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1、关于动物实验基础第1页，讲稿共71张，创作于星期日一、概念一、概念1、动物实验、动物实验以实验动物为材料，采用各种方法在实验动以实验动物为材料，采用各种方法在实验动物身上进行实验，研究实验过程中实验动物发物身上进行实验，研究实验过程中实验动物发生的生理、病理变化以及产生这些变化的机理，生的生理、病理变化以及产生这些变化的机理，从而为生命科学服务。从而为生命科学服务。第2页，讲稿共71张，创作于星期日2、实验动物、实验动物实验动物实验动物指以实验研究为目的而进行培育指以实验研究为目的而进行培育的，具有明确微生物和遗传背景的动物。的，具有明确微生物和遗传背景的动物。(1)通过人工培育。通过人工培育
2、。(2)对其携带的微生物实行控制、遗传学背景对其携带的微生物实行控制、遗传学背景明确。明确。(3)用于科学实验。用于科学实验。第3页，讲稿共71张，创作于星期日类型类型 1、按动物机体水平不同，可分为整体实验和、按动物机体水平不同，可分为整体实验和离体实验离体实验。（1）整体实验整体实验：整体动物和无损伤动物：整体动物和无损伤动物（2）离离体体实实验验：可可进进一一步步具具体体分分为为分分子子、亚亚细细胞胞、细细胞胞、组组织织、器官等不同水平的实验。器官等不同水平的实验。2、按动物实验所需时间的长短，、按动物实验所需时间的长短，（）急性实验（）急性实验（2天以内）天以内）（）亚急性实验（）亚急
3、性实验（14周）周）（）慢性实验（）慢性实验（26个月或更长时间甚至整个生命期）个月或更长时间甚至整个生命期）第4页，讲稿共71张，创作于星期日 1 1、按遗传学控制方法分类按遗传学控制方法分类 (1)(1)近交系动物近交系动物:近交系动物又称纯系动物，是指动物通近交系动物又称纯系动物，是指动物通过连续全同胞兄妹、亲子、堂兄妹近亲交配过连续全同胞兄妹、亲子、堂兄妹近亲交配2020代以上，群体基因达到高度纯合和稳定的代以上，群体基因达到高度纯合和稳定的动物群。动物群。优点优点：提高实验的精确度，减少实提高实验的精确度，减少实验的样本数，使实验结果更加可靠。验的样本数，使实验结果更加可靠。二二.实
4、验动物的分级和分类实验动物的分级和分类第5页，讲稿共71张，创作于星期日(2)(2)突变系动物突变系动物突变系动物是指保持有特殊的突变基因的品系动物。突变系动物是指保持有特殊的突变基因的品系动物。如贫血鼠、肿瘤鼠、白血病鼠、肥胖病大鼠如贫血鼠、肿瘤鼠、白血病鼠、肥胖病大鼠(fa)(fa)、白内障大鼠（、白内障大鼠（rcrc）、糖尿病大鼠）、糖尿病大鼠(di)(di)、新西、新西兰高血压大鼠兰高血压大鼠(GHR)(GHR)、米兰高血压大鼠、米兰高血压大鼠(MHS)(MHS)、尿崩症大、尿崩症大鼠（鼠（didi）、裸大鼠（）、裸大鼠（runrun）、糖尿病小鼠（）、糖尿病小鼠（dbdb）、肌）、肌
5、萎缩症小鼠萎缩症小鼠(dy)(dy)、无胸腺裸鼠（、无胸腺裸鼠（nunu）、肥胖症小鼠）、肥胖症小鼠（odod）、侏儒症小鼠（）、侏儒症小鼠（dwdw）、等。）、等。第6页，讲稿共71张，创作于星期日 (3)(3)系统杂交动物系统杂交动物系统杂交动物又称为杂交群动物系统杂交动物又称为杂交群动物系统杂交动物又称为杂交群动物系统杂交动物又称为杂交群动物把两种或两种以上把两种或两种以上把两种或两种以上把两种或两种以上的品系动物交配而生的后代的品系动物交配而生的后代的品系动物交配而生的后代的品系动物交配而生的后代。由两种纯种品系动物交配，即由两种纯种品系动物交配，即由两种纯种品系动物交配，即由两种纯种
6、品系动物交配，即2 2 2 2元杂交得到的第一子代动元杂交得到的第一子代动元杂交得到的第一子代动元杂交得到的第一子代动物，又称为物，又称为物，又称为物，又称为F F F F1 1代动物、代动物、代动物、代动物、F F F F1 1 1 1杂种动物。杂种动物。由两个以上的品系之间交配而生的后代，称为多元杂交，如由两个以上的品系之间交配而生的后代，称为多元杂交，如由两个以上的品系之间交配而生的后代，称为多元杂交，如由两个以上的品系之间交配而生的后代，称为多元杂交，如3 3 3 3元杂交、元杂交、4 4 4 4元杂交等。但一般科研实验所用的多为元杂交等。但一般科研实验所用的多为元杂交等。但一般科研实
7、验所用的多为元杂交等。但一般科研实验所用的多为F F F F1 1 1 1代动代动物。物。第7页，讲稿共71张，创作于星期日 (4)(4)封闭群动物封闭群动物以非近亲交配方式繁殖生产的一个实以非近亲交配方式繁殖生产的一个实验动物种群，在不从外部引入新的血缘验动物种群，在不从外部引入新的血缘条件下，至少连续繁殖条件下，至少连续繁殖4 4代以上，称为一代以上，称为一个封闭群，又称为远交群。个封闭群，又称为远交群。第8页，讲稿共71张，创作于星期日特点：特点：繁殖量较大，适应性和抗病力较强，繁殖量较大，适应性和抗病力较强，群内的基因频率能保持稳定。饲养成本也较群内的基因频率能保持稳定。饲养成本也较低
