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1、关于酶的基本性质第一页,讲稿共三十三页哦内容内容第一节第一节第一节第一节 酶的基本性质酶的基本性质酶的基本性质酶的基本性质*第二节第二节第二节第二节 酶的分类与命名酶的分类与命名酶的分类与命名酶的分类与命名第三节第三节第三节第三节 酶的作用机制酶的作用机制酶的作用机制酶的作用机制*第四节第四节第四节第四节 酶促反应动力学酶促反应动力学酶促反应动力学酶促反应动力学*第五节第五节第五节第五节 酶活调节酶活调节酶活调节酶活调节第六节第六节第六节第六节 酶的活力测定酶的活力测定酶的活力测定酶的活力测定第七节第七节第七节第七节 维生素与辅酶维生素与辅酶维生素与辅酶维生素与辅酶第二页,讲稿共三十三页哦第一
2、节第一节 酶的基本性质酶的基本性质n n酶学发展简史酶学发展简史酶学发展简史酶学发展简史n n酶的定义酶的定义酶的定义酶的定义*n n酶的组成酶的组成酶的组成酶的组成*n n酶的功能部位酶的功能部位酶的功能部位酶的功能部位*n n酶促反应的特点酶促反应的特点酶促反应的特点酶促反应的特点第三页,讲稿共三十三页哦一、酶学发展简史一、酶学发展简史n n公元前两千多年,我国已有酿酒记载。公元前两千多年,我国已有酿酒记载。公元前两千多年,我国已有酿酒记载。公元前两千多年,我国已有酿酒记载。n n一百余年前,一百余年前,一百余年前,一百余年前,PasteurPasteur认为发酵是酵母细胞生命活动的结果。
3、认为发酵是酵母细胞生命活动的结果。认为发酵是酵母细胞生命活动的结果。认为发酵是酵母细胞生命活动的结果。n n18771877年,年,年,年,KuhneKuhne首次提出首次提出首次提出首次提出EnzymeEnzyme一词。一词。一词。一词。n n18971897年,年,年,年,BuchnerBuchner兄弟用不含细胞的酵母提取液,实现了发酵。兄弟用不含细胞的酵母提取液,实现了发酵。兄弟用不含细胞的酵母提取液,实现了发酵。兄弟用不含细胞的酵母提取液,实现了发酵。n n19261926年,年,年,年,SumnerSumner首次从刀豆中提纯出脲酶结晶。首次从刀豆中提纯出脲酶结晶。首次从刀豆中提纯
4、出脲酶结晶。首次从刀豆中提纯出脲酶结晶。n n19821982年年年年,CechCech首首首首次次次次发发发发现现现现RNARNA也也也也具具具具有有有有酶酶酶酶的的的的催催催催化化化化活活活活性性性性,提提提提出出出出核核核核酶酶酶酶(ribozyme)(ribozyme)的概念。的概念。的概念。的概念。n n19861986年,年,年,年,SchultzSchultz和和和和LernerLerner等人研制成功抗体酶(等人研制成功抗体酶(等人研制成功抗体酶(等人研制成功抗体酶(abzymeabzyme)。)。)。)。n n19951995年年年年,Jack Jack W.SzostakW
5、.Szostak研研研研究究究究室室室室首首首首先先先先报报报报道道道道了了了了具具具具有有有有DNADNA连连连连接接接接酶活性的酶活性的酶活性的酶活性的DNADNA片段,称为片段,称为片段,称为片段,称为脱氧核酶脱氧核酶脱氧核酶脱氧核酶(deoxyribozyme)(deoxyribozyme)。第四页,讲稿共三十三页哦生醇发酵 18971897年,年,BuchnerBuchner兄弟用不含细胞的酵母汁成功实现兄弟用不含细胞的酵母汁成功实现 了发酵。提出了了发酵。提出了发酵与活细胞无关,而与细胞液中发酵与活细胞无关,而与细胞液中 的酶有关的酶有关。for his biochemical r
6、esearches and his discovery of cell-free fermentation 1907 Nobel Prize in Chemistry 第五页,讲稿共三十三页哦脲酶的结晶n 19261926年,年,SumnerSumner从刀豆种子得到脲酶结晶,从刀豆种子得到脲酶结晶,首次证明酶是首次证明酶是具有催化活性的蛋白质具有催化活性的蛋白质;n1930-361930-36年,年,Northrop Northrop 得到了胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝得到了胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的结晶乳蛋白酶的结晶,并进一步证明了酶是蛋白质。并进一步证明了酶是蛋白质。The Nobe
