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1、黑龙江大大学课程名称称：微生生物检测测主讲教师师：杜春春梅职务职称称：副教教授授课对象象：生命命科学学学院（生生物工程程、生物物技术、食食品工程程）选课人数数：1116学年学期期：20008-20009学年春春季学期期总学时数数：444（理论论课266学时，实实验课116学时时）参考书目目：现代代食品微微生物检检验技术术，张伟伟、袁耀耀武主编编，化学学工业出出版社，220077食品微生生物检验验技术，魏明魁魁、段鸿鸿斌主编编，化学学工业出出版社，220088 食品品卫生微微生物检检验学，李李志明编编著，化化学工业业出版社社，20009食品检验验技术（微微生物部部分），刘刘用成主主编，中中国轻工
2、工业出版版社，220066安全食品品微生物物学，李李卫华等等译（SStepphenn J. Foorsyythee 著），中中国轻工工业出版版社，220077药品微生生物学检检验手册册，马绪绪荣、苏苏德模主主编，科科学出版版社，220033药品微生生物学鉴鉴定技术术，全国国医药职职业技术术教育研研究会编编，化学学工业出出版社，220044微生物学学检验（第第二版），刘刘运德主主编，人人民卫生生出版社社，20007第一周（880miin）教学目的的：掌握握食品药药品微生生物检验验的指标标，了解解微生物物检验在在实际生生产生活活中的重重要意义义。教学方法法：多媒媒体课件件，讲授授教学重点点难点：微
3、生物物检验的的指标、范范围、意意义是本本次课的的重点和和难点教学内容容：第一章 绪论根据美国国疾控和和预防中中心的信信息引出出微生物物学检验验的必要要性。（55minn）一、关于于食物中中毒(20miin)1概念念2举例例说明3细菌菌性食物物中毒的的特点4细菌菌性食物物中毒类类型5食品品中污染染的细菌菌分类：致病菌菌、条件件致病菌菌、非致致病菌二关于药药品污染染(15minn)1 药品品污染的的严重后后果（举举例说明明）2 药品品污染的的范围和和常见原原因三、食品品和药品品中污染染的微生生物类型型（图片片展示）(20min)1 食品品和药品品中常见见的细菌菌2 食品品和药品品中常见见的真菌菌3
4、 食品品和药品品中常见见的病毒毒4 食品品中常见见的寄生生虫5 螨课后问题题：为什么大大肠菌群群作为指指示菌?（作为为指示菌菌大肠菌菌群的优优点有哪哪些？）第二周 （800minn）教学目的的：掌握握微生物物检验的的基本程程序和要要求。教学方法法：多媒媒体课件件，讲授授教学重点点难点：如何取取样具有有代表性性是本次次课的重重点学生参考考书目: 食品品检验技技术（微微生物部部分），刘刘用成主主编，中中国轻工工业出版版社，220066 ; 1144-1332教学内容容：课堂讨论论：为什什么大肠肠菌群作作为指示示菌?（55minn）第一章绪绪论四、微生生物检验验（重点点,400minn）1、概念念2
5、、微生生物检验验的范围围（举例例说明）3、微生生物检验验的指标标（重点点和难点点）（1）菌菌落总数数（2）大大肠菌群群（3）致致病菌（4）霉霉菌及其其毒素（5）其其它指标标：病毒毒、寄生生虫、昆昆虫3、微生生物检验验的意义义第二章 微生物检检验的一一般程序序一、检验验前准备备（5mmin）二、样品品的采集集(举例例说明，20min)强调样品品必须具具有代表表性、要要有科学学的取样样方案和和正确的的样品制制备方法法1、微生生物限度度检验的的特殊性性2、抽样样对微生生物限度度检测值值的影响响3、样品品的种类类4、采样样方法（1）药药品取样样（2）食食品取样样（3）生生产工序序监测采采样（4）采采样
6、数量量和标签签三、样品品的送检检（2minn）四、样品品的处理理（10miin）1、基本本要求2、供试试液制备备的一般般方法3、有抑抑菌成分分的样品品的处理理五、样品品的检验验（2minn）六、结果果与报告告（1minn）展示程序序图，并并作概况况讲解自学问题题：下列列食品的的检样如如何制备备？1、清凉凉饮料、冷冷冻饮品品；2、冷食食菜、豆豆制品；3、糕点点、果脯脯等；44、酒类类；5、调味味品；66、方便便；面（素素食米粉粉）；77、罐藏藏食品；8、粮食食第三周 （800minn） 教学目的的：掌握握微生物物检验种种常见食食品药品品的制备备技术教学方法法：多媒媒体课件件，讲授授教学重点点难点