8、。但个体的重复性和一致性没有近交系和低。但个体的重复性和一致性没有近交系和系统杂交动物好。系统杂交动物好。在目前的实验中，这类动物占了很大的比在目前的实验中，这类动物占了很大的比例，如例，如WistarWistar大鼠、大鼠、SDSD（Sprague-DaweySprague-Dawey）大鼠、瑞士种大鼠、瑞士种(Swiss)(Swiss)小鼠、昆明种（小鼠、昆明种（KMKM）小鼠、小鼠、NIHNIH小鼠、小鼠、LACALACA小鼠、小鼠、Dunkin Dunkin HarlegHarleg豚鼠、青紫兰家兔、新西兰家兔、大豚鼠、青紫兰家兔、新西兰家兔、大耳白家兔等都属于这类。耳白家兔等都属于这
9、类。第9页，讲稿共71张，创作于星期日（1 1）无菌动物（）无菌动物（）是指机体内外均无任何寄生物（微生物和寄生虫）的动物。是指机体内外均无任何寄生物（微生物和寄生虫）的动物。此种动物在自然界中并不存此种动物在自然界中并不存在，必须用人为的方法培育出来。其法：一般将临产前的健康动物用麻醉药品在，必须用人为的方法培育出来。其法：一般将临产前的健康动物用麻醉药品或颈椎臼法处死后，立即浸泡在或颈椎臼法处死后，立即浸泡在37灭菌液中，送进无菌室（或无菌隔离器），灭菌液中，送进无菌室（或无菌隔离器），按无菌手术进行剖腹，切除带胎子宫（子宫内首先应无菌），将其浸入消毒液按无菌手术进行剖腹，切除带胎子宫（子
10、宫内首先应无菌），将其浸入消毒液里并输送到另一隔离器中，切开子宫取胎，经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐（电里并输送到另一隔离器中，切开子宫取胎，经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐（电刀切断）后，放隔离器内人工喂乳或用其它品系的无菌母鼠作保姆供养。小鼠刀切断）后，放隔离器内人工喂乳或用其它品系的无菌母鼠作保姆供养。小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦，故采用保姆代养较为方便。而豚鼠因在一定程和大鼠等用人工喂乳非常麻烦，故采用保姆代养较为方便。而豚鼠因在一定程度上能自力饮乳，故人工哺乳较容易。另外，禽类、鱼类、昆虫类，因是在卵度上能自力饮乳，故人工哺乳较容易。另外，禽类、鱼类、昆虫类，因是在卵中无菌的前提下进行的，故
11、用药物将卵周围灭菌后移入无菌隔离器内使其孵化中无菌的前提下进行的，故用药物将卵周围灭菌后移入无菌隔离器内使其孵化即可，而且，这些动物一般在在出生后能自力采食，故较易育成。即可，而且，这些动物一般在在出生后能自力采食，故较易育成。又称为四级又称为四级动物。动物。2.按微生物控制方法分类按微生物控制方法分类 第10页，讲稿共71张，创作于星期日（2）悉生动物）悉生动物是指机体内带着已知微生物（动物或植物）的动物。是指机体内带着已知微生物（动物或植物）的动物。此种动物原此种动物原是无菌动物，系人为的将指定微生物丛投给其体内，例如使大肠杆菌定居是无菌动物，系人为的将指定微生物丛投给其体内，例如使大肠杆
12、菌定居在无菌小鼠体内，在进行微生物检查时，仅能检出大肠杆菌。亦有人工投在无菌小鼠体内，在进行微生物检查时，仅能检出大肠杆菌。亦有人工投给二种以上的已知微生物。悉生动物一般分为单菌（给二种以上的已知微生物。悉生动物一般分为单菌（Monoxenie）、双）、双菌（菌（Dixenie）、三菌（）、三菌（Trixenie），或多菌（），或多菌（Polyxenie）动物。此种动）动物。此种动物同无菌动物一样是放在隔离器内饲育的，但因其带有已知的微生物，故物同无菌动物一样是放在隔离器内饲育的，但因其带有已知的微生物，故隔离器内有微生物及其代谢产物的污染。例如，人工投给的微生物，除可隔离器内有微生物及其代谢
13、产物的污染。例如，人工投给的微生物，除可在饮水中增殖外，还能在隔离器内放出大量的氨气。在饮水中增殖外，还能在隔离器内放出大量的氨气。第11页，讲稿共71张，创作于星期日（3 3）无特殊病原体动物（）无特殊病原体动物（）是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物，简称是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物，简称SPF动物。动物。但非但非特定的微生物和寄生虫是允许存在的，故其实际上就是指无传染病的健康特定的微生物和寄生虫是允许存在的，故其实际上就是指无传染病的健康动物。由于用疫苗和药物进行预防及治疗，或用淘汰带菌动物来作出动物。由于用疫苗和药物进行预防及治疗，或用淘汰带菌动物来作出SPF动物的