7、l Prize in Chemistry,1946“for discovery that enzymes can be crystallized”J.B.SumnerJ.H.Northrop第六页,讲稿共三十三页哦核酶核酶(ribozyme)的发现的发现n n1982198219821982年,年,年,年,CechCechCechCech和和和和AltmanAltmanAltmanAltman对四膜虫的研究中发现某些对四膜虫的研究中发现某些对四膜虫的研究中发现某些对四膜虫的研究中发现某些RNARNARNARNA分子具有催化活性,从而发现核酶,分子具有催化活性,从而发现核酶,分子具有催化活性,从
8、而发现核酶,分子具有催化活性,从而发现核酶,打破了以往酶是打破了以往酶是打破了以往酶是打破了以往酶是蛋白质的传统观念蛋白质的传统观念蛋白质的传统观念蛋白质的传统观念。Sidney Altman,Yale UniversityThomas Cech University of Colorado2 2人共同获人共同获19891989年年 诺贝尔化学奖。诺贝尔化学奖。第七页,讲稿共三十三页哦二、酶的定义二、酶的定义n n酶是一类由活细胞产生的,对其特异底物具有高酶是一类由活细胞产生的,对其特异底物具有高酶是一类由活细胞产生的,对其特异底物具有高酶是一类由活细胞产生的,对其特异底物具有高效催化作用的蛋
9、白质。效催化作用的蛋白质。效催化作用的蛋白质。效催化作用的蛋白质。n n*酶是活细胞产生的,以蛋白质为主要成分的生物催化酶是活细胞产生的,以蛋白质为主要成分的生物催化酶是活细胞产生的,以蛋白质为主要成分的生物催化酶是活细胞产生的,以蛋白质为主要成分的生物催化剂剂剂剂(biocatalystsbiocatalysts)。将生物催化剂分为两类将生物催化剂分为两类将生物催化剂分为两类将生物催化剂分为两类 酶酶酶酶 非酶生物催化剂非酶生物催化剂非酶生物催化剂非酶生物催化剂 如:核酶(脱氧核酶)如:核酶(脱氧核酶)如:核酶(脱氧核酶)如:核酶(脱氧核酶)第八页,讲稿共三十三页哦酶及生物催化剂概念的发展酶
10、及生物催化剂概念的发展克隆酶、化学修饰酶克隆酶、化学修饰酶生物催化剂生物催化剂(Biocatalyst)蛋白质类:蛋白质类:Enzyme(天然酶、生物工程酶天然酶、生物工程酶)核酸类:核酸类:Ribozyme;Deoxyribozyme模拟生物催化剂:模拟生物催化剂:人工酶人工酶第九页,讲稿共三十三页哦三、三、酶的组成酶的组成蛋白质部分:酶蛋白蛋白质部分:酶蛋白 (apoenzyme)辅助因子辅助因子(cofactor)金属离子金属离子小分子有机化合物小分子有机化合物结合蛋白质酶结合蛋白质酶全酶全酶(holoenzyme)n n结合酶结合酶结合酶结合酶 (conjugated enzyme)(
11、conjugated enzyme)n n单纯酶单纯酶 (simple enzyme)1 1、酶的分子组成、酶的分子组成、酶的分子组成、酶的分子组成第十页,讲稿共三十三页哦金属离子的作用金属离子的作用参与催化反应,传递电子;参与催化反应,传递电子;在酶与底物间起桥梁作用;在酶与底物间起桥梁作用;稳定酶的构象;稳定酶的构象;中和阴离子,降低反应中的静电斥力等。中和阴离子,降低反应中的静电斥力等。金属离子:金属离子:Fe2+、Zn2+、Cu+、Cu2+、Mn2+、Mg2+小分子有机化合物的作用小分子有机化合物的作用参与酶的催化过程,在反应中传递电子、质参与酶的催化过程,在反应中传递电子、质子或一些
12、基团。子或一些基团。有机小分子:有机小分子:NAD,NADP,FAD,生物素,卟啉,生物素,卟啉第十一页,讲稿共三十三页哦金属酶金属酶(metalloenzyme)金属离子与酶结合紧密,提取过程中不易丢失。金属离子与酶结合紧密,提取过程中不易丢失。金属激活酶金属激活酶(metal-activated enzyme)金属离子为酶的活性所必需,但与酶的结合不甚紧密。金属离子为酶的活性所必需,但与酶的结合不甚紧密。酶需要该种金属离子才能发挥最大活性,金属离子起激活剂的酶需要该种金属离子才能发挥最大活性,金属离子起激活剂的作用作用 金属离子的存在形式金属离子的存在形式第十二页,讲稿共三十三页哦辅助因子
