法 一步生长曲线一步生长曲线定量描述烈性噬菌体生长规律的实

27、验曲线。定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。第48页,讲稿共81张,创作于星期二(1)一步生长曲线的基本实验步骤)一步生长曲线的基本实验步骤离离 心心 术术抗病毒血清抗病毒血清培养培养定时取样测噬菌斑数定时取样测噬菌斑数以培养时间为横坐标,以噬菌斑数为纵坐标,以培养时间为横坐标,以噬菌斑数为纵坐标,绘出的曲线为一步生长曲线。绘出的曲线为一步生长曲线。第49页,讲稿共81张,创作于星期二(2 2)一步生长曲线的三个阶段)一步生长曲线的三个阶段:潜伏期、裂解期、平稳期潜伏期、裂解期、平稳期 1)潜伏期)潜伏期 噬菌体的核酸侵入宿主细噬菌体的核酸侵入宿主细胞至第一个成熟噬菌体粒子装配前胞至第一个成

28、熟噬菌体粒子装配前的一段时间。可分为两个阶段:隐的一段时间。可分为两个阶段:隐晦期、胞内累积期。晦期、胞内累积期。2)裂解期)裂解期 紧接在潜伏期后的宿主细胞迅紧接在潜伏期后的宿主细胞迅速裂解、溶液中噬菌体粒子急剧增多的速裂解、溶液中噬菌体粒子急剧增多的一段时间。一段时间。3)平稳期)平稳期 感染后的宿主细胞已全部裂解,感染后的宿主细胞已全部裂解,溶液中噬菌体效价达到最高点的时期。溶液中噬菌体效价达到最高点的时期。第50页,讲稿共81张,创作于星期二温和噬菌体特点温和噬菌体特点游离态游离态温和整合态温和整合态(原噬菌体)原噬菌体)营养态营养态具有整合能力;具有整合能力;具有同步复制能力;具有同

29、步复制能力;都是都是dsDNA;4、溶源性、溶源性溶源性:温和噬菌体侵入宿主细菌细胞后,由于其核溶源性:温和噬菌体侵入宿主细菌细胞后,由于其核酸整合到宿主核基因组上,并随宿主核酸同步复制,酸整合到宿主核基因组上,并随宿主核酸同步复制,并不引起宿主细胞裂解的特性。子代均具有溶源性。并不引起宿主细胞裂解的特性。子代均具有溶源性。温和噬菌体存在形式温和噬菌体存在形式第51页,讲稿共81张,创作于星期二溶源性与溶源性细菌溶源性与溶源性细菌v溶源性细菌:含有原噬菌体的细菌称为溶源性细菌溶源性细菌:含有原噬菌体的细菌称为溶源性细菌(lysogenic bacteria)或溶源化细胞)或溶源化细胞(lyso

30、geniccell)。溶源。溶源菌是一类能和温和噬菌体长期共存,一般不会出现有害影菌是一类能和温和噬菌体长期共存,一般不会出现有害影响的细胞。响的细胞。v溶源性(溶源现象):是温和噬菌体侵入宿主细菌细胞溶源性(溶源现象):是温和噬菌体侵入宿主细菌细胞后,由于其核酸整合到宿主核基因组上,并随宿主核酸后,由于其核酸整合到宿主核基因组上,并随宿主核酸同步复制,并不引起宿主细胞裂解的特性。同步复制,并不引起宿主细胞裂解的特性。v凡能引起溶源性的噬菌体即为温和噬菌体。凡能引起溶源性的噬菌体即为温和噬菌体。第52页,讲稿共81张,创作于星期二v溶源性广泛存在于各种细菌中,如大肠杆菌、假单胞溶源性广泛存在于