14、方法并不实用（既浪费时间，又难保确实除去病原）。故一般大动物的方法并不实用（既浪费时间，又难保确实除去病原）。故一般大多先培育出无菌动物或悉生动物后，再把其转移到有封闭系统多先培育出无菌动物或悉生动物后，再把其转移到有封闭系统（Barrier System）的设施中饲育繁殖。原则上）的设施中饲育繁殖。原则上SPF动物室内是不允许动物室内是不允许存在病原菌的，但在封闭系统环境中，难免有很多非病原性微生物存在病原菌的，但在封闭系统环境中，难免有很多非病原性微生物会逐渐进入动物机体内，故亦有人把这个转移过程称之为通常动物会逐渐进入动物机体内，故亦有人把这个转移过程称之为通常动物化。化。SPF动物的祖
15、先是无菌动物，按理来说，无菌动物的子宫内和卵中应动物的祖先是无菌动物，按理来说，无菌动物的子宫内和卵中应该是无菌的，然而，有些病毒实际上是通过亲代传给胎儿的，因此，在作该是无菌的，然而，有些病毒实际上是通过亲代传给胎儿的，因此，在作出无菌动物和出无菌动物和SPF动物之前，必须充分考虑这个问题。动物之前，必须充分考虑这个问题。这是目前国际标准这是目前国际标准级别的实验动物。级别的实验动物。第12页，讲稿共71张，创作于星期日4清洁普通动物，亦称最低限度疾病动物，或称清洁动物清洁普通动物，亦称最低限度疾病动物，或称清洁动物来自屏障系统的来自屏障系统的SPF动物，饲养在设有两条走廊的，温湿度恒定动物
16、，饲养在设有两条走廊的，温湿度恒定的普通设施中的动物。垫料、饲料、用具等均应经过高压消毒。饮水的普通设施中的动物。垫料、饲料、用具等均应经过高压消毒。饮水pH为为2.52.8，鼠盒上带过滤帽，空气亦应经过一定的过滤，工作人，鼠盒上带过滤帽，空气亦应经过一定的过滤，工作人员穿干净服装操作，此类动物的微生物控制标准基本与员穿干净服装操作，此类动物的微生物控制标准基本与SPF相同，不相同，不同之处为血清病毒抗体检查（脑脊髓炎病毒、鼠肝炎病毒同之处为血清病毒抗体检查（脑脊髓炎病毒、鼠肝炎病毒）经常可检）经常可检出一定滴度的抗体，但不允许出现临床症状和脏器的病理变化和出一定滴度的抗体，但不允许出现临床症
17、状和脏器的病理变化和自然死亡。自然死亡。5.普通动物普通动物是未经积极的微生物学控制，普遍地饲养在开放卫生环是未经积极的微生物学控制，普遍地饲养在开放卫生环境里的动物。垫料和食物不经高压消毒，饮水为自来水，不喂青饲料。境里的动物。垫料和食物不经高压消毒，饮水为自来水，不喂青饲料。鼠应排除肺炎病毒，沙门氏菌和链球菌，地鼠不应有蛲虫。普遍动物鼠应排除肺炎病毒，沙门氏菌和链球菌，地鼠不应有蛲虫。普遍动物只能供教养和一般性实验，不适用于研究实验。只能供教养和一般性实验，不适用于研究实验。第13页，讲稿共71张，创作于星期日三、常用实验动物介绍三、常用实验动物介绍 1 1、家兔、家兔 家兔属哺乳纲，啮齿
18、目，兔科。家兔的寿命为家兔属哺乳纲，啮齿目，兔科。家兔的寿命为4 49 9年，年，性成熟期为性成熟期为5 58 8个月。母兔孕期个月。母兔孕期3030天，每胎可产仔天，每胎可产仔1 15 5只。只。用家兔作实验动物有以下优点：一是来源较充足，易于用家兔作实验动物有以下优点：一是来源较充足，易于饲养，较耐寒冷，繁殖率高，价格较低。二是家兔性较温顺，饲养，较耐寒冷，繁殖率高，价格较低。二是家兔性较温顺，便于捕捉、搬运、实验操作，平时也较为安静，一般没有叫便于捕捉、搬运、实验操作，平时也较为安静，一般没有叫声。三是形体较大，可以直接记录血压、呼吸、心跳、体温声。三是形体较大，可以直接记录血压、呼吸、
19、心跳、体温等，而且一次可采取较大量的血液等，而且一次可采取较大量的血液(约约10ml)10ml)，也可采取脑脊，也可采取脑脊液。液。第14页，讲稿共71张，创作于星期日（1 1）适应范围）适应范围1 1）发热：如家兔对各种致热原较为敏感，易发热，适宜于研究发热机理、）发热：如家兔对各种致热原较为敏感，易发热，适宜于研究发热机理、检查致热原和研究退热药药理之用。检查致热原和研究退热药药理之用。2 2）感染：家兔易感受多种细菌、病毒，所以适合于制作各种感）感染：家兔易感受多种细菌、病毒，所以适合于制作各种感染的动物模型。染的动物模型。3 3）心脏功能：家兔的心脏在离体条件下能维持较长的搏动时间，）
20、心脏功能：家兔的心脏在离体条件下能维持较长的搏动时间，所以离体兔心可用于观察多种病因或药物对心脏病的直接作用。所以离体兔心可用于观察多种病因或药物对心脏病的直接作用。家兔的耳部血管清晰，可用于观察药物对血管的直接作用。家兔的耳部血管清晰，可用于观察药物对血管的直接作用。（2 2）不足之处）不足之处1 1）消化：家兔属食草动物，其消化系统与人的差别较大，不适宜）消化：家兔属食草动物，其消化系统与人的差别较大，不适宜用作研究消化系统药物的药理。用作研究消化系统药物的药理。2 2）呕吐、咳嗽：家兔缺乏呕吐和咳嗽反射，因而即使胃或肺部）呕吐、咳嗽：家兔缺乏呕吐和咳嗽反射，因而即使胃或肺部发生病变，也无
