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1、第十二章高效液相改第1页，此课件共22页哦一、一、HPLC与经典与经典LC区别区别主要区别：固定相差别，输液设备和检测手段1经典LC：仅做为一种分离手段 柱内径柱内径13cm13cm，固定相粒径，固定相粒径100m 100m 且不均匀且不均匀 常压输送流动相常压输送流动相 柱效低（柱效低（HH，nn）分析周期长分析周期长 无法在线检测无法在线检测2HPLC：分离和分析 柱内径柱内径26mm26mm，固定相粒径，固定相粒径10m 固定相极性 底剂+有机调节剂（极性调节剂）n n 例：水 +甲醇，乙腈第15页，此课件共22页哦续前4流动相极性与k的关系：流动相极性，洗脱能力，k，组分tR5出柱顺序
2、：极性大的组分先出柱 极性小的组分后出柱6适用：非极性中等极性组分（HPLC80%问题）第16页，此课件共22页哦（三）正相键合相色谱（三）正相键合相色谱1分离机制：溶质分子与固定相之间定向作用力、诱导力、或氢键作用力2固定相：极性大的氰基或氨基键合相3流动相：极性小（同LSC）底剂 +有机极性调节剂 n n 例：正己烷 +氯仿-甲醇，氯仿-乙醇第17页，此课件共22页哦续前4流动相极性与k的关系：流动相极性，洗脱能力，组分tR，k5出柱顺序：结构相近组分，极性小的组分先出柱 极性大的组分后出柱6适用：n n氰基键合相与硅胶的柱选择性相似（极性稍小）分离物质也相似n n氨基键合相与硅胶性质差别
3、大，碱性 分析极性大物质、糖类等第18页，此课件共22页哦二、液固吸附色谱法（二、液固吸附色谱法（LSC）流动相为液体，固定相为固体吸附剂流动相为液体，固定相为固体吸附剂 1分离机制：利用溶质分子占据固定相表面吸附活性 中心能力的差异 分离前提：K不等或k不等第19页，此课件共22页哦续前2固定相：与LC比，固定相粒径不同（17%分配色谱 硅胶失活载体 吸附的水固定液第21页，此课件共22页哦三、液液分配色谱法（三、液液分配色谱法（LLC）1分离机制：利用组分在两相中溶解度的差异2固定相：载体+固定液（物理或机械涂渍法）n n 缺点：系统内部压力大，易流失，不实用 固定液极性NLLC 固定液非极性RLLC3正相色谱固定液极性 流动相极性（NLLCNLLC）n n 极性小的组分先出柱，极性大的组分后出柱 适于分离极性组分 反相色谱固定液极性 流动相极性（RLLCRLLC）n n 极性大的组分先出柱，极性小的组分后出柱 适于分离非极性组分第22页，此课件共22页哦