7、：区分卫卫生学和和致病菌菌的取样样方案学生参考考书目: 食品品检验技技术（微微生物部部分），刘刘用成主主编，中中国轻工工业出版版社，220066 ; 1144-1332教学内容容：第三章 各类食品品、药品品微生物物检验样样品的采采集与制制备第一节各各类食品品检样的的制备（440miin）一、肉与与肉制品品样品的的采集与与制备1、采样样2、样品品制备二、乳与与乳制品品1、 采采样2、样品品处理三、蛋与与蛋制品品1、采样样2、检样样的处理理四、水产产品1、采样样2、检样样的处理理讨论自学学问题：下列食食品的检检样如何何制备？1、清凉凉饮料、冷冷冻饮品品；2、冷食食菜、豆豆制品；3、糕点点、果脯脯等
8、；44、酒类类；5、调味味品；66、方便便；面（素素食米粉粉）；77、罐藏藏食品；8、粮食食第二节各各类药品品微生物物检验样样品的采采集与制制备（440miin）一、一般般供试品品（一）取取样：（二）稀稀释剂（三）供供试液制制备二、特殊殊供试品品（一）眼眼膏及软软膏剂（二）栓栓剂及油油剂（三）胶胶囊剂（四）胶胶剂（五）偏偏酸偏碱碱的供试试品第四周 （800minn） 教学目的的：掌握握食品、药药品和水水的卫生生细菌学学检验方方法教学方法法：多媒媒体课件件，讲授授教学重点点：平板板菌落计计数法测测菌落总总数，多多管发酵酵法大肠肠菌群教学难点点：菌落落总数的的计数方方法和大大肠菌群群的MPPN 检
9、检索学生参考考书目:食品检检验技术术（微生生物部分分），刘刘用成主主编，中中国轻工工业出版版社，220066 ; 1322-1447教学内容容：第四章 卫生生细菌学学检验一、菌落落总数（440miin）1 概念念2 食品品、药品品的测定定方法3 水样样的测定定（1）饮饮用水的的标准（2）水水样采集集与制备备（3）测测定程序序、稀释释度选择择和报告告方式（4）注意事项项（5）其它测定定方法：滤膜法试管稀释释法平板表面面涂布法法6其它菌菌落总数数的测定定方法二、大肠肠菌群（440miin）1、测定定程序2、检测测方法（1）薄薄膜集菌菌法（2）多多管发酵酵法（3）CCOLIIID检检测法（4）TTT
10、C（氯氯化三苯苯四氮唑唑）显色色快速法法（5）DDC（去去氧胆酸酸钠）半半固体试试管快速速法（6）纸纸片快速速法3、耐热热大肠菌菌群的测测定（1）耐耐热大肠肠菌群的的定义（2）耐耐热大肠肠菌群的的检查第五周 （880miin） 教学目的的：了解解大肠埃埃希菌的的特性，掌掌握其检检验方法法教学方法法：多媒媒体课件件，讲授授教学重点点：检验验方法教学难点点：ELLISAA检测肠肠毒素，MUG-Indole检查法学生参考考书目:食品检检验技术术（微生生物部分分），刘刘用成主主编，中中国轻工工业出版版社，220066 ; 1322-1447教学内容容：第六章病病原菌的的检验第一节 大肠埃希希菌(Esc
11、cherrichhia colli)一、 大肠埃希希菌的生生物学特特性（110miin）1、形态态与染色色2、培养养特性3、生化化特性4、抵抗抗力5、抗原原结构6、致病病力二、大肠肠埃希菌菌检查法法（300minn）IMViiC三糖铁琼琼脂（展展示图片片后，课课堂讨论论）n 志贺氏菌菌都能分分解葡萄萄糖，产产酸不产产气，大大多不发发酵乳糖糖，不产产生H22S。应应该产生生什么现现象？n 大肠杆菌菌，能分分解葡萄萄糖产酸酸产气，大大多数能能分解乳乳糖，不不产生HH2S。应应该是什什么现象象？n 沙门氏菌菌，能分分解葡萄萄糖，不不发酵乳乳糖，大大多数产产生H22S，多多数产气气。n 下面照片片所示
12、22-3-4，可可能是大大肠杆菌菌、沙门门氏菌还还是志贺贺氏菌？硫化氢试试验血清学试试验氧化酶试试验三、MUUG-IIndoole检检查法（220miin）1、原理理2、检验验程序3、注意意事项四、肠毒毒素检验验（100minn）1、产毒毒培养2、ELLISAA（enzzymee liinkeed iimmuunossorbbentt asssayy）检测LTT和ST五、快速速检测（110miin）第六周，第七周 （1160mmin） 教学目的的：了解解沙门菌菌的特性性，掌握握其检验验方法教学方法法：多媒媒体课件件，讲授授教学重点点：检验验方法教学难点点：血清清学检查查法学生参考考书目:食品检