21、外在呕吐、咳嗽等表现。发生病变，也无外在呕吐、咳嗽等表现。第15页，讲稿共71张，创作于星期日（3 3）常见品种）常见品种1 1）青紫兰兔青紫兰兔，又名金基拉种家兔，原为法国培育的品种。毛色特点是，又名金基拉种家兔，原为法国培育的品种。毛色特点是全身以银灰色为主，其毛多毛根灰色，中段白色，毛尖黑色，两耳一全身以银灰色为主，其毛多毛根灰色，中段白色，毛尖黑色，两耳一垂一竖，母兔颌下有肉髯。成年兔体重约垂一竖，母兔颌下有肉髯。成年兔体重约2.52.55 5公斤，体质健壮，生长公斤，体质健壮，生长快，繁殖率强，抗病力强，多用于生物制品和药品鉴定的研究。快，繁殖率强，抗病力强，多用于生物制品和药品鉴定
22、的研究。2 2）大耳白兔大耳白兔，又名日本大耳兔。是在中国白兔基础上由日本选育而成的。，又名日本大耳兔。是在中国白兔基础上由日本选育而成的。其外观特点是全身毛纯白，红眼睛，两耳长大而竖起，头呈方形，嘴稍钝，其外观特点是全身毛纯白，红眼睛，两耳长大而竖起，头呈方形，嘴稍钝，四肢粗壮，体型较长，毛浓密。成年兔体重约四肢粗壮，体型较长，毛浓密。成年兔体重约4 46 6公斤，体格健壮，繁殖公斤，体格健壮，繁殖率强，生长快，耳部皮薄，耳部血管清晰，因而在耳上作静脉注射比率强，生长快，耳部皮薄，耳部血管清晰，因而在耳上作静脉注射比较方便。但是抗病力较差。较方便。但是抗病力较差。第16页，讲稿共71张，创作
23、于星期日2 2、小鼠、小鼠小鼠属哺乳纲，啮齿目，鼠科，是野生鼷鼠的变种，其较常小鼠属哺乳纲，啮齿目，鼠科，是野生鼷鼠的变种，其较常见的是小白鼠，全身白毛，但也有其它毛色者。小鼠寿命约见的是小白鼠，全身白毛，但也有其它毛色者。小鼠寿命约2 2年，年，性成熟期性成熟期35355555天，孕期天，孕期20202525天，每胎生仔天，每胎生仔2 21212只，成年小鼠体只，成年小鼠体重约为重约为202030g30g。用小鼠作动物实验有以下的优点：一是来源方便，繁殖周期短，产仔用小鼠作动物实验有以下的优点：一是来源方便，繁殖周期短，产仔多，生长速度快，饲料消耗少，生活条件容易控制，价格低。适合于需要多，
24、生长速度快，饲料消耗少，生活条件容易控制，价格低。适合于需要大量动物的实验。二是小鼠较易培育成纯系动物，具有较多的近交系、突大量动物的实验。二是小鼠较易培育成纯系动物，具有较多的近交系、突变系、变系、F1F1动物和封闭群等，便于科学研究之用。三是小鼠较为温顺，易动物和封闭群等，便于科学研究之用。三是小鼠较为温顺，易于捕捉和进行实验操作。于捕捉和进行实验操作。第17页，讲稿共71张，创作于星期日（1 1）适用范围）适用范围1 1）动物实验中用得最多的动物，可以制作多种疾病的动）动物实验中用得最多的动物，可以制作多种疾病的动物模型。物模型。2 2）药理、药效、毒理研究。）药理、药效、毒理研究。（2
25、 2）不足之处：）不足之处：1 1）对外界环境的适应能力差，如气温过高或过低，）对外界环境的适应能力差，如气温过高或过低，或过饥过饱等，均会引起死亡，抗病力也较差。或过饥过饱等，均会引起死亡，抗病力也较差。2 2）个体较小，每次取血量较少，也不适宜进行连续采）个体较小，每次取血量较少，也不适宜进行连续采血。血。3 3）在体实验较为困难。）在体实验较为困难。第18页，讲稿共71张，创作于星期日（3 3）品种）品种小鼠的品系较多，目前已培育的近交系有数百种，小鼠的品系较多，目前已培育的近交系有数百种，是但国际上最常用的近交系品种也只有是但国际上最常用的近交系品种也只有7 71010种。种。1 1）
26、中国昆明（）中国昆明（KMKM）种：属封闭群动物，系在）种：属封闭群动物，系在19461946年从年从印度引进到昆明，于印度引进到昆明，于19521952年从昆明引进到北京生物制品年从昆明引进到北京生物制品研究所，再推广到全国。抗病能力较强，容易饲养，研究所，再推广到全国。抗病能力较强，容易饲养，繁殖率高。现普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒繁殖率高。现普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒学的研究及生物制品和药品的鉴定等方面。学的研究及生物制品和药品的鉴定等方面。2 2）ICRICR小鼠：小鼠：3 3）LACALACA小鼠小鼠 第19页，讲稿共71张，创作于星期日3.3.品种品种小鼠的品系较多，