13、分类辅助因子分类(按其(按其与酶蛋白结合的紧密程度与酶蛋白结合的紧密程度)辅酶辅酶(coenzyme):与酶蛋白结合与酶蛋白结合疏松,可用疏松,可用透析或超滤的方法透析或超滤的方法除去。除去。辅基辅基(prosthetic group):与酶蛋白结合与酶蛋白结合紧密,不能用紧密,不能用透析或超滤透析或超滤的方法除去的方法除去。第十三页,讲稿共三十三页哦辅助因子的作用特点辅助因子的作用特点n n一一种种酶酶蛋蛋白白一一般般只只和和一一种种辅辅助助因因子子结结合合,成成为为一种特异性的酶;一种特异性的酶;n n但但一一种种辅辅助助因因子子能能与与不不同同的的酶酶蛋蛋白白结结合合构构成成许许多种特异
14、性的酶。多种特异性的酶。第十四页,讲稿共三十三页哦*各部分在催化反应中的作用各部分在催化反应中的作用qq酶蛋白酶蛋白决定反应的特异性决定反应的特异性(底物专一性)(底物专一性)qq辅助因子辅助因子决定决定酶促反应的类型酶促反应的类型和和反应的性质反应的性质(反(反应专一性)应专一性)第十五页,讲稿共三十三页哦2、酶的结构组成、酶的结构组成按酶的分子结构特点分类按酶的分子结构特点分类按酶的分子结构特点分类按酶的分子结构特点分类单体酶单体酶(monomeric enzyme):仅由单一肽链组成的具有完全:仅由单一肽链组成的具有完全催化活性的酶。催化活性的酶。如:溶菌酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等如:溶
15、菌酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等寡聚酶寡聚酶(oligomeric enzyme):由多个相同或不同亚基以非:由多个相同或不同亚基以非共价键连接组成的酶。共价键连接组成的酶。如:乳酸脱氢酶、丙酮酸激酶等如:乳酸脱氢酶、丙酮酸激酶等多酶体系多酶体系(multienzyme system):由几种不同功能的酶彼此聚:由几种不同功能的酶彼此聚合形成的多酶复合物。合形成的多酶复合物。如:丙酮酸脱氢酶系、脂肪酸合成酶复合体等。如:丙酮酸脱氢酶系、脂肪酸合成酶复合体等。第十六页,讲稿共三十三页哦n n*多功能酶多功能酶(multifunctional enzyme)或或串联酶串联酶(tandem enzyme
16、):一些多酶体系在一些多酶体系在进化过程中由于基因的融合,多种不同催化功能存进化过程中由于基因的融合,多种不同催化功能存在于一条多肽链中,这类酶称为多功能酶。在于一条多肽链中,这类酶称为多功能酶。多功能酶多功能酶第十七页,讲稿共三十三页哦四、酶促反应的特点四、酶促反应的特点n n酶与一般催化剂的共同点酶与一般催化剂的共同点n n酶促反应的特性酶促反应的特性第十八页,讲稿共三十三页哦1、酶与一般催化剂的共同点、酶与一般催化剂的共同点在反应前后没有质和量的变化;在反应前后没有质和量的变化;在反应前后没有质和量的变化;在反应前后没有质和量的变化;只能催化热力学允许的化学反应;只能催化热力学允许的化学
17、反应;只能催化热力学允许的化学反应;只能催化热力学允许的化学反应;只能加速可逆反应的进程,而不改变反应的平衡点。只能加速可逆反应的进程,而不改变反应的平衡点。只能加速可逆反应的进程,而不改变反应的平衡点。只能加速可逆反应的进程,而不改变反应的平衡点。都是通过降低反应分子的活化能来加快化学反应的速都是通过降低反应分子的活化能来加快化学反应的速都是通过降低反应分子的活化能来加快化学反应的速都是通过降低反应分子的活化能来加快化学反应的速度度度度第十九页,讲稿共三十三页哦反应总能量改变反应总能量改变 非催化反应活化能非催化反应活化能 酶促反应酶促反应 活化能活化能 一般催化剂催一般催化剂催化反应的活化
18、能化反应的活化能 能能量量反反 应应 过过 程程 底物底物 产物产物 酶促反应活化能的改变酶促反应活化能的改变 活化能活化能:底物分子从基态转变到活化态所需的能量底物分子从基态转变到活化态所需的能量。第二十页,讲稿共三十三页哦(1 1 1 1)酶促反应具有极高的效率酶促反应具有极高的效率酶促反应具有极高的效率酶促反应具有极高的效率 2 2、酶促反应的特点酶促反应的特点催催化化效效率率通通常常比比非非催催化化反反应应高高1081020倍倍,比比一一般般催化剂高催化剂高1071013倍;倍;酶比一般催化剂更有效地降低反应的活化能。酶比一般催化剂更有效地降低反应的活化能。第二十一页,讲稿共三十三页哦