13、检验技术术（微生生物部分分），刘刘用成主主编，中中国轻工工业出版版社，220066 ; 1322-1447教学内容容：第六章病病原菌的的检验第二节沙沙门菌检检查法一、生物物学特性性（400minn）1、形态态2、培养养特性3、生化化特性4、抗原原结构（1）抗抗原构造造（2）抗抗原变异异5、发病病机理和和症状二、沙门门菌常规规检查法法（800minn）1、培养养基及诊诊断血清清2、检验验程序预增菌:增菌分离培养养生化试验验赖氨酸脱脱羧酶试试验尿素酶试试验氰化钾试试验动力检查查血清学凝凝集试验验3、结果果判断及及报告增添一些些必要的的生化试试验。4、注意意事项三、沙门门菌噬菌菌体检验验法（110m
14、iin）四、荧光光抗体法法（100minn）五、其它它方法（110-220miin）ELISSADNA探探针PCR技技术第八周，第九周 （1160mmin） 教学目的的：了解解金黄色色葡萄球球菌的特特性，掌掌握其检检验方法法教学方法法：多媒媒体课件件，讲授授教学重点点：致病病性，检检验方法法教学难点点：血浆浆凝固酶酶试验学生参考考书目:食品检检验技术术（微生生物部分分），刘刘用成主主编，中中国轻工工业出版版社，220066 ; 1322-1447教学内容容：第六章病病原菌的的检验第三节金金黄色葡葡萄球菌菌(Staaphyyloccocccus aurreuss)检查法法一、生物物学性状状（40
15、0minn）（一）形形态与染染色（二）培培养特征征（三）生生化反应应（四）抗抗原构造造（五）抵抵抗力（六）致致病性二、常规规检查法法（800minn）增菌培养养分离培养养纯培养革兰氏染染色镜检检血浆凝固固酶试验验：结果判定定三、其他他鉴别试试验（440miin）溶血试验验法肠毒素测测定：磷酸酶试试验耐热DNNA酶试试验：触酶试验验第十周，第十一周 （1160mmin） 教学目的的：了解解梭菌的特特性，掌掌握产气气荚膜梭梭菌、破破伤风梭梭菌、肉肉毒梭菌菌检验方方法教学方法法：多媒媒体课件件，讲授授教学重点点：致病病性，检检验方法法教学难点点：特征征性生化化试验和和动物毒毒素试验验学生参考考书目:
16、食品检检验技术术（微生生物部分分），刘刘用成主主编，中中国轻工工业出版版社，220066 ; 1322-1447教学内容容：第六章病病原菌的的检验第四节 梭菌菌（Cllosttriddiumm）检查法法一、梭菌菌概述（220miin）（一）梭梭菌形态态特征（二）培培养特性性（三）检检查方法法二、产气气荚膜梭梭菌检查查（600minn）（一）生生物学特特性(二)产产气荚膜膜梭菌半半定量测测定（三）特特征性生生化试验验牛乳发酵酵乳糖分解解-明胶液液化试验验卵磷脂酶酶试验与与奈格尔尔试验三、破伤伤风梭菌菌检查法法（600minn）（一）生生物学特特性1、梭菌菌形态特特征2、培养养特性3、生化化反应4
17、、致病病力（二）检检验方法法1、增菌菌产毒培培养：2、革兰兰染色镜镜检3、毒力力试验4、分离离培养5、结果果判定（三）注注意事项项四、肉毒毒梭菌检检查法（220miin）第十二周周 （880miin） 教学目的的：掌握握GMPP 中的的微生物物检验标标准和技技术教学方法法：多媒媒体课件件，讲授授教学重点点难点：空气洁洁净度的的检测方方法学生参考考书目:药品微微生物检检定技术术，李榆榆梅主编编，化学学工业出出版社，220066 ; 85-96教学内容容：提问讨论论：肉罐罐头中应应检查哪哪种梭菌菌（100minn）第六章 GMP 中的微微生物检检验一空气洁洁净度标标准（110miin）1、英制制（
18、粒/ft33）：2009E空空气洁净净度标准准2、公制制（粒/L）：原苏联联、澳大大利亚标标准，分分三级。3、国际际公制（粒粒/米3）二、洁洁净环境境中微生生物学警警告水平平和行动动水平的的建立（110miin）1 警警告水平平2 行行动水平平三、模拟拟生产操操作步骤骤微生物物学评估估（100minn）四、空气气洁净度度的检测测方法（重重点和难难点，330miin）1、制定定采样计计划和采采样位置置的关键键因素2、采样样频率3、洁净净室采样样点布置置4、设备备5、测定定方法（1） 浮游菌测测数（2） 沉降菌测测试五、微生生物环境境控制程程序（110miin）第十三周周 （880miin）随堂考试试回顾所学学内容（440miin）课堂答疑疑（400minn）19