31、各种细菌中,如大肠杆菌、假单胞菌、沙门氏菌、链球菌、芽孢杆菌、棒杆菌、弧菌和菌、沙门氏菌、链球菌、芽孢杆菌、棒杆菌、弧菌和极毛杆菌等。极毛杆菌等。v溶源性菌株命名:在敏感菌株的名称后面加一括号,其中写溶源性菌株命名:在敏感菌株的名称后面加一括号,其中写上溶源性噬菌体,例如上溶源性噬菌体,例如E.coliK12()。第53页,讲稿共81张,创作于星期二(5)裂解性循环与溶原性循环的关系)裂解性循环与溶原性循环的关系裂解性循环和溶源性循环的相互关系裂解性循环和溶源性循环的相互关系第54页,讲稿共81张,创作于星期二溶源性细菌的测定溶源性细菌的测定 1)将少量溶源菌与大量敏感性的指示菌相混合;)将少

32、量溶源菌与大量敏感性的指示菌相混合;2)与琼脂培养基混匀后倒平板;)与琼脂培养基混匀后倒平板;3)经培养后溶源菌长出如图菌落。)经培养后溶源菌长出如图菌落。第55页,讲稿共81张,创作于星期二噬菌体的应用噬菌体的应用 噬菌体会给人类造成损失,利用微生物进行发酵的工噬菌体会给人类造成损失,利用微生物进行发酵的工业常深受其害。但是,由于噬菌体的某些生物学特性,业常深受其害。但是,由于噬菌体的某些生物学特性,使其在人类的生产实践和生物学基础理论研究中都有使其在人类的生产实践和生物学基础理论研究中都有一定价值。可概括为以下几方面。一定价值。可概括为以下几方面。第56页,讲稿共81张,创作于星期二1)用

33、于鉴定未知细菌用于鉴定未知细菌 在医学上,有些难鉴别的病原菌,利用噬在医学上,有些难鉴别的病原菌,利用噬菌体对宿主细胞的高度专化性的敏感性,不仅可鉴定到菌种,菌体对宿主细胞的高度专化性的敏感性,不仅可鉴定到菌种,而且可鉴定到菌型。而且可鉴定到菌型。2)用于临床用于临床 治疗某些传染性疾病。治疗某些传染性疾病。如果将噬菌体制剂与抗生素或如果将噬菌体制剂与抗生素或者磺胺药物配合应用,则效果更好。者磺胺药物配合应用,则效果更好。3)检验植物病原菌检验植物病原菌 利用噬菌体可以检验由种子携带的植物利用噬菌体可以检验由种子携带的植物病原菌。病原菌。4)测定辐射剂量测定辐射剂量 某些噬菌体某些噬菌体(如如

34、T2)对辐射剂量的反应敏感而精对辐射剂量的反应敏感而精确。确。5)噬菌体在分子生物学研究中的作用噬菌体在分子生物学研究中的作用 噬菌体现已成为进行噬菌体现已成为进行分子生物学研究的较为理想的重要材料。分子生物学研究的较为理想的重要材料。第57页,讲稿共81张,创作于星期二(二)植物病毒(二)植物病毒已知的植物病毒多达已知的植物病毒多达700种(种(1989年),多数是年),多数是ssRNA病毒。病毒。形态:杆、丝、球状,一般无包膜。形态:杆、丝、球状,一般无包膜。1619年荷兰画师描画的有病郁金香的画像。年荷兰画师描画的有病郁金香的画像。第58页,讲稿共81张,创作于星期二病毒侵染对花瓣颜色的

35、影响第59页,讲稿共81张,创作于星期二植物病毒的特点植物病毒的特点1.病毒粒子形态多杆状病毒粒子形态多杆状2.核酸多为单链核酸多为单链RNA3.感染的专化性不强,一种病毒可感染不同科、感染的专化性不强,一种病毒可感染不同科、属的植物属的植物4.混合感染常见,即一种植物可被多种病毒感染混合感染常见,即一种植物可被多种病毒感染第60页,讲稿共81张,创作于星期二第61页,讲稿共81张,创作于星期二引起的症状:引起的症状:因叶绿体被破坏或不能合成叶绿素而使叶因叶绿体被破坏或不能合成叶绿素而使叶片发生花叶、黄化或红化症状;片发生花叶、黄化或红化症状;植株发生矮化、丛枝或畸形;植株发生矮化、丛枝或畸形