27、目前已培育的近交系有数百种，是但小鼠的品系较多，目前已培育的近交系有数百种，是但国际上最常用的近交系品种也只有国际上最常用的近交系品种也只有7 71010种。种。（1 1）中国昆明（）中国昆明（KMKM）种：属封闭群动物，系在）种：属封闭群动物，系在19461946年从印年从印度引进到昆明，于度引进到昆明，于19521952年从昆明引进到北京生物制品年从昆明引进到北京生物制品研究所，再推广到全国。抗病能力较强，容易饲养，研究所，再推广到全国。抗病能力较强，容易饲养，繁殖率高。现普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒繁殖率高。现普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒学的研究及生物制品和药品的鉴定等方面。
28、学的研究及生物制品和药品的鉴定等方面。（2 2）ICRICR小鼠：小鼠：（3 3）LACALACA小鼠小鼠 第20页，讲稿共71张，创作于星期日3 3、大鼠、大鼠大鼠属哺乳纲，啮齿目，鼠科，大鼠属，是野生褐鼠的饲养变种。大鼠属哺乳纲，啮齿目，鼠科，大鼠属，是野生褐鼠的饲养变种。其多数品种全身被白毛，即为大白鼠。其脚掌无毛，尾毛稀少。寿命为其多数品种全身被白毛，即为大白鼠。其脚掌无毛，尾毛稀少。寿命为2 23 3年，性成熟期年，性成熟期2 23 3个月，孕期个月，孕期3030天，每胎可产仔天，每胎可产仔5 59 9只，成年大鼠只，成年大鼠体重约体重约150150250g250g。大鼠作动物实验有
29、以下的优点：大鼠作动物实验有以下的优点：1 1，来源较方便，抗病力强，繁殖率高，价格也较低，所以实验经费较少。，来源较方便，抗病力强，繁殖率高，价格也较低，所以实验经费较少。2 2，较适合用于要求动物同种或纯种、同性别，同年龄的一类实验。，较适合用于要求动物同种或纯种、同性别，同年龄的一类实验。3 3，适用于需要大量动物，但小鼠又不能满足实验要求的实验，如实，适用于需要大量动物，但小鼠又不能满足实验要求的实验，如实验要求较多的采血量，或需要进行在体实验者。验要求较多的采血量，或需要进行在体实验者。第21页，讲稿共71张，创作于星期日（1 1）适用范围：）适用范围：1 1）大鼠的血压反应较好，适
30、用于直接描记血压。）大鼠的血压反应较好，适用于直接描记血压。2 2）大鼠的后肢可以作肢体血管灌流。）大鼠的后肢可以作肢体血管灌流。3 3）心脏可作离体心脏实验。）心脏可作离体心脏实验。4 4）大鼠无胆囊，所以可用大鼠胆管收集胆汁，进行肝胆的）大鼠无胆囊，所以可用大鼠胆管收集胆汁，进行肝胆的有关实验。有关实验。5 5）对营养缺乏较敏感，适合用于营养学的研究。）对营养缺乏较敏感，适合用于营养学的研究。（2 2）不足之处）不足之处1 1）大鼠性情不够温顺，特别是在受惊后会咬人，所以在）大鼠性情不够温顺，特别是在受惊后会咬人，所以在实验操作时要小心，或要戴手套以防护。实验操作时要小心，或要戴手套以防护
31、。2 2）雄鼠之间每发生争斗、撕咬。）雄鼠之间每发生争斗、撕咬。3 3）采血量也较为有限）采血量也较为有限(约约4 45ml)5ml)，有时不能满足检测的需，有时不能满足检测的需要。要。第22页，讲稿共71张，创作于星期日（3 3）品种）品种大鼠的品种较多，国际上公认的近交系达大鼠的品种较多，国际上公认的近交系达130130余种。余种。主要有以下几种：主要有以下几种：1 1）WistarWistar品种品种:属封闭群动物，系从日本、苏联引进。属封闭群动物，系从日本、苏联引进。性情较温顺，适应性强，应用较广泛，但因已有大量性情较温顺，适应性强，应用较广泛，但因已有大量遗传变异，现已逐步少用。遗传
32、变异，现已逐步少用。2 2）SD(Sprague-Dawley)SD(Sprague-Dawley)品种品种:属封闭群动物，是由上一品属封闭群动物，是由上一品种培育而来，有纯种和近交系两种。其特点是体形较大，种培育而来，有纯种和近交系两种。其特点是体形较大，性情温顺，发育优良，多用于营养学和内分泌系统实验和性情温顺，发育优良，多用于营养学和内分泌系统实验和一般检定。一般检定。第23页，讲稿共71张，创作于星期日4 4、豚鼠、豚鼠又名天竺鼠、荷兰猪、海猪，原产于南美洲，后引进到欧又名天竺鼠、荷兰猪、海猪，原产于南美洲，后引进到欧洲，属哺乳纲、啮齿目、豚鼠科、豚鼠属。性情温顺，胆小，洲，属哺乳纲、
33、啮齿目、豚鼠科、豚鼠属。性情温顺，胆小，不咬人。其中又可分为短毛、长毛、刚毛三种，一般多用非纯不咬人。其中又可分为短毛、长毛、刚毛三种，一般多用非纯种短毛豚鼠，毛色黄、黑、白相间，称为三色豚鼠，也有两色种短毛豚鼠，毛色黄、黑、白相间，称为三色豚鼠，也有两色和单色者。和单色者。用豚鼠作动物实验有以下优点：繁殖较快，饲养方便，用豚鼠作动物实验有以下优点：繁殖较快，饲养方便，易进行同种、同性别、同年龄的一类实验。易进行同种、同性别、同年龄的一类实验。第24页，讲稿共71张，创作于星期日（1 1）适用范围）适用范围1 1）对结核、白喉、百日咳等细菌及螺旋体等病原微生物较为敏感，反应）对结核、白喉、百日