19、按照酶对底物选择性的严格程度,按照酶对底物选择性的严格程度,按照酶对底物选择性的严格程度,按照酶对底物选择性的严格程度,酶的专一性可大致分为酶的专一性可大致分为酶的专一性可大致分为酶的专一性可大致分为3 3 3 3种类型:种类型:种类型:种类型:n n绝对专一性绝对专一性绝对专一性绝对专一性:只作用于一种化合物只作用于一种化合物只作用于一种化合物只作用于一种化合物 n n相对专一性:相对专一性:相对专一性:相对专一性:作用于一类化合物或一种化学键作用于一类化合物或一种化学键作用于一类化合物或一种化学键作用于一类化合物或一种化学键n n立体结构专一性:立体结构专一性:立体结构专一性:立体结构专一
20、性:只作用于立体异构体中的一种只作用于立体异构体中的一种只作用于立体异构体中的一种只作用于立体异构体中的一种第二十三页,讲稿共三十三页哦绝对专一性:绝对专一性:绝对专一性:绝对专一性:只催化某一种底物只催化某一种底物脲酶只能催化尿素水解脲酶只能催化尿素水解脲酶只能催化尿素水解脲酶只能催化尿素水解第二十四页,讲稿共三十三页哦相对专一性相对专一性(1 1)键专一性)键专一性 只要求作用于特定的化学键只要求作用于特定的化学键第二十五页,讲稿共三十三页哦相对专一性相对专一性(2 2)族专一性(基团专一性,)族专一性(基团专一性,group specificitygroup specificity)如如
21、-D-D-葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶 不但要求作用物具有一定化学键,而且对此键两端连接的两个基不但要求作用物具有一定化学键,而且对此键两端连接的两个基团也有一定的要求团也有一定的要求。l可催化蔗糖或麦芽糖水解,但不能使含有-葡萄糖苷的纤维二糖水解。第二十六页,讲稿共三十三页哦消化道内几种蛋白酶的专一性消化道内几种蛋白酶的专一性胰凝乳胰凝乳蛋白酶蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶羧肽酶羧肽酶氨肽酶氨肽酶R1=Phe、Trp、TyrR3=Arg、Lys第二十七页,讲稿共三十三页哦立体专一性立体专一性 (1 1)旋光异构专一性:)旋光异构专一性:(2 2)几何异构专一性)几何异构专一性 :L-L-氨基酸氨基酸+L-L
22、-氨基酸氧化酶氨基酸氧化酶a a-酮酸酮酸琥珀酸琥珀酸琥珀酸脱氢酶琥珀酸脱氢酶延胡索酸延胡索酸第二十八页,讲稿共三十三页哦(3)酶促反应的可调节性)酶促反应的可调节性n n酶促反应可受多种因素调控酶促反应可受多种因素调控酶促反应可受多种因素调控酶促反应可受多种因素调控n n对酶生成与降解量的调节对酶生成与降解量的调节n n酶催化效力的调节酶催化效力的调节n n通过改变底物浓度对酶进行调节等通过改变底物浓度对酶进行调节等第二十九页,讲稿共三十三页哦(4)酶促反应需要温和的环境条件n n最适温度、最适温度、pH、常压;、常压;第三十页,讲稿共三十三页哦(5 5)酶具有高不稳定性,酶易失活)酶具有高
23、不稳定性,酶易失活n n多数酶是蛋白质,多数酶是蛋白质,多数酶是蛋白质,多数酶是蛋白质,能被蛋白质变性剂所失活能被蛋白质变性剂所失活能被蛋白质变性剂所失活能被蛋白质变性剂所失活n n强酸、强碱、高温条件下易使酶失去活性。强酸、强碱、高温条件下易使酶失去活性。强酸、强碱、高温条件下易使酶失去活性。强酸、强碱、高温条件下易使酶失去活性。第三十一页,讲稿共三十三页哦酶的催化特性酶的催化特性n n极高的催化效率极高的催化效率比非催化高比非催化高10108 810102020倍倍比非酶催化高比非酶催化高10107 710101313倍倍n n 高度专一性高度专一性n n 反应条件温和反应条件温和n n易失活易失活n n 酶催化是可调控的酶催化是可调控的n n酶的催化活力与辅因子有关酶的催化活力与辅因子有关第三十二页,讲稿共三十三页哦感感谢谢大大家家观观看看第三十三页,讲稿共三十三页哦