36、;形成枯斑或坏死。形成枯斑或坏死。病毒侵染对花瓣颜色的影响第62页,讲稿共81张,创作于星期二借昆虫刺吸式口器进入、通过借昆虫刺吸式口器进入、通过伤口或嫁接进入伤口或嫁接进入 ,再通过胞,再通过胞间连丝或输导组织迅速向其它间连丝或输导组织迅速向其它部位扩散引起普遍感染。部位扩散引起普遍感染。1、“侵入侵入”方式方式3、核酸的复制和蛋白质的合成、核酸的复制和蛋白质的合成2、脱壳、脱壳植物病毒侵入宿主细胞后才能发生脱壳。植物病毒侵入宿主细胞后才能发生脱壳。增殖过程增殖过程 4、装配(成熟)、装配(成熟)第63页,讲稿共81张,创作于星期二(三)人类和脊椎动物病毒(三)人类和脊椎动物病毒在人类与脊椎

37、动物中广泛寄生着相应的病毒。人类传染病在人类与脊椎动物中广泛寄生着相应的病毒。人类传染病80由病毒引起(由病毒引起(300种),脊椎动物病毒种),脊椎动物病毒900种,许种,许多病毒引起人畜共患病。另一些病毒感染动物后,并不致多病毒引起人畜共患病。另一些病毒感染动物后,并不致死宿主细胞,而是引起肿瘤。死宿主细胞,而是引起肿瘤。种类种类 dsDNA、ssDNA、dsRNA、ssRNA。衣壳外有的有包膜,有的无包膜,有的包膜上有刺突。衣壳外有的有包膜,有的无包膜,有的包膜上有刺突。第64页,讲稿共81张,创作于星期二病毒感染的防治病毒感染的防治接种疫苗、接种疫苗、生物制剂、生物制剂、中药预防、中药

38、预防、干扰素等。干扰素等。增殖过程增殖过程与噬菌体的增殖大致相同,可分为五个连续步骤:与噬菌体的增殖大致相同,可分为五个连续步骤:1)吸附)吸附 具高度专一性地吸附于敏感细胞表面的受体。具高度专一性地吸附于敏感细胞表面的受体。2)侵入)侵入 以胞饮、包膜溶入细胞膜、特异受体转移等方式侵入以胞饮、包膜溶入细胞膜、特异受体转移等方式侵入敏感细胞内。敏感细胞内。3)脱壳)脱壳 脱去衣壳和包膜。脱去衣壳和包膜。4)生物合成)生物合成 核酸的复制和蛋白质的合成。核酸的复制和蛋白质的合成。5)装配和成熟)装配和成熟 分别合成的核酸和蛋白质组合成完整的、新分别合成的核酸和蛋白质组合成完整的、新的病毒粒子。的

39、病毒粒子。6)释放大量有侵染性的子代病毒。)释放大量有侵染性的子代病毒。第65页,讲稿共81张,创作于星期二 多角体:多角体:多数昆虫病毒可在宿主细胞内形成光镜下多数昆虫病毒可在宿主细胞内形成光镜下呈多角形的包涵体。呈多角形的包涵体。直径一般直径一般3m(0.510m),碱溶性蛋白,内),碱溶性蛋白,内包裹数目不等的病毒粒,可在细胞核或细胞质内包裹数目不等的病毒粒,可在细胞核或细胞质内形成。形成。功能:功能:保护病毒粒免受外界不良环境的破坏。保护病毒粒免受外界不良环境的破坏。(四)昆虫病毒(四)昆虫病毒(无脊椎动物病毒)(无脊椎动物病毒)已知昆虫病毒已知昆虫病毒1671种(种(1990),其中