34、咳等细菌及螺旋体等病原微生物较为敏感，反应也较为一致，所以常用于这类疾病的研究。也较为一致，所以常用于这类疾病的研究。2 2）豚鼠对组织胺敏感，常用于平喘药和抗组织胺药的药理研究）豚鼠对组织胺敏感，常用于平喘药和抗组织胺药的药理研究和免疫学方面的研究。和免疫学方面的研究。3 3）豚鼠的血管反应敏感，可用于出血性疾病及血管通透性实验。）豚鼠的血管反应敏感，可用于出血性疾病及血管通透性实验。4 4）豚鼠体内不能合成维生素）豚鼠体内不能合成维生素C C，对维生素，对维生素C C的缺乏很敏感，适合进的缺乏很敏感，适合进行维生素行维生素C C的实验研究。的实验研究。（2 2）不足之处）不足之处1 1）豚
35、鼠的皮较厚，注射较困难。）豚鼠的皮较厚，注射较困难。2 2）易患病，笼养易发生足底溃疡，胆小，对外界刺激极敏感。）易患病，笼养易发生足底溃疡，胆小，对外界刺激极敏感。第25页，讲稿共71张，创作于星期日5 5、狗、狗（1 1）狗可通过训练与实验者配合，所以可在清醒及安静状）狗可通过训练与实验者配合，所以可在清醒及安静状态下进行胃瘘、肠瘘、膀胱瘘、胆囊瘘等观察。态下进行胃瘘、肠瘘、膀胱瘘、胆囊瘘等观察。（2 2）狗的血液循环和神经系统较发达，消化过程与人相似，所以）狗的血液循环和神经系统较发达，消化过程与人相似，所以常用于血液、循环、消化等系统和高级神经活动、外科手术、血常用于血液、循环、消化等
36、系统和高级神经活动、外科手术、血管移植等各种实验。管移植等各种实验。（3 3）毒理和药理研究。在新药研制中，进行亚急性和慢性毒性）毒理和药理研究。在新药研制中，进行亚急性和慢性毒性实验的两种动物中，就规定其中一种必须用狗。实验的两种动物中，就规定其中一种必须用狗。（4 4）动物的体形较大，易于进行在体实验和进行多种的测试。）动物的体形较大，易于进行在体实验和进行多种的测试。狗的品种虽多达数百种，其中实验专用犬并不多，国内狗的品种虽多达数百种，其中实验专用犬并不多，国内已引进了已引进了BeagleBeagle犬，培育成二级动物。一般实验多用普通犬，培育成二级动物。一般实验多用普通家犬，应注意检疫
37、，保证健康无病。家犬，应注意检疫，保证健康无病。第26页，讲稿共71张，创作于星期日动物实验基本方法动物实验基本方法 第27页，讲稿共71张，创作于星期日一、实验动物的抓取固定方法一、实验动物的抓取固定方法（一）小鼠抓取固定方法（一）小鼠抓取固定方法小鼠温顺，一般不会咬人，抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠小鼠温顺，一般不会咬人，抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两笼或实验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，
38、以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。有经验者直接用左手小指钩起鼠尾，迅速以拇指和小指按住后腿即可。有经验者直接用左手小指钩起鼠尾，迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。这种在手中固定方式，能进行食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。这种在手中固定方式，能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。如进行解实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时，则需将小鼠作一定形式的固定，剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时，则需将小鼠作一定形式的固定，解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位（必要时先行麻醉），再解剖手术和心脏采血等均可
39、使动物先取背卧位（必要时先行麻醉），再用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。尾静脉注射时，可用小鼠尾静用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。尾静脉注射时，可用小鼠尾静脉注射架固定，先根据动物大小选择好合适的固定架，并打开鼠筒盖，脉注射架固定，先根据动物大小选择好合适的固定架，并打开鼠筒盖，手提鼠尾巴，让动物头对准鼠筒口并送入筒内，调节鼠筒长短合适后，手提鼠尾巴，让动物头对准鼠筒口并送入筒内，调节鼠筒长短合适后，露出尾巴，固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。露出尾巴，固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。第28页，讲稿共71张，创作于星期日第29页，讲稿共71张，创作于星期日（二）
40、大鼠的抓取固定方法（二）大鼠的抓取固定方法大鼠的抓取斯基本同小鼠，只不过大鼠比小鼠牙尖性猛，不大鼠的抓取斯基本同小鼠，只不过大鼠比小鼠牙尖性猛，不易用袭击方式抓取，否则会被咬伤手指，抓取时为避免咬伤，可易用袭击方式抓取，否则会被咬伤手指，抓取时为避免咬伤，可带上帆布手套。如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时，同样带上帆布手套。如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时，同样可采用左手固定法，只是用拇指和食指捏住鼠耳，余下三指紧捏可采用左手固定法，只是用拇指和食指捏住鼠耳，余下三指紧捏鼠背皮肤，置于左掌心中，这样右手即可进行各种实验操作。也鼠背皮肤，置于左掌心中，这样右手即可进行各种实验操作。也可伸开
41、左手之虎口，敏捷地从后，一把抓住。若做手术或解剖等，可伸开左手之虎口，敏捷地从后，一把抓住。若做手术或解剖等，则需事先麻醉或处死，然后用细棉线绳活缚腿，背卧位绑在大鼠则需事先麻醉或处死，然后用细棉线绳活缚腿，背卧位绑在大鼠固定板上；尾静脉注射时的固定同小鼠（只需将固定架改为大鼠固定板上；尾静脉注射时的固定同小鼠（只需将固定架改为大鼠固定盒即可）。固定盒即可）。第30页，讲稿共71张，创作于星期日（三）兔的抓取固定方法（三）兔的抓取固定方法1抓取：抓取：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，
42、让其体以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其体重重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损重重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。2固定：固定：一般将家兔的固定分为盒式、台式和马蹄形三种。盒一般将家兔的固定分为盒式、台式和马蹄形三种。盒式固定，适用于兔耳采血、耳血管注射等情况；若做血压测量、呼式固定，适用于兔耳采血、耳血管注射等情况；若做血压测量、呼吸等实验和手术时，则需将兔固定在兔台上，四肢用粗棉绳活结绑吸等实验和手术时，则需将兔固定在兔台上，四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳绑在
43、兔台四周的固定木块上，头以固定夹固定住，拉直四肢，将绳绑在兔台四周的固定木块上，头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上；马蹄形固定，多用于或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上；马蹄形固定，多用于腰背部，尤其是颅脑部位的实验，固定时先剪去两侧眼眶下部的毛腰背部，尤其是颅脑部位的实验，固定时先剪去两侧眼眶下部的毛皮，暴露颧骨突起，调节固定器两端钉形金属棒。使其正好嵌在突皮，暴露颧骨突起，调节固定器两端钉形金属棒。使其正好嵌在突起下方的凹处，然后在适当的高度固定金属榛。用马蹄形固定器可起下方的凹处，然后在适当的高度固定金属榛。用马蹄形固定器可使兔取用背卧位和腹卧位，所以是研究中常采用
44、的固定方法。使兔取用背卧位和腹卧位，所以是研究中常采用的固定方法。第31页，讲稿共71张，创作于星期日1、2、3均为不正确的抓取方法（均为不正确的抓取方法（1可损伤两肾，可损伤两肾，2可造成可造成皮下出血，皮下出血，3可伤两耳），可伤两耳），4、5为正确的抓取方法。颈后部的为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用手托兔体。皮厚可以抓，并用手托兔体。第32页，讲稿共71张，创作于星期日家兔盒式固定法家兔盒式固定法 家兔台式固定法家兔台式固定法 第33页，讲稿共71张，创作于星期日动物在实验前常常需要作适当的分组，那么就动物在实验前常常需要作适当的分组，那么就要将其标记使各组加以区别。标记的方法
45、很多，要将其标记使各组加以区别。标记的方法很多，良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、适用的要求。适用的要求。常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。号牌等方法。二、实验动物编号标记方法二、实验动物编号标记方法第34页，讲稿共71张，创作于星期日（一）颜料涂染（一）颜料涂染这种标记方法在实验室最常使用，也很方便。使用的颜料一这种标记方法在实验室最常使用，也很方便。使用的颜料一般有般有3-5%苦味酸溶（黄），苦味酸溶（黄），2%硝酸银（咖啡色）溶液和硝酸银（咖啡色）溶液和0.5%中性品中性品红（红色）等。标
46、记时用毛笔或棉签蘸取上述溶液，在动物体的不同部位红（红色）等。标记时用毛笔或棉签蘸取上述溶液，在动物体的不同部位涂上斑点，以示不同号码。编号的原则是：先左后右，从上到下。一般把涂上斑点，以示不同号码。编号的原则是：先左后右，从上到下。一般把涂在左前腿上的计为涂在左前腿上的计为1号，左侧腹部计为号，左侧腹部计为2号，左后腿为号，左后腿为3号，头顶部计号，头顶部计为为4号，腰背部为号，腰背部为5号，尾基部为号，尾基部为6号，右前腿为号，右前腿为7号，右侧腰部为号，右侧腰部为8号，右后腿计为号，右后腿计为9号。若动物编号超过号。若动物编号超过10或更大数字时，可使用或更大数字时，可使用上述两种不同颜
47、色的溶液，即把一种颜色作为个倍数，另一种颜上述两种不同颜色的溶液，即把一种颜色作为个倍数，另一种颜色作为十位数，这种交互使用可编到色作为十位数，这种交互使用可编到99号，假使把红的记为十位号，假使把红的记为十位数，黄色记为个位数，那么右后腿黄斑，头顶红斑，则表示是数，黄色记为个位数，那么右后腿黄斑，头顶红斑，则表示是49号号鼠，其余类推。鼠，其余类推。第35页，讲稿共71张，创作于星期日第36页，讲稿共71张，创作于星期日（二）烙印法二）烙印法用刺数钳在动物耳上刺上号码，然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑用刺数钳在动物耳上刺上号码，然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹，烙印前最好对烙印部位
48、预先用酒精消毒。墨在刺号上加以涂抹，烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。（三）号牌法（三）号牌法用金属制的牌号固定于实验动物的耳上，大动物可系于颈上。用金属制的牌号固定于实验动物的耳上，大动物可系于颈上。对猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记，只记录它们的外表对猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记，只记录它们的外表和毛色即可。和毛色即可。第37页，讲稿共71张，创作于星期日三、实验动物的给药途径和方法三、实验动物的给药途径和方法1 1、注射给药法、注射给药法（1 1）皮皮下下注注射射大大鼠鼠、小小鼠鼠和和豚豚鼠鼠可可在在肩肩胛胛间间、腹腹部部或或腿腿内内侧侧皮皮下下注注射射；家家兔兔可可取取背
49、背部部或或耳耳根根部部皮皮下下注注射射；狗狗、猫猫常常在在大大腿腿外外侧侧皮皮下下注注射射；鸽鸽、鹌鹌鹑鹑通通常常在在翼翼下下注注射射；蛙蛙可可在脊背部淋巴腔注射。在脊背部淋巴腔注射。注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有5（1/2）号针头的注射器刺入皮下。）号针头的注射器刺入皮下。（2 2）皮皮内内注注射射：皮皮内内注注射射时时需需将将注注射射的的局局部部脱脱去去被被毛毛，消消毒毒后后，用用左左手手拇拇指指和和食食指指按按住住皮皮肤肤并并使使之之绷绷紧紧，在在两两指指之之间间，用用结结核核菌菌素素注注射射器器连连4(1/2)细细针针头头，紧紧贴贴皮皮肤肤
50、表表层层刺刺入入皮皮内内，然然后后再再向向上上挑挑起起并并再再稍稍刺刺入入，即即可可注注射射药药液液，此此时时可可见见皮皮肤表面鼓起一白色小皮丘。肤表面鼓起一白色小皮丘。（3 3）肌肉注射肌肉注射大鼠、小鼠、豚鼠常在大腿内侧肌肉注射；家兔可在颈椎或腰椎旁的大鼠、小鼠、豚鼠常在大腿内侧肌肉注射；家兔可在颈椎或腰椎旁的肌肉注射；猫、狗等大动物常在臀部肌肉注射。肌肉注射；猫、狗等大动物常在臀部肌肉注射。肌肉注射应选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部。注射时垂直迅速刺肌肉注射应选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可进行注射。入肌肉，回抽针栓