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1、基因工程第一节第1页，本讲稿共10页 一、限制性核酸内切酶一、限制性核酸内切酶v早在早在1970年，从细菌中分离得到。年，从细菌中分离得到。1994年分离到年分离到2300多种，多种，常用常用200多种，主要从微生物分离。多种，主要从微生物分离。v限制性核酸内切酶是能够限制性核酸内切酶是能够识别和切割识别和切割DNA分子内一小段特殊分子内一小段特殊 核苷酸序列的酶核苷酸序列的酶。（一种限制酶只能识别一种。（一种限制酶只能识别一种特定特定的核苷酸的核苷酸 序列，并在特定的切点上切割序列，并在特定的切点上切割DNA分子。）分子。）EcoRI G AATTC CTTAA G A AGCTT TTCG
2、A A 。基因操作的工具基因操作的工具第2页，本讲稿共10页重播重播第3页，本讲稿共10页限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶第4页，本讲稿共10页限制酶切割的是哪个部位的键限制酶切割的是哪个部位的键?GAPAPTPTPPCPAPAPTPTPCPGP第5页，本讲稿共10页v连接的部位连接的部位 磷酸二酯键磷酸二酯键 而不是氢键而不是氢键v结果结果 两个两个DNA相同的相同的黏性末端连接黏性末端连接起来。起来。二、二、DNA连接酶连接酶第6页，本讲稿共10页什么是质粒什么是质粒存在于细菌以及酵母菌等生物中存在于细菌以及酵母菌等生物中细胞染色体外能细胞染色体外能自主复制自主复制的的双链环状双链环状DN
3、ADNA分子分子常常有抗生素抗性基因常常有抗生素抗性基因,使细菌有抗药性使细菌有抗药性质粒与宿主细胞的关系质粒与宿主细胞的关系质粒的存在对宿主细胞无影响，质粒的存在对宿主细胞无影响，质粒的复制只能在宿主细胞内完成质粒的复制只能在宿主细胞内完成三、质粒（最常用的运载体）三、质粒（最常用的运载体）第7页，本讲稿共10页质质粒粒分分子子结结构构示示意意图图返回第8页，本讲稿共10页 基因工程是狭义的遗传工程，但广义的遗传工程泛指把基因工程是狭义的遗传工程，但广义的遗传工程泛指把一种生物的遗传物质一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移移到另一种生物的细胞中
4、去到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传，并使这种遗传物质所带的遗传信息在信息在受体细胞中表达受体细胞中表达。基因工程的核心是构建重组。基因工程的核心是构建重组DNADNA分分子，因此，早期也将基因工程称为重组子，因此，早期也将基因工程称为重组DNADNA技术。技术。什么是基因工程什么是基因工程第9页，本讲稿共10页基因工程的别名基因工程的别名操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平基本过程基本过程实质实质结果结果基因拼接技术或基因拼接技术或DNADNADNADNA重组技术重组技术生物体外生物体外基因基因基因基因DNADNA分子水平分子水平人类需要的基因产物人类需要的基因产物剪切剪切 拼接拼接拼接拼接 导入导入导入导入 表达表达表达表达基因重组基因重组基因工程的概念基因工程的概念第10页，本讲稿共10页