40、),其中80以上鳞翅目以上鳞翅目昆虫的病原体。昆虫的病原体。第66页,讲稿共81张,创作于星期二昆虫病毒的种类昆虫病毒的种类除非包涵体病毒病毒外,可分为:除非包涵体病毒病毒外,可分为:核型多角体病毒核型多角体病毒(nuclear polyhedrosis virus,NPV)质型多角体病毒质型多角体病毒(cytoplasmic polyhedrosis virus,CPY)颗粒体病毒颗粒体病毒(granulosis virus,GV)第67页,讲稿共81张,创作于星期二昆虫病毒做为生物农药优点:昆虫病毒做为生物农药优点:专一性高专一性高毒力大毒力大后效长后效长使用方便使用方便对人畜安全对人畜安

41、全无公害无公害缺点危害经济动物缺点危害经济动物第68页,讲稿共81张,创作于星期二1 1 1 类病毒类病毒(Viroid)拟病毒拟病毒(Virusoid)朊病毒朊病毒(Prion)第二节第二节 亚亚 病病 毒毒只含核酸或蛋白质一种成分的分子病原体。只含核酸或蛋白质一种成分的分子病原体。包括:包括:第69页,讲稿共81张,创作于星期二一、类病毒一、类病毒 v只含只含RNA一种成分,专性活细胞内寄生的分子病原体。一种成分,专性活细胞内寄生的分子病原体。v是寄生于高等生物细胞中一类最小的新的病原体。是寄生于高等生物细胞中一类最小的新的病原体。ssRNA,分子量约,分子量约5104Da12104Da,

42、为已知最小病,为已知最小病毒分子量的十分之一左右。毒分子量的十分之一左右。v到目前为止,类病毒只在植物中被发现。类病毒对各到目前为止,类病毒只在植物中被发现。类病毒对各种化学和物理因子的作用都不敏感,对热以及紫外光种化学和物理因子的作用都不敏感,对热以及紫外光和离子辐射有高度抗性。和离子辐射有高度抗性。第70页,讲稿共81张,创作于星期二类病毒类病毒(Viroid)马铃薯纺锤块茎病的病原体马铃薯纺锤块茎病的病原体长长50nm棒状棒状RNA分子分子179核苷酸半体核苷酸半体180核苷酸半体核苷酸半体RNA由由组成组成两半体间有两半体间有70碱基以氢键方碱基以氢键方 式结合共形成式结合共形成122

43、个碱基对,个碱基对,27个内环。个内环。Viroid Diseases of PotatoViroid Diseases of Potato第71页,讲稿共81张,创作于星期二二、拟病毒二、拟病毒(virusoids,类类病毒,类类病毒)是包裹在动植物病毒粒子中的类病毒极其微小,仅由裸是包裹在动植物病毒粒子中的类病毒极其微小,仅由裸露的露的RNA(300400个核苷酸)或个核苷酸)或DNA组成。组成。辅助病毒:辅助病毒:类病毒类病毒“寄生寄生”的真病毒。的真病毒。拟病毒为辅助病毒的拟病毒为辅助病毒的“卫星卫星”,其复制必须依赖辅助病,其复制必须依赖辅助病毒的协助。拟病毒也可干扰辅助病毒的复制、

44、减轻其对毒的协助。拟病毒也可干扰辅助病毒的复制、减轻其对宿主的病害、用于生物防治中。宿主的病害、用于生物防治中。第72页,讲稿共81张,创作于星期二v是一类不含核酸的侵染性蛋白质分子。是一类不含核酸的侵染性蛋白质分子。v小型蛋白质颗粒,分子量小型蛋白质颗粒,分子量3.31043.5104Da,约由约由250个氨基酸组成。个氨基酸组成。v能引起宿主体内现成的同类蛋白质分子发生与其相似的能引起宿主体内现成的同类蛋白质分子发生与其相似的构象变化而使宿主致病。构象变化而使宿主致病。v毒性很强,毒性很强,1g含朊病毒的鼠脑可感染含朊病毒的鼠脑可感染1亿只小鼠。亿只小鼠。三、朊病毒三、朊病毒第73页,讲稿

45、共81张,创作于星期二引起的疾病引起的疾病羊搔痒病、疯牛病、疯羊病、克雅氏病。羊搔痒病、疯牛病、疯羊病、克雅氏病。朊病毒侵入人体大脑的过程朊病毒侵入人体大脑的过程借食物进入消化道,再经淋巴系统侵入大脑。借食物进入消化道,再经淋巴系统侵入大脑。第74页,讲稿共81张,创作于星期二与真病毒的主要区别与真病毒的主要区别:(1)在电镜下,朊病毒呈淀粉样颗粒状,成丛排列,每丛)在电镜下,朊病毒呈淀粉样颗粒状,成丛排列,每丛大小和形状不一;大小和形状不一;(2)无核酸成分;)无核酸成分;(3)无免疫原性;)无免疫原性;(4)由宿主细胞内的基因编码;)由宿主细胞内的基因编码;(5)抗逆性强,能耐杀菌剂(甲醛

46、)和高温()抗逆性强,能耐杀菌剂(甲醛)和高温(120130处理处理4h后仍具感染性)。后仍具感染性)。第75页,讲稿共81张,创作于星期二人的库鲁病人的库鲁病(kuru)、克雅氏病、克雅氏病(Creutzfeldt Jakob disease,CJD)等等羊搔痒症羊搔痒症(scrapie)牛海绵状脑病牛海绵状脑病(spongiform encephalopathy)第76页,讲稿共81张,创作于星期二第三节第三节 病毒与实践病毒与实践 病毒与实践的关系极密切,由病毒引起人、动物、植物病病毒与实践的关系极密切,由病毒引起人、动物、植物病害,对发酵工业的不利影响,利用它们进行生物防治,生害,对发

47、酵工业的不利影响,利用它们进行生物防治,生化制药(疫苗生产)和作遗传工程中的外源基因载体等。化制药(疫苗生产)和作遗传工程中的外源基因载体等。第77页,讲稿共81张,创作于星期二发酵周期明显延长发酵周期明显延长 碳源消耗缓慢碳源消耗缓慢 发酵液清淡发酵液清淡发酵产物形成缓慢或根本不形成发酵产物形成缓慢或根本不形成 噬菌体检测会发现大量噬菌斑噬菌体检测会发现大量噬菌斑 电镜可见噬菌体电镜可见噬菌体 后果:后果:减产减产倒罐倒罐 一、噬菌体与发酵工程一、噬菌体与发酵工程噬菌体对发酵工业的危害很大噬菌体对发酵工业的危害很大,当发酵液受噬菌体严重污染时,当发酵液受噬菌体严重污染时,会出现以下异常表现:

48、会出现以下异常表现:第78页,讲稿共81张,创作于星期二发酵生产时预防措施发酵生产时预防措施决不使用可疑菌种决不使用可疑菌种 严格环境卫生严格环境卫生 活菌液严禁排放活菌液严禁排放 通气加料严控通气加料严控 严格执行会客制度严格执行会客制度 设备灭菌设备灭菌 使用抗噬菌体菌株使用抗噬菌体菌株补救方法:补救方法:尽快提取产品尽快提取产品 加药抑制加药抑制 及时更换菌种及时更换菌种 第79页,讲稿共81张,创作于星期二二、昆虫病毒用于生物防治二、昆虫病毒用于生物防治 一部分昆虫对人类有利,大量的对人类有害。利用病一部分昆虫对人类有利,大量的对人类有害。利用病毒制剂进行生物防治。毒制剂进行生物防治。优点:优点:(1)致病力强,使用量小;)致病力强,使用量小;(2)专一性质,安全可靠;)专一性质,安全可靠;(3)抗逆性强,作用久长;)抗逆性强,作用久长;(4)生产简便,成体低廉;)生产简便,成体低廉;(5)资源丰富(已发现的昆虫病毒近)资源丰富(已发现的昆虫病毒近2000种)。种)。第80页,讲稿共81张,创作于星期二感感谢谢大大家家观观看看第81页,讲稿共81张,创作于星